第十二章核酸的生物合成一、DNA的生物合成二、RNA的生物合成一、DNA的生物合成（一）DNA的半保留复制居中重轻
01234单链环状DNA主要采用滚环式复制5′3′5′3′5′（二）DNA复制的起点和方向最早研究DNA复
制起点和方向的是J.Cairns（1963年）。θ型单向复制i双向复制观察到的放射自显影图象真核生物DNA的多起点复制
18%质粒ColE1的单向复制示意图单向复制（三）原核细胞的DNA复制1.DNA聚合酶Ⅰ（PolⅠ）（dNMP）n
+dNTPMg2+（dNMP）n+1+PPi特点（1）不能催化从无到有的聚合反应。（2）催化的反应只能在引物的3
′延伸。（3）3′接上的核苷酸决定于模板链。（4）具有5′→3′和3′→5′外切酶活性。PPPOH+OHPPPO
HPPPPPPOHOH+PDNA合成方向不可能是3′→5′的解释2.PolⅡ和PolⅢ三种聚合酶特性的比较
1985年A.K.Saiki等首先报道了PCR（多聚酶链式反应）5′5′1热变性2退火5′5′5′5′3
DNA聚合酶5′5′5′5′重复1，2，3PCR反应全过程3.双链DNA复制的分子机制（1）冈崎片段和半不
连续复制5′3′3′5′5′3′3′5′5′3′3′5′复制叉上DNA合成的三种可行性（2）冈崎片段的
RNA引物利福酶素对RNA聚合酶有抑制作用。氯霉素对蛋白质合成有抑制作用。噬菌体M13DNA复制的引物是RNA。由引物酶催
化。引物RNA在复制过程中暂时存在，最后通过PolⅠ的5′→3′外切酶活力水解。（3）DNA连接酶
催化一条DNA链的3′末端与相邻的另一条DNA链的5′末端之间的磷酸二酯键的合成。其它功能：（1）修补双螺旋DN
A中单股的缺口；（2）连接线状双螺旋DNA以产生环状DNA；（3）重组过程中将几段DNA链连接起来。（4）母本DNA双链的分离
DNA解螺旋酶（DNAhelicase）拓扑异构酶Ⅱ（typeⅡtopoisomerase）（5）DNA聚合酶的“校对”作
用DNA聚合酶的3′→5′外切酶活力是校对新生DNA链和改正聚合酶活性所造成“错配”的一种手段。4.真核细胞DNA的复制
（1）真核细胞DNA复制有多个起始点。（2）至少有5种DNA聚合酶，即α、β、γ、δ、ε。（3）端粒由端粒酶催化复制。生
物细胞DNA复制分子机制的基本特点5.反转录作用1970年Temin和Baltimore同时从RNA病毒中发现反转录酶。
利用反转录酶可制造与任何RNA（mRNA、tRNA、rRNA）的互补DNA（cDNA）。6.DNA的损伤与修复（1）DNA
损伤的各种结构变化①碱基缺失或插入②碱基改变③形成TT二聚体（2）修复机制①光复活②切除修复③重组修复④SOS修复
（3）修复缺陷和疾病癌症；着色性干皮病；贫血病。重组修复5′5′重组修复5′7.细菌的限制—修饰系统限制性
核酸内切酶限制性核酸内切酶识别的序列具有二次旋转对称性。限制性核酸内切酶酶切产生平头末端或粘性末端。5′—G—T—T—A—A
—C—3′3′—C—A—A—T—T—G—5′5′—G—T—TA—A—C—3′3′—C—A—AT
—T—G—5′平头末端HpaⅠ5′—G—A—A—T—T—C—3′3′—C—T—T—A—A—G—5′5′—G
T—T—A—A—C—3′3′—C—A—A—T—TG—5′粘性末端EcoRⅠ |
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