天然药物中各类化学成分的检识方法
l、挥发油和油脂(1)油斑试验：将试液滴于滤纸上，能自然挥发或加热后挥发者可能为挥发油。??如果出现持久性的透明斑点，可能为油脂。(2)香草醛浓HCI试验，将试液滴于滤纸上，喷洒试剂如显紫、兰、黄、红色可能含挥发油。(对某些酚类、萜类、甾体等皆可显色)(3)丙烯醛试验：将试液3滴和倍量无水硫酸钠固体置于试管中，直火加热，甘油和甘油脂类能生成有刺激臭味的丙烯醛。(可用斐林试剂检查)2、蒽醌类（4)碱液试验(Borntragers反应)：取试液lml加1％NaoH溶液lml，即呈红一红紫色，亦有呈兰色者，表示可能有羟基蒽醌。(5)醋酸镁试验：取试液0.5ml，加人试剂2—3滴，若有羟基蒽醌类，则会出现橙、兰、紫色等。颜色随羟基数目、位置而定。3、香豆素（6)荧光试验：羟基香豆素类的极稀水溶液发生兰色荧光，加氨后呈黄色荧光。（7）异羟肟酸铁反应：取1N盐酸羟胺甲醇液0.5m1，置于小试管中，加试液数滴，加2N氢氧化钾甲醇液使溶液呈碱性，在水浴上煮沸2分钟，冷却后滴加5％HCI使溶液呈酸性，加1％FeCL3溶液l—2滴，若出现紫红色，表现有香豆素或其它酯类，内酯化合物。(8)取试品的乙醇液2m1，加1％NaOH液1m1，于沸水浴上加热10分钟(若有沉淀过滤除去)，于澄明液中加2％HCI液酸化后，溶液变混浊，为内酯、香豆素类反应。?[注]可同时取醇浸液2m1，不加试剂对照观察。4、黄酮类(9)盐酸镁粉反应：试品的乙醇溶液，加人浓盐酸5滴及少量镁粉，在沸水浴上加热l—2分钟，如呈现红色，表明含有游离黄酮类化合物，如不加镁粉只加浓盐酸即显红色者，可能为花青素。[注]多数黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇显橙色——紫红，黄酮甙及黄酮醇甙反应不明显，查耳酮、橙酮及儿茶素类无反应。(10)铝盐络合反应：取试样甲醇液0.5m1，滴加1％AICI3甲醇溶液，呈深黄色，放置后出现黄色荧光者为3，5一位游离羧基或邻二羟基黄酮类。(11)氨熏试验：将滴有试液的滤纸，加上一滴氨水，立即置紫外灯下观察，有极明显的黄色荧光斑点。5、糖、低聚糖和甙类(12)Molish反应：取供试液1m1加10％α一萘酚1—2滴，振摇，倾斜试管，沿管壁加人浓硫酸1m1界面出现紫红色环，表示含糖甙类。(13)斐林反应：取试品水溶液1-2m1，加入碱性酒石酸铜试剂lml，沸水浴上加热2—3分钟，产生棕红或砖红色沉淀(氧化亚铜)，表示含还原糖。?试液与10％硫酸煮沸5—10分钟，冷后以NaOH液中和，再加斐林试剂1m1沸水浴加热2—3分钟，产生的沉淀比水解前多，表示含多糖和甙。6．甾体、三萜皂甙(14)皂甙泡沫试验：取试品的中性或弱碱性热水溶液2ml，用力振摇1分钟，如产生多量泡沫，放置10分钟后泡沫没有显著消失即表明含有皂甙成分。另取两支试管，各加试品热水溶液1ml，一管内加5％NaOH液2ml溶液。另一管加人5％盐酸溶液2m1，将两试管用力振摇一分钟观察两管出现泡沫情况，如两管的泡沫高度相似，表明为三萜皂甙，如含碱液管比含酸液管的泡沫高达数倍，表明有团体皂甙。(15)浓硫酸醋酐反应(Liebemann—Burchard反应)取试品少许置白瓷板上，加入醋酐2—3滴，沿白瓷板加入一微滴(用毛细管加入)浓硫酸，交置面出现红色，渐变为紫一兰一绿色等，最后退色。(三萜皂甙最后变兰，甾体皂甙最后变绿色)(16)氯仿一浓硫酸试验(Salkowshi反应)将2m1试品的氯仿液，置于试管中，沿管壁滴加浓流酸2m1，氯仿层出现红色，硫酸层有绿色荧光。(如试品不是氯仿溶液，则需将其蒸干，再加2m1氯仿溶解)。[注]如泡沫反应明显，里伯曼反应红色不明显，可取糖，多糖及甙的水解液置分液漏斗中，加等量乙醚振摇提取，分出乙醚液，加无水硫酸钠少量脱水，挥去乙醚，再作里伯曼反应。7、有机酸(17)pH试纸检查(pH3以下可能含有机酸)(18)取试液少许加5％AgN03试剂，出现白色沉淀(在毛细管中作)。(19)溴酚兰试验：将试液滴于滤纸上，喷洒0.1％溴酚兰的乙醇液立即在兰色背景上显黄色斑色。???8、酚类与鞣质???(20)三氯化铁试验，取中性或酸性液3滴，置试管中，加1％FeCL3溶液1滴，出现兰、绿、紫色，表明可能含有酚类或鞣质(必要时可加热)。(21)明胶沉淀试验，取供试品水溶液，过滤，加入明胶试液l—2滴，出现混浊或白色沉淀可能有鞣质。(22)取试液lml，加0.1％盐酸小檗碱溶液2—3滴，如变混浊有沉淀表明可能有鞣质。(23)于滤纸上滴加试液，用三氯化铁——铁氰化钾试剂喷洒，有明显兰色，表明有酚类存在。?9、生物碱(24)试品酸性水溶液加碘化铋钾试剂产生棕色沉淀或混浊为阳性反应。(25)试品酸性水溶液，加碘一碘化钾试剂产生橙红色沉淀或混浊为阳性反应。???(26)试品中性水溶液与苦味酸试剂作用产生黄色沉淀，或混浊为阳性反应。(27)试品酸性水溶液加磷钨酸试剂产生白色沉淀或混浊为阳性反应。?10、强心甙???(28)亚硝酰铁氰化钠反应(1egal反应)：将试品溶于2—3滴吡啶中，加入0．3％亚硝酰铁氰化钠溶液1—2滴，再滴加10％NaOH溶液呈红色，渐渐消退。(29)3、5—二硝基苯甲酸试验(Kedde氏反应)，将试品少许加乙醇数滴溶解，加入Kedde试剂，呈紫色。?注：(28)、(29)为五元不饱和内酯环反应。?三氯化铁——冰醋酸反应?(Keller--Kiliani反应)?取试液lml加0.5％FeCl3，醋酸溶液1m1，沿管壁滴加H2SO41m1，二液面间出现棕色环(或其它颜色)，冰醋酸层呈绿色→兰色。(2—脱氧糖反应，杂质多时不明显，最好分离纯化后再作)注：甾体母核反应见(15)、(16)。11、蛋白质、多肽及氨基酸(31)双缩尿?(Biuret)试验：取试样0.5m1，加入1％NaOH溶液l—2滴，滴加0.5％CuSO4试液2滴，摇匀，出现紫色，红紫色表明含多肽或蛋白质。(32)茚三酮(Ninhydrin)试验：取试液0.5m1，加入试剂l—2滴摇匀，在沸水浴上加热数分钟，应出现兰色，紫色或红紫色，或将试液滴于滤纸上，烤干，喷洒试剂，再于100加热。2—5分钟呈色亦可。
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