提出的问题国内外洁净区标准研讨欧、美和WHO标准回顾基本概念标准介绍发展趋势非无菌药品我国现有标准的误区万级无菌
更衣室HVAC-检漏和风速测试我国GMP与国际间差距FDA无菌药品GMP指南欧、美无菌药品GMPCGMP无菌药品
7万字（5万+2万）欧盟无菌药品~1万字2005-09-21有增补版，与FDA2004-09标准已经一致中国无菌药品0
.15万字无菌万级的由来对非无菌药品的环境要求洁净区悬浮粒子分类系统对照表FDA对洁净区的设置FDA建议，整个无菌灌装室
可设定为100级（ISO5，企业在灌装间满布高效过滤器）无菌生产线直接相邻的区域至少应为动态1万级（ISO7）企业可将此区域
设为1000级（ISO6）次重要的区域，如设备清洁，则可为10万级（ISO8）欧盟GMP2002微生物指标WHOGM
P-2002说明-1生产作业结束，在无操作人员在场情况下，经15-20分钟（指导值）自净后，洁净区的粒子应达到表中的静态标准。
药品或敞口容器直接暴露的区域，其粒子水平应当保持表2中的A级动态标准灌装时，产品本身产生的粒子或液珠会使灌装点测试结果并不始终
符合标准，这种状况是可以接受的。WHOGMP-2002说明-2A级区：高风险作业局部区域，如：灌装区、进行各种无菌连接的
区域。层流系统在其工作区应均匀送风，风速为0.45?20％m/s（指导值）。B、C、D换气次数应根据房间的大小、室内的设备和操作
人员的数量来决定。每一洁净室换气次数不低于20次/小时，通常应使用合适的高效过滤器并有良好的气流方式。指标中用0.5-5.0μ
m，因接近5μm的大微粒占的比例比较小，对测试数据影响不大，总体上看，WHO还是低于欧洲标准欧盟标准的四大难点A区的浮旅游菌、
沉降菌、表面微生物及手套均不得检出微生物（指标<1），而WHO则允许有3个菌，其它B、C、D级别指标相同。欧盟要求：…除有
充分理由，例如活病毒疫苗的灌装外，A区的微粒应连续监控或频繁取样。建议B区也采用类似的系统…。这类体系通常需要专用的粒子计数仪
；…A区监控的频率应足以保证检出所有的干扰及瞬时发生的事件，一旦发生偏离常规时，即启动报警系统；WHO无此要求。冻干…无菌灌装的
小瓶在完成轧盖前，尚没形成完整的密封系统。因此，应在A级保护下直到轧盖完成。培养基模拟灌装试验标准提高。欧盟与
WHO的其它内容：几无差别。无菌操作区发展趋势无菌制造工艺标准最低标准LABS（初级隔离系统）limited
accessbarriersystem中间标准RABS/RABS+（中级隔离系统）RestrictedAcce
ssBarrierSystem高级标准ISOLATOR（全隔离操作器）初级隔离系统-1LABS工艺操作被PC-聚碳酸
酯组成的帘膜-墙/门所保护必要时可将门帘打开通常通过手套管操作减少对层流的干扰以B级作为背景中级隔离系统-2RABS
工艺操作被PC-聚碳酸酯组成的帘膜-墙/门所保护只有应急才能打开开门必须有记录通常通过手套管操作物料通过物料口进对层流的
干扰须作解释以B级作为背景隔离操作器-3非无菌药品的生产环境非无菌药品的级别-原文2006-09-20AZ英国做环境监
测及全球规范组织的美国专家称：monitoringofnon-steriles,therearenoregulato
ryguidelinesthatgovernenvironmentalmonitoringofnon-sterile
s.However,theFDAdoesexpecttoseesomelevelofmonitoring
intheseareas.IwouldliketoreferyoutotheQ&CManualguide
line8-G41-2-M"EnvironmentalMonitoring"section5.3monitoring
fornonclassifiedareas.Thekeyistonotclassifythesearea
s.Theareasshouldbedesignedwithproperairflowandifpossi
bletobeabletomeetclass100,000.Theguidelinestatesthats
omelevelofmonitoringshouldbeperformedbasedonariskasses
smentoftheareas.Typicallyitisjustviableparticulateairm
onitoring.Somelevelofsurfacemonitoringshouldbeconductedt
oshowthatthecleaningprogramisworking.Non-viableparticul
atemonitoringisnotrequirediftheareasarenotclassified.
非无菌药品的级别-译文2006-09-20AZ美国专家称：对非无菌药品的环境监控来说，无官方的正式规定但FDA还是希望
看到非无菌药品生产区有某种程度的监控请查“环境监控”8-G41-2-M的5.3节“非法定级别区的监控”其关键点是对这类区域
的级别不作规定，但生产区的设计应有适当的气流，并可能达到10万级的水平。指南中提到：应根据该区域的风险分析，来决定进行某种程度的环
境监控。比较典型的做法是监控空气微生物，取表面样，看清洁方法是否达到预期要求。这些区域没有规定级别，当然就不要求微粒的监控了。
欧美对非无菌药品的环境要求欧美洁净级别是对无菌药品而言无环境监测的强制规定，但GMP检查时欧盟和FDA希望看到某种程度的监
测，如每季度一次对非无菌制剂，如口服制剂生产环境洁区的要求，提到“如果可能，应按十万级设计并有适当的气流”总体认为：环境对非无
菌生产的影响不大，现越来越多提倡进行风险评估2006-9-12DH发给Rolf的问题：欧盟非无菌产品生产是否要求10万级？E
MEA的MagnusJahnsson欧洲药品管理局答复：不，欧盟GMP中对非无菌产品不作规定对非无菌药品环境的其它信息欧盟药
品管理局检查处主任EmerCooke今年9月20日在北大称：官方正式标准中对此无规定，也没有30万级的提法。10万级也是对无菌药
品的环境要求。对非无菌产品及一般原料药而言，企业自己设HVAC系统，静态测试，以确定设计标准。在生产过程中，洁净度（微粒）不需要
作动态测试，只监控微生物指标。更衣系统也不必完全与无菌药品相同。征求了天津斯克、阿斯利康、西安杨森等意见，结果与上述情况完全一
致征求了国内设计单位意见：建议非无菌药品可按10万级设计，以便有历史性衔接，且以前许多设计已这样做了，只考核静态，对动态指标与国
际一致，不考核。至于是否采用高效过滤器，可不作规定。我国洁净厂房设计的误区我国规范-98不足处标准不如1992年的明确，
98年修订时，层流、风速及洁净区的换气次数被取消了，使高风险作业的要求变得不很明确。层流标准采用了国际上B级的限度。我国98
版将国际上B级指标（动态），作为百级的标准（静态），与WHOGMP相差比较大。不少企业以高效送风替代层流，标准一再降低《
规范》对SVP，不要求层流保护孢子在微粒中耐热性增强，取消层流对微生物控制极为不利。无菌药品的安全性隐患国际标准要求无菌制造
工艺灌装的配置是B+A我国万级区设置一开始没有根据工艺要求，区分最终灭菌产品及非最终灭菌产品的不同要求。结果一些企业的设计陷入了
误区。WHO无菌制造工艺要求无菌操作区内：不设水池、不设地漏、消毒剂要除菌过滤、不得进行任何带菌操作……，我们却将带菌操作放入了
无菌控制区，如称量、配液、过滤、清洗等等。因生产环境洁净度差，接触产品设备有的不能灭菌，一些只能用酒精消毒，无菌原料药车间难以生
产出无菌药品。规范-98对布局的影响2003年9月出版许多设计不分无菌控制及非无菌控制万级混淆了无菌及非无菌控制区的界限
降低了无菌控制区的无菌保证水平增大了污染的风险过大、过复杂更衣系统对平面布局的影响-无菌万级国际上无菌操作应在B级区中层流
保护下进行，我国没有B级的设置，无菌万级也是2003年9月才正式提出（药品GMP检查指南总则说明）WHOGMP2002无菌药
品附录9.6Sinksanddrainsshouldbeavoidedwhereverpossibleand
shouldbeexcludedfromareaswhereasepticoperationsarecarrie
dout.意：无菌操作区应避免设置水池及地漏现行版欧、美标准，禁止设置水池及地漏此条款不适用于最终灭菌产品，LVP无菌操
作区要求无菌制造工艺车间平面示意图-国际WHO标准设计的误区-示例不符合WHO-GMP带来的麻烦进万级生产区及洗衣万
级更衣及洗衣-简10万级区更衣示例送风速度和换气次数达到动态洁净度标准，须一定的条件换气次数，单位：次/小时
总送风量÷房间体积风速，层流要求0.45（1±20%）米/秒折算-比较：二者有级别差异（
比较）以高效送风替代层流是没有理由的SVP灌装随意取消层流也是不安全的层流与高效送风比较设高效过滤器的面积为1米2，从送风
口到被保护面的距离为2.5米，按送风速度0.45米/秒计每小时送风量相当的换气次数：0.45米/秒×3600秒×1米
2=1620米31620m3÷（1m2×2.5m）=648次/小时乱流100级，一般30-50次/小时层流百级
-乱流百级：天壤之别单向流/层流将脏空气置换乱流-紊流将脏空气稀释DOP-1DOP-2DOP-Man风速测试
ThanksforyourattantionA级区高风险操作区，如：灌装区，放置胶塞桶、敞口安瓿瓶、敞口西林瓶的区域及
无菌装配/连接操作的区域。通常用层流操作台/罩来维护该区的环境状态。层流系统在其工作区域必须均匀送风，风速为0.36-0.54m/
s（指导值）。应有数据证明层流的状态并须验证。应对A级区的空气粒子进行连续测定，并建议对B级区也连续进行测定。A级区和B级区
空气总的采样量不得少于1米3，C级区最好也能达到此标准。欧盟百级层流标准中微生物指标比美国标准严，但B则反之，因此二者可以说标准
基本相同。另FDA在无菌工艺中，A区的标准为1.WHOGMP2002无菌制剂附件A级区：高风险作业局部区域，如：灌装区、
各种无菌连接区。通常用层流作业系统来维持该区的环境状态。层流系统在其工作区应均匀送风，风速为0.45?20％m/s（指导值）。为
了达到B、C、D级区的要求，换气次数应根据房间的大小、室内的设备和操作人员的数量来决定。每一洁净室换气次数不低于20次/小时，通常
应使用合适的高效过滤器并有良好的气流 。指标中用0.5-5.0μm，因接近5μm大的微粒占的比例小，虽然对数量级上影响不大，总
体上说还是低于欧洲标准：文件出处：WHOGMP2002无菌制剂附件沉降碟是0.5小时，低于国际标准4小时。空气微粒中的孢子
耐热性很强，取消层流对微生物控制极为不利。此条款的适用对象是asepticprocessing，它不适用于LVP。因没有搞清国
外标准的原意，曾经导致GMP的误区。回风进入初效过滤器后，当因故停机时，污染的风险减小。现还有一种方法，是在初效的进风管上安装一
个电动联销阀，当风机停止时，阀门自动关闭，密封性很好（比原来的上回阀好得多），此条件下，回风管也可接至初效过滤器前。图中的设计基
本为单机结构，如为整个吊顶，一般采用HVAC机组，如Pharmacia,1-2个，有冷盘管，可能取循环式，也可能设直排风，因房间肯
定要新风补充。解释：AA生产中的特殊要求；国际标准人、物流和14条基本要求河南郑州、上海、江苏、深圳均存在此类问题WHOG
MPforsterileproducts(2002)Itisstatedin4.13thatthetran
sferofpartiallyclosedcontainers,asusedinfreeze-drying,sh
ould,beforestopperingiscompleted,bedoneeitherinagradeA
environmentwithgradeBbackgroundorinsealedtransfertrays
inagradeBenvironment.2006-06-23吴昌振处：罩离上面约40公分，不测定离工作面1英尺的风速
，但测定指标，?处也不测定风速，只控制指标。另轧盖要考虑跳塞有无检测设施，否则要控制级别。设高效过滤器的面积为1平方米，从送风口
到被保护面的距离为2.5米，按送风速度0.45米/秒来计算，每小时的送风量为：0.45米/秒×3600秒×1平方米=16
20立方米1620立方米÷（1平方米×2.5米）=648次/小时 在空调净化系统测试时，换气次数在60次/小时左右时，很可
能达到了乱流百级的指标，所以说，单向流的保护作用要高一个级别。上游100万级，下游达到百级要求。过滤器效率试验
效率测试用以确定过滤器的性能。该试验采用粒子大小为0.3mm的单分散气溶胶扫描方法探头移动速度v<5cm/
s判断标准η≥99.97%DOP在上游侧要形成100万级的浓度，对HEPA的测试形成挑战性。新一代仪器不用加热，只
用氮气压缩成气溶胶，在常温下即可运行。PAO溶剂倒入发生器容器后，在39?C左右和1至2kg/cm2左右压力，用氮气压，产生气溶
胶送入高效过滤器上风侧。气溶胶光度计即测定和显示气溶胶浓度的仪器，其灵敏度至少要达到80×10-3微克/升。检漏试验标准方
法是什么，现做的是非标检查，外方检查时会有异议。现新人仪器测试方法有些不同，还有一根测试上游的塑料管，从上游通往往仪器，可测得浓度
（超越100万级），表是量程应在10-20%之间，将此设定为100%，再测试过滤器下游的穿透数，计算机上可直接读数。实际可控制0.
01%以内。此仪器要送美国校。上海可校，但不会修理。DOP加热送风法，有几个送出口，总体效果较差：CA法，效果比较好，上游达到规定
浓度。总则称为：Basicrequirements.篇幅太短，应该要求的方方面面就不可能阐述比较详细。文件的样稿，无菌制造
工艺约近5万字；另一个指南约为2万字。然而，我国对GMP管理要求的不到位，不是加一、二句话能解决的，不是修修补补能解决的，而是要
大胆采用国际上认可的标准。无菌药品洁净度不到位（示例图）非无菌药品资源浪费中国GMP（1998修订）我国百级基本
采用了WHO中B级（乱流百级）的限度静态标准，比动态至少低一个数量级GMP规范中无明确的气流组织和风速要求（示例图）15
≤1000≤60000≤10500000300000级10≤500≤20000≤350000010
0000级3≤100≤2000≤35000010000级1≤50≤3500100级CFU/皿
(Ф90mm半小时)CFU/米3≥5μm≥0.5μm微生物最大允许数尘粒数/立方米洁净级
别不设置水池及地漏；更衣室、物料缓冲间设连锁或报警装置；关键操作间设压差表，气流方向发生变化即作偏差论处；人员进入，必须穿
无菌衣、鞋、手套及无菌口罩；所用消毒酒精必须除菌过滤所用的清洁工具必须经清洁、消毒/灭菌，无菌操作区清洁结束
后，应立即从无菌区取出所用容器、工器具、过滤器均须灭菌或消毒；胶塞必须灭菌；小瓶或安瓿须经干热灭菌；药液经除菌过滤；如果
扎盖设在无菌区，则铝盖应当灭菌；小车必须消毒；如采用传送带形式，则分段设置的传送带，定期消毒；除菌过滤使用窜联方式（2只过滤器
窜接），确保除菌过滤安全；空气、表面、手、工作服态须每批监控；结果进批档案；每年须通过培养基灌装方式进行再验证。防虫滤器防
虫滤器新风新风高湿排风除湿干燥风化学转轮除湿机初效中效初效＋中效过滤值班风机多叶调节阀
送风机新风送风管表冷器＋加热器防虫风罩排风熏蒸排气铝板网风口回风表冷器高效过滤器24±2℃50±
10%RH>5Pa高效过滤中效过滤低噪音风机循环回风24±2℃45±10%RH>30Pa空气帘膜
百级层流B区/万级无菌区万级区回风百级无菌区与-无菌万级检漏冻干冷却准备preparation轧盖ca
pping暂存？目检inspection缓冲容器具清洁cleaning配制Prepa.暂存瓶子暂存
称量dispensing原料存放更-1更-2更-3更-6更-5更-4更-1更-2更-3办公室offi
ce中控in-proc备件spareparts维修贴签labeling缓冲包装材料Pack.materia
l成品冷藏过滤filtration走廊人流灭菌脱包PBPBHTPB洗瓶灭
菌Tunnelsterilizer暂存holding灌封Filling灭菌？更衣灭菌万级区几个问题
1、药液接收？2、灌装：有套筒式罩，洁净度？3、半压塞传输？4、轧盖10万级，标准偏低，现欧盟要求为100级冻干机房配
液过滤接收灌装腔室器具灭菌胶塞灭菌小瓶洗灭洁具轧盖？人员10万级1万级10万级无菌衣？
进包装-万级区方式-简生产人员脱衣换鞋物料穿衣洗手M衣柜脱＋洗穿压差表万级称量
缓冲临时人员往包装往万级更衣室脱衣鞋脱衣鞋穿袜衣穿袜衣洗衣房缓冲工艺走廊万级走廊单独脱鞋？后缓冲室？
洗衣房的设置方式？缓冲主要为洗衣设脱衣、脱鞋洗手穿万级衣鞋脱衣、脱鞋洗手穿万级衣鞋缓冲万级洗衣房
万级工艺走廊洗衣烘干洁具间十万级存储区脱衣换鞋脱衣换鞋洗手洗手穿衣穿衣手消毒整衣洗衣？换鞋？
传递？对产品质量的意义？HVAC检漏及风速测试百级层流与百级乱流比较高效过滤器的检漏风速测试1
米2.5米工作面0.45米/秒return0.36m/s气流方式及影响DOP（邻苯二甲酸二辛酯）气溶胶（d=0.
3μm,>3500个/升)检查过滤介质、密封垫是否有泄漏操作方法：过滤器额定风速下，在过滤器入口处导入每升空气中含80～1
00微克的DOP气溶胶，然后使用一只适当的测光仪探头在过滤器气流出口处扫描，采样速度不得低于0.3m3/min。扫描整个过滤表面
及框架，探头位置距滤器表面50～100mm。高效过滤器（HEAP）性能试验下游侧0.3μm和0.5μm粒径分别＜3
×10-4与1×10-4，作合格论如某点读数的窜透率＞0.01％，说明该点有泄漏，应修补累计修理面积＞总面积
的5%时，过滤器应报废。检漏评价DOP发生仪DOP检测仪探头高效过滤器检漏：DOP测试仪用氮气压缩气
溶胶粒子风管DOPDeoctylphthalate邻苯二甲酸二辛酯PAOPloy-alpha-olefin聚?-烯烃
产生粒子：0.3μ上游浓度：>百万级高效过滤器应达到的滤除率：99.97％穿透率：～0％一些企业采用拆除中效过滤
器测试法风罩顶棚测口仪器：热球风速仪精度0.01m/s±3%,量程0~30m/s，集风罩。方法用集风罩住送风口
，测出风口平均风速①取15分钟内测量的风速平均值，②按不同位置编记录测定值，计算平均风速。评估标准①垂直单向流面
风速v>0.35m/s②水平单向流面风速v>0.45m/s注:仅当单向空气流微粒数目符合100级的洁净度要求，同时风速达到上
述数值，才可判断该装置达到100级。数据处理1mm水柱=9.8Pa（帕斯卡）2005年元月起实施。要求对冻干的M3.5
动态连续测试微粒的。在2004年9月的无菌工艺指南中，百级微生物：正常情况应不检出。厦门测试结果，操作面0.2m/S左右。悬浮
粒子动态连续监控的要求指无菌操作百级层流区空调净化和洁净级别-对无菌万级及非无菌药品的洁净要求较系统地讲解一下国内
所谓的“无菌万级区”的管理介绍美国、欧盟的洁净区分级管理英制标准中把1立方英尺中直径≥0.5μm的
微粒数作为洁净级别的级别，100级，指每立方英尺中的粒子数有100个。1米=3.28英尺1米3
=35.29英尺3公制级别以立方米中微粒对数命名，如M3.5相当于英制中的100级级别、定义及概念中文
字数用计算机统计，欧盟GMP通则不包括原料药显而易见，我国《规范》篇幅过短中外GMP篇幅比较（中文字数）~1万0.15万
0.74中国GMP~9万7万~2FDACGMP~3万~1万~2EUGMP3.6万~1万2.6
WHOGMP小计无菌药品通则分类行业指南无菌制造工艺生产无菌药品的CGMP5万字行业指南人用药厂及兽药厂上报
灭菌工艺验证指南2万字欧盟无菌药品GMP附录DISO8100000M6.5DCISO710000M
4.5CBISO5100M3.5BAISO5100M3.5AEEC（GMP）ISO/TC（209
）美国（习惯分类）美国（209E）WHO（GMP）USP28<1116>引用了209E、ISO对洁净级别划分标
准28300010000000－M71000003530000100000M6.5283001
000000－M61000035300010000M5.52830100000－M51000
353001000M4.528310000－M41003530100M3.5制药工业28.
31000－M310.035310M2.52.8100－M21.0035.31M1.50.283
10.0－M1粒子数/ft3粒子数/m3美国惯用(英)国际制(公)电子工业≥0.5μm级别
名称范围USP28<1116>洁净级别标准表药典标准中有关键区提法。FDA无菌制造工艺生产的无菌药品CGMP指南
要求：关键区正常情况不得检出菌。表中均为动态；关键区指标包括地面；接触碟或擦拭法24-30cm2－－－<100
100000控制区<20<10<5<10地<2010000控制区M5.5<5<3<3
<3100关键区M3.5衣服手套表面菌浮游菌cfu/m3级别区域关键区指无菌产品、已灭菌容器和
密封件所暴露的环境区域。在关键区域内，应采用高效过滤器对使用点以层流方式送风，风速应足以吹除灌封区的
微粒。一般情况下，风速在27m/min(1?20％)，即0.45m/S(1?20％)
就已足够。多粉尘操作或设备结构干扰层流，风速还需加大FDArecommendconductingnonviabl
eparticlemonitoringwitharemotecountingsystem远程空气粒
子监控系统（CGMP摘录）FDACGMP-2004-09-摘录可见：洁净厂房的洁净度按尘粒划分，在209E及IS
O标准中，均无风速、换气次数及微生物指标美国制药行业的洁净区标准收载入USP<1116>在2004年9月无菌工艺指南中有层流
的要求除悬浮粒子及微生物指标外，对关键作业区有气流组织＋风速的要求悬浮粒子动态连续监控的要求须对浮游菌、沉降菌、表面
微生物监控美国的洁净度标准欧盟GMP2002微粒指标A级风速为：0.36-0.54m/s（指导值）级别分动态及静态；
5μm：<1应视作不检出；2005年9月21日修改，考虑光散射及电子噪声等可能误报，标准为<20个/m3应对A级区的空气
粒子进行连续测定，并建议对B级区也连续测定不作规定不作规定200003500000D200003500000200
0350000C200035000013500B1350013500A≥5μm≥0.5μm≥5μm
≥0.5μm尘粒最大允许数/m3动态静态级别－50100200D－2550100C55510
B?1?1?1?1A5指手套cfu/手套接触碟(?55mm)cfu/碟沉降碟(?90mm)cfu/4小时(b
)空气样cfu/m3级别微生物污染限度参考标准(a)注：（a）表中各数值均为平均值。（b）单个沉降碟的暴露时间可以少于4小时。WHOGMP2002微粒标准新标准分为动态及静态，除A区外，其它区二者差一个级别，指标查WHO技术报告902，2002A级没有要求连续微粒测试图示不作规定不作规定200003500000D2000035000002000350000C200035000003500B0350003500A>5.0μm0.5-5.0μm>5.0μm0.5-5.0μm最大允许粒子数/m3最大允许粒子数/m3动态静态 级别－50100200D－2550100C55510B＜3＜3＜3＜3A5指手套CFU/手套接触碟(?55mm)CFU/碟沉降碟(?90mm)CFU/4小时空气样CFU/m3级别bWHOGMP2002微生物限度WHO的A区的微生物指标均为＜3个菌欧美的标准均为＜1，意在不得检出最难点是操作人员手套及工作服a)强调动态监控，标准与产品质量直接相关b)关键区（高风险区）有风速及气流组织要求c)对关键作业采用双重安全措施B＋A级d)欧盟和CGMP指南中，关键区微生物不超1CFU/m3，其实是不得检出，这是无菌药品生产企业实际执行的标准。国际GMP对洁净度基本要求LAF-天花板工艺-灌装-传输聚碳酸酯的可开启门控制工艺周围的层流正常操作通过手套管操作人员天花板-LAF工艺-灌装-传输聚碳酸酯的可开启门控制工艺周围的层流正常操作通过手套管如需开门，层流应扩大，将操作人员复盖，天花板=层流操作人员 |
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