生物制剂的免疫源性的潜在危害包括对药代动力学的改变、中和抗体和甚至致命性的严重不良反应。生物制剂的药代动力学改变导致生物活性增强或降低；而中
和抗体则引起生物制剂丧失生物活性，而且会抑制所有同类产品的疗效，如果不更换药物，可导致严重后果；免疫源性还可导致严重的不良反应，如
过敏反应、血清疾病等全身免疫反应，甚至致命的并发症，如之前提到的PRCA。生物制剂治疗产生免疫性的机制主要有两个：第一条途径是
人体对外来蛋白质典型抗原反应，如经典的疫苗反应。第二种机制是通过打破免疫耐受和B细胞耐受诱导抗体，这种抗体通常直接攻击自身抗原。其
诱导的免疫源性长期治疗后缓慢发生，治疗撤回后消退；打破免疫耐受和B细胞耐受的机制尚不清楚，可能由杂质或聚合物引起。在现实临床应用中
，如果没有临床研究和长期监控，不可能预测免疫原性。生物制剂的免疫源性受多种因素的影响，图中列举的是影响免疫源性的主要产品相关性和
患者相关性因素，如生物制剂的序列变异、糖基化再加工、来自生产过程或下游处理过程的污染物和杂质、剂型、给药途径、剂量、疗程长短、分析
技术、患者特征等。生物制剂的剂型和储存条件对免疫原性有重要影响。如图中所示是不同剂型和存储条件下人IFN-α2a的免疫原性，其中
A曲线冻干粉常温保存下人IFN-α2a的免疫原性；B曲线为冻干粉冷藏保存下人IFN-α2a的免疫原性；C曲线为含HSA液态冷藏保存
下人IFN-α2a的免疫原性；D曲线为不含HSA的超纯液态冷藏保存下人IFN-α2a的免疫原性；E曲线则为不含HSA的超纯冻干粉冷
藏保存下人IFN-α2a的免疫原性，可见常温保存明显增加生物技术制剂的免疫原性。另外，虽然HSA通常作为稳定剂通常可减少免疫原性，
但对于人IFN-α2a，HSA增加其免疫原性。说明任何微小的差异都可影响生物制剂的免疫源性。稳定剂和给药方式同样影响免疫原性。
刚才我们提到HSA通常作为稳定剂通常可减少免疫原性，从而影响生物制剂的安全性。图中是通过稳定剂影响免疫源性，最终导致生物制剂安全
性问题的典型案例。如图中所示，1998年，重组体人红细胞生成素（Eprex?）再美国以外的地区中移除了HSA稳定剂，结果导致
PRCA案例爆发性增长，而在美国本土，由于未移除稳定剂，PRCA案例也未见增长。同样2003年，对重组体人红细胞生成素（Epr
ex?）撤出皮下注射，发现免疫源性引起的PRCA案例逐年降低，说明给药方式同样也是影响生物制剂免疫源性的重要因素。由于生物制剂
的难复制性以及其潜在的免疫源性危害，国外权威监管法规对生物仿制药进行了特殊规定，承认其有别于传统仿制药，有其自身的特殊性。欧盟为
生物仿制药单独建立监管法规。以体现生物仿制药的审批应该有更严格的独立的监管法规。欧洲委员会已达成一致意见：传统的化学仿制药物不同
，对生物制剂的复制仅能达到“相似”，而不能与原研生物制剂“完全相同”，因此不能将其认为是仿制药或按照仿制药的法规管理。欧盟药品评
价局EMEA有关生物仿制药监管指南包括总体指南、治疗指南、非临床和临床指南、以及附近非临床和临床指南。其中，总体指南、治疗指南、非
临床和临床指南作为一般指南适用于所有生物仿制药。而附加非临床和临床指南对不同生物类似物产品都有不同的规定，属于特殊指南，需要提供产
品相关数据。EMEA指南对生物仿制药提出了特殊要求：首先，要求生物仿制剂的制剂质量、安全性、有效性必需与原研生物制剂具有可比
性，及无临床显著意义。同时指出，不能单纯根据与原研生物制剂可比的生物等效性批准生物类似物。而且，所有生物类似物都应该提供与原研生物
制剂相似的安全性和有效性的非临床和临床数据。这样传统仿制药相比有巨大差异，因为传统仿制药无需负担药物研发的费用；无需经过昂贵的临床
试验提供证明其安全性和有效性的数据。而生物类似物则需要如原研生物制剂一样进行临床试验提供证明其安全性和有效性数据，且证明其与原研生
物制剂是具有可比性的。EMEA指南对生物类似物的非临床和临床发展也提出了许多要求。EMEA指南指出，为了证实生物仿制药和
原研生物制剂的相似性，必须遵循以下开发原则：提供非临床数据：主要包括通过充分的药代动力学研究确定给药方案，以及通过充分的毒理学试
验确定药效学作用和安全性特征。提供临床临床数据以证明其与原研生物制剂具有可比性的有效性和安全性，要求临床试验期间，比较药代动力学
、安全性和有效性；且所有试验中都必须包含抗体试验（免疫原性）。但批准前的临床试验通常不足以分辨所有潜在差异；因此在批准后仍必须继续
监测生物仿制药的安全性，包括持续的获益-风险评估。同时要求所有生物类似物都必须提交风险管理计划/药物警戒计划。对于不同的生物
类似物产品，EMEA对其安全性和有效性还有不同的特殊要求，如对于重组人胰岛素生物类似物，在有效性方面，如果PK/PD特征具有可比性
，就不要求疗效研究；但必须提供12个月的免疫原性数据，以及经皮下给药的安全性数据。因此，对于甘精胰岛素生物仿制剂，如果PK/
PD特征具有可比性并不意味着就可以获得上市批准，更不能代替原研生物制剂使用。如2009年，一种甘精胰岛素生物仿制药虽然提供的药效学
和药代动力学数据与原研甘精胰岛素具有可比性，但因无法提供免疫原性数据在哥伦比亚的上市申请被撤回。生物制剂尤其特殊性，对于生物仿制
药应该单独建立监管法规，进行更严格的监管。除欧盟外，也有一些国家和地区已经单独建立了生物类似物的监管法规或正在起草相关的法规进行监
管。然而，遗憾的是，包括中国在内的全世界大部分地区对于生物仿制药的监管都还是空白的。由于法制法规监管上的空白，而生物制剂不同于传统
药物，难以准确复制，且存在严重的免疫源性危害，因此这些地区生物仿制药的应用更应慎重。最后向大家简单介绍原研甘精胰岛素来得时?，
品质保证，应用简便。来得时?是全球唯一被大量医学研究证实的高效、安全性良好的甘精胰岛素。迄今全球已完成332项来得时相关研究，
包括LANEMT、INSIGHT、OPAL、BBT-PPT、TTT等大型临床试验，目前有98项研究仍在进行中。但需要提醒大家的是，
所有来得时?的相关研究只能证明来得时?的疗效和安全性，不能证明其他甘精胰岛素生物仿制药的疗效和安全性。来得时?已在全球多个
国家上市，全球104个国家和地区2400万患者-年。来得时给患者带来的获益并非限于其控制血糖的良好疗效。众所周知，胰岛素是注射的
，许多患者由于胰岛素注射的不便至依从性差，从而降低了胰岛素的疗效。来得时?SoloSTAR?是一次性胰岛素给药装置（胰岛素笔），经
历了三代不断发展创新，该装置将甘精胰岛素(来得时)和一次性笔式注射器合二为一，操作简便、调量便捷、携带轻便。极大地提高了患者对治疗
的顺应性，给广大糖尿病患者带来新的治疗选择，惠及全球糖尿病患者。来得时SoloSTAR胰岛素笔使用方便，只要简单两步，即可轻松启
动。而且，来得时SoloSTAR胰岛素笔的注射阻力更低。一项针对胰岛素笔注射阻力的研究结果显示，来得时预填充SoloSTAR相比
InsulindetemirFlexPen显著降低注射阻力达31%。由于来得时SoloSTAR胰岛素笔操作简便、调量便捷、携
带轻便，患者的满意度更高。一项针对全球糖尿病患者使用习惯的调查结果显示，患者对来得时预填充SoloSTAR胰岛素笔的选择比例最高，
超过50%。鉴于来得时预填充SoloSTAR胰岛素笔的出色表现，2007年来得时预填充SoloSTAR胰岛素笔获芝加哥雅典娜博物
馆最佳设计奖。可见，来得时?+SoloSTAR不愧为：简便之星，引领达标。EMEA指南：非临床和临床发展要求为了证实生物
仿制药和原研生物制剂的相似性，必须遵循以下开发原则：非临床临床通过充分的药代动力学研究确定给药方案通过充分的毒理学试验确定
药效学作用和安全性特征临床试验期间，比较药代动力学、安全性和有效性所有试验中都必须包含抗体试验（免疫原性）批准前的临床试验通
常不足以分辨所有潜在差异批准后仍必须继续监测生物仿制药的安全性，包括持续的获益-风险评估提交风险管理计划/药物警戒计划
SchaeffnerG.Regulatoryissues-Europeanperspective.InLyscom
N,ed.Biosimilars-EvolutionofRevolution?London.UK.BiopharmK
nowledgePublishing,2006:105-106.JournalofBiopharmaceuticalSt
atistics,2010,20:3–9.不同产品类别的安全性和有效性要求产品类别有效性要求安全性要求EPO要
求临床有效性研究（2项至少为期12周的临床试验）临床试验期间获得至少300名患者的安全性数据，以及至少12个月的免疫原性数据H
GH要求大型临床疗效研究（6-12个月）来自有效性临床试验的患者数据，以及至少12个月的免疫原性数据G-CSF首选临
床试验，时间长短无具体要求，但非强制性收集多次给药后患者的数据，并对“足够”量的患者进行为期6个月的随访重组人胰岛素（短效）
如果PK/PD特征具有可比性，不要求疗效研究12个月的免疫原性数据，经皮下给药IFNa要求至少12个月的有效性研究12个
月的免疫原性数据EPO=促红细胞生成素；G-CSF=粒细胞集落刺激因子；HGH=人生长激素；IFN=干扰素甘精胰岛素生物仿制药
因无法提供免疫原性数据被撤回申请免疫原性数据一种甘精胰岛素生物仿制药药效学药代动力学与原研甘精胰岛素具有可比性在哥伦
比亚上市申请被退回2009年在哥伦比亚的上市申请：案例1.InstitutoNacionaldeVigilanci
adeMedicamentosyAlimentos–INVIMA,MinisteriodelaProtecci
onSocial,RepublicadeColombia.http://www.INVIMA.gov.coBogota
–ColombiaA.A.20896欧盟以外的监管法规监管法规框架指南草案无替代品EMEA网站：FDA网站：
EMEA网站：http://www..emea.europa.eu/FDA网站：http://.www.fda.qov/主要
内容生物制剂目前不可精确复制生物仿制药的潜在危害——免疫原性国外权威监管机构对生物仿制药的特殊规定原研甘精胰岛素来得时?
，品质保证，应用简便来得时?:全球唯一被大量医学研究证实的高效、安全性良好的甘精胰岛素全球已完成332项来得时?相关研
究，有98项研究仍在进行中1所有来得时?的相关研究只能证明来得时?的疗效和安全性，不能证明其他甘精胰岛素生物仿制药的疗效和安全性
1.http://sanofi-aventis.citeline.com/result.asp?intTherapeticAr
eaID=2&intDiseaseTypeID=&intUserSavedSearchID=961961&intError=0来
得时?:全球多个国家上市，惠及大量人群惠及全球104个国家和地区2400万患者-年来得时?+SoloSTAR:简便之星,
引领达标来得时?预充注射器经历三代不断的发展创新，惠及全球糖尿病患者简单两步，轻松启动注射阻力更低1患者满意度更高
2来得时?预填充SoloSTAR?2007年荣获芝加哥雅典娜博物馆最佳设计奖1.SamitaGarg.,KellyW.
CandSatishGarg.ExperRev.Devices,2008;5(2):113-23;2.Thoma
sHaak,StevenEdelman,ClaudiaWalter,etal.ClinTher.2007;2
9:650-60一项针对胰岛素笔注射阻力的研究全世界用10年的时间才了解生物制剂生产过程中的小差异会对病人产生巨大的影响谢谢
！最后，全世界用10年的时间才了解生物制剂生产过程中的小差异会对病人产生巨大的影响。我们准备花多长时间？从现在开始行动吧！大
家好！我是×××。生物制剂是源于生物技术的一种药物制药工艺，与传统药物不同，生物制剂通常使用活的有机体生产，无论其结构、制备工艺
还是体内作用机制都非常复杂。往往很难像传统的小分子化学制剂一样被仿制。今天我与大家分享的主题就是生物仿制药，相似但不相同。主
要内容分为四个部分：1、生物制剂目前不可精确复制2、生物仿制药的潜在危害——免疫原性3、国外权威监管机构对生物仿制药的特殊规
定4、原研甘精胰岛素来得时?，品质保证，应用简便首先我们来了解仿制药、生物制剂和生物仿制药他们有什么特点及区别。我们经常说的
药物通常是指低分子量药物，即传统药物，是一种化学制剂；所谓的仿制药也指的是对化学制剂的仿制，与专利过期的低分子量药物拥有等效的化学
与治疗学特性。生物制剂则不同，是指使用一种或多种生物技术，如rDNA、控制基因表达、抗体技术生产的药物制剂。对生物制剂而言，没有
生物仿制药这一概念，而是称为生物类似物。是指在原研生物制剂保护期过后，参考现有的生物制剂并按照市场授权法规，需要单独申请许可的一类
生物药品制剂。因此，传统药物与生物制剂相比，存在很大差异。传统药物的分子量较小，结构简单明确，且理化性质相对稳定，制备过程中
修饰的范围也很明确；与此相反，生物制剂的分子量很大，通常是传统药物的100-1000倍，结构非常复杂，而且存在不同的亚型，且很不稳
定，对环境改变非常敏感，因此必需要有严格的生产流程控制及合适的储存条件，且在制备过程中对结构的修饰有许多选择，而不同的选择最终可导
致生物制剂的性质完全不同。在生产制备过程中，传统药物可精确预测化学过程，因此也是可以完全复制的，而且采用各种分析工具很容易完全定
性。而生物制剂的生产是依赖于独特的活细胞系的，过程复制繁琐，不可能确保完全复制，而且由于是相关分子的混合物，依赖于目前的分析工具还
难以完全定性。通过以上介绍，不难看出：传统药物由于拥有精确的化学分子式和分子结构，很容易被精确复制。而生物制剂则难以精确复制，
一方面是由于蛋白质本身具有独特的多维结构，其复杂的作用方式目前还无法准确复制；另一方面，作为生物制剂，即使分子式相同，且通过相同的
细胞或微生物生产，也可能导致不同的疗效和安全性.因此，生物制剂不同于传统药物，难以准确复制。生物制剂为何难以准确复制呢？除
了之前已经提到的分子量大、复杂的3-维结构等，还在于生物制剂是活的生物体内生产，很容易导致异质性；同生死易引起免疫应答。而且其生产
过程非常复杂，生物活性依赖于生产过程的再重现、车间标准以及保持冷链的完整性。更为重要的是目前还难以通过物理化学分析方法和生物分析对
生物制剂进行完全定性。以及其他未知的差异。所以我们可以很确定地说，生物仿制药≠生物原研制剂。之前，我们一再强调了生物制剂的结
构复杂，这也是生物制剂复制难度大的一个重要原因。那么，生物制剂的结构复杂具体表现在哪里呢？如图中所示，生物制剂拥有独特复杂的4级
结构：其一级结构是通过肽健链接的特殊的氨基酸线性序列；二级结构则是氨基酸链的局部折叠，由氢键维持，形成α螺旋或?折叠结构；三级结
构则是由二级结构的球形折叠而成的3维星状，由氢键或双硫健维持；四级结构则由多个三级结构联合构成。除此之外，许多蛋白质还需要经过翻译
后的再加工，如糖基化过程。与传统药物制剂相比，生物制剂的生产过程也有其独特性。如图所示：传统药物制剂的合成起源于现有可购买获
得的底物，并且生产过程根据标准的化学工艺，最终可得到具有特定的结构的合成物质制备而成的药物制剂。化学制剂多少通过口服给药。相反，生
物制剂使用活的有机体，如动物细胞、酵母菌、植物细胞、细菌、病毒等进行生产，这些原始工具通常无法从市场购买获得。活的有机体通过多种生
物技术，并经过复杂的转录和修饰，以及严格复杂的纯化过程才能获得目标生物制剂。而且多数生物制剂是通过注射给药的，且通常需使用特殊的注
射工具。生物制剂的生产过程是极其复杂的。是生物制药产品在受控的条件下生产，包括培养基发酵和复杂的纯化步骤。而生物制剂的生产和纯
化是一个复杂的过程，主要可分为5个步骤：第一步需要插入编码目的蛋白的基因，确定合适的宿主细胞，精确的DNA序列和宿主细胞类型是这
一步成功的关键。接下来通过反复精细的细胞筛选，建立独一无二的原始细胞库；之后通过复杂的转录和修饰，生产合适的蛋白质；再经多次纯化分
析，最终才能获得成型药物，而在分析过程中，就有有超过2000多项的测试。以上任何生产步骤对最终产品的性质都可造成巨大影响。而且
蛋白质对生产条件非常敏感。由于蛋白质本身非常不稳定，在生产和存储过程中，蛋白质结构中非共价键的稳定性很容易被外力因素（如摇动、温度
等）破坏；此外，加热、延长保存、有机溶剂、氧气、pH改变及其他多种因素都可引起蛋白质结构改变，从而可使生物制剂的生物活性降低或完全
消失。因此，生物制剂的制备需要高技术要求的设备和正确的条件，如合适的稳定、压力、pH、氧气、原料等，甚至受储存条件的影响，因此正确
储存必不可少。由于蛋白质对生产条件非常敏感，生产过程中的任何细微变异都会影响药品的完整功能。任何小的变异，如温度、细胞培养条
件，甚至运输和储存的任何细微变化都可能会影响：生物制剂的效能，例如生物活性；选择性；药代动力学和免疫原性，甚至导致完全不同的生物产
品。生物制剂难以复制的另一个原因还在于生物制剂的结构相同不能代表性质相同。一方面，氨基酸结构并不是蛋白质性质的唯一决定因
素；另一方面；多数蛋白质都需要经过翻译后的再加工，如糖基化过程，而即使同一种蛋白质，不同糖基化模式可产生不同亚型。且糖蛋白的药效
学、药代动力学特性取决于蛋白质的3维结构、糖基化的程度和区位、亚型以及聚集程度。来自现实中的证据也提示我们，生物仿制品与原研生物
药存在多方面差别。如以欧洲重组人促红细胞生成素的质量规范为标准，对来自巴西、韩国、印度等13个国家的31种重组人促红细胞生成素的
生物仿制品的外观、pH、重量摩尔渗透压浓度等指标进行分析检测，并进行放射免疫测定、体外活性测验及促红细胞生成素鉴别，结果发现：有2
个样品因含内毒素（LAL＞2.5EU/ml）可能危及患者生命；15个样品由于聚合物含量＞4%可影响药物的免疫原系；有11个样品小
鼠体内功效＜90%。90%以上样品未达到欧洲法规规定的所有指标。这个图中则是对来自世界各地的不同的红细胞生成素采用等电点聚焦进
行分析，结果可见，生物制剂的异质性难以避免。生物制剂是无法被准确复制的，然而，更可怕的是目前很难确定生物仿制药与原研生物制剂完
全相同。虽然，目前有多种多种理化、生物分析检测方法，用于检测生物制剂的一级结构（氨基酸序列）；二、三、四级结构；糖基化模式；聚集形
式；亚型；异质性以及生物学活性等。但由于生物仿制药仅与被仿制的生物制剂相似但不会完全相同，每种产品都有其独特的安全性特征，这依赖于
其作用机制、独特的生产工艺和成分（包括副产品和杂质），而且生物制剂对分析工具的敏感度相比传统药物低10-100倍，而且分析和临床
前试验均不能证明两种生物产品是完全相同的，甚至无法证明来自不同生产系统的两种生物技术产品是完全相同的。正如EMEA指出的“我
们不能确定生物仿制药与原研药是可互换的，这需要在全国范围内进行讨论”；由于生物仿制药与标准生物制剂在医学上相似但又不完全相同，对
患者是否使用生物仿制药或标准生物制剂应该听取权威医学药学专业人士的建议。因此，目前生物仿制药的可互换性尚未被认可。而且法国、西
班牙等多个欧洲国家不允许生物仿制药代替生物制剂，说明生物制剂具有不可替代性。同时，权威机构如EMEA和FDA也一致指出：生物仿
制药不同于传统低分子仿制药物，目前用于批准仿制药的规则不适用于生物仿制药。而且，由于两者存在明显差异，EMEA和FDA一致认为：
已确立的“本质相似”（EU）和“生物等效性”（USA）法规不适用于生物仿制药。这也是权威机构对生物制剂不可精确复制的认可。生物仿
制药物与原研生物制剂并不完全相同，因此就可能存在一些潜在的危害，其中最终要的是免疫原性。在探讨生物制剂的免疫原性之前，我们先来看
一个案例：来自单纯红细胞再生障碍（PRCA）的教训。PRCA系多种免疫机制引起幼红细胞系列生成抑制，是重组人肾红细胞生成素的一种
致命性不良反应，由重组人肾红细胞生成素导致抗体反应引起。PRCA在重组人肾红细胞生成素上市10年后爆发性发生，由α-重组人神红细
胞生成素（Eprex?）诱导抗体（免疫源性）导致的PRCA在美国以外地区的爆发也对欧洲生物仿制药监管法规产生了重大影响。而PRCA
的爆发很可能仅是由生产流程中的细微改变引起，是生物制剂的一种免疫源性危害。所谓的免疫源性指的是人体在使用生物技术制剂后产生的抗
体反应。免疫原性是生物技术制剂特有的安全性问题，也生物制剂和生物仿制药最重要的安全问题。所有生物技术制剂都存在诱导抗体反应的潜能
，然而生物仿制药的免疫原性并不能在临床前试验和非人体试验中被完全预测，具有很高的隐蔽性。生物仿制药，相似但不相同主要内容
生物制剂目前不可精确复制生物仿制药的潜在危害——免疫原性国外权威监管机构对生物仿制药的特殊规定原研甘精胰岛素来得时?，品质保
证，应用简便仿制药、生物制剂和生物仿制药低分子量药物(传统药物)化学药物制剂仿制药与专利过期的低分子量药物拥有等效的
化学与治疗学特性生物制剂使用一种或多种生物技术（如rDNA、控制基因表达、抗体技术）生产的药物制剂生物仿制药(生物类
似物）在原研生物制剂保护期过后，参考现有的生物制剂并按照市场授权法规，需要单独申请许可的一类生物药品制剂定义/特点EMEA
definition;FDA:Follow-on-biologic传统药物与生物制剂的比较传统药物生物制剂分子量大小
小大（传统药的100-1000倍）结构简单明确复杂，存在不同亚型稳定性稳定不稳定（对环境改变敏感）严格的生产流程控
制合适的储存条件修饰范围明确许多选择生产可精确预测化学过程可以完全复制独特的活细胞系不可能确保完全复制定性容
易完全定性因为是相关分子的混合物，所以难以完全定性KidneyBloodPressRes2007;30:267–272
生物制剂不同于传统药物：难以准确复制传统药物：容易精确复制拥有精确的化学分子式和分子结构生物制剂：难以精确复制
蛋白质独特的多维结构→复杂的作用方式目前无法准确复制作为生物制剂，即使分子式相同，且通过相同的细胞或微生物生产，也可能导致不同的
疗效和安全性JEndocrinolInvest.2008,31:479-488.生物制剂为何难以准确复制分子量大
复杂的3-维结构在活的生物体内生产，易导致异质性易引起免疫应答生产过程复杂生物活性依赖于生产过程的再重现、车间标准以及保持
冷链的完整性难以通过物理化学分析方法和生物分析完全定性其他未知的差异?CrommelinDJA,etal.IntJ
Pharm2003;266:3-16.生物仿制药≠生物原研制剂生物制剂结构复杂，复制难度大氨基酸的线性序列氨基酸链的局
部折叠，由氢键维持。这导致了α螺旋或?折叠结构的形成二级结构的球形折叠→3维形状多个三级结构联合构成生物制剂拥有独特复杂的
4级结构，任何细微变化都将导致复制失败生物制剂的生产有其独特性传统药物制剂合成起始于现有可购买获得的底物根
据标准的化学工艺生物制剂使用活的有机体生产动物细胞酵母菌细菌病毒植物细胞（无法从市场购买获得）多种生物技术
复杂的转录和修饰纯化Biodrugs2007;21(6):351-356.KidneyBloodPressR
es2007;30:267–272.多数为口服制剂需注射给药使用特殊的注射工具生物制剂的生产过程极其复杂生物制药产品是
在受控的条件下生产，包括培养基发酵和复杂的纯化步骤生物制剂的生产和纯化是一个复杂的过程1.插入编码目的蛋白的基因，确定合适
的宿主细胞（需要精确的DNA序列和宿主细胞类型）2.建立细胞库(通过反复精细的细胞筛选，建立独一无二的原始细胞库)3.
生产蛋白质（复杂的转录和修饰）4.纯化5.分析6.药物成型任何生产步骤对最终产品的性质都可造成巨大影响许多步骤许
多测试（超过2000项测试）JEndocrinolInvest.2008,31:479-488.蛋白质对生产条件非常
敏感蛋白质本身非常不稳定蛋白质结构中非共价键的稳定性很容易被外力因素（如摇动、温度等）破坏加热、延长保存、有机溶剂、氧气、p
H改变及其他多种因素都可引起蛋白质结构改变生物活性降低或完全消失高技术要求的设备正确的条件(温度、压力、pH、氧气、原料)
正确储存离子键氢键疏水作用二硫键EuropaBio.Healthcarebiotechfactsheet.B
iologicalandBiosimilarMedicines.JEndocrinolInvest.2008,3
1:479-488.生产过程中的任何细微变异都会影响药品的完整功能任何小的变异（如温度、细胞培养条件，甚至运输和储存的任何细
微变化）都可能会影响：效能（例如生物活性）选择性药代动力学免疫原性效能表达选择性药代动力学生物制剂的结构相同不
能代表性质相同氨基酸结构并不是蛋白质性质的唯一决定因素多数蛋白质都需要经过翻译后的再加工，如糖基化过程即使同一种蛋白质，不
同糖基化模式可产生不同亚型糖蛋白的药效学、药代动力学特性取决于蛋白质的3维结构、糖基化的程度和区位、亚型以及聚集程度JEnd
ocrinolInvest.2008,31:479-488.生物仿制品与原研生物药存在多方面差别以欧洲重组人促红细胞生
成素的质量规范为标准，对来自巴西、韩国、印度等13个国家的31种重组人促红细胞生成素的生物仿制品进行分析检验1.Singh
AK.Gapsinthequalityandpotentialsafetyofbiosimilarepoeti
nsinthedevelopingworld:aninternationalsurvey(AbstractTHP
O972).PaperpresentedattheAmericanSocietyofNephrologyRena
lWeek2006;Nov16,2006;SanDiego.生物制剂的异质性难以避免来自世界各地的不同的红细胞生
成素——等电点聚焦阴极阳极样品目前很难确定生物仿制药与原研生物制剂完全相同生物制剂对分析工具的敏感度相比传统药物
低10-100倍分析和临床前试验均不能证明两种生物产品是完全相同的EuropaBio.Healthcarebiotech
factsheet.BiologicalandBiosimilarMedicines.多种理化、生物分析检测方法，
用于检测：一级结构（氨基酸序列）二、三、四级结构糖基化模式聚集形式亚型异质性生物学活性JEndocrinol
Invest.2008,31:479-488.生物仿制药仅与被仿制的生物制剂相似但不会完全相同，每种产品都有其独特的安全性
特征，这依赖于其作用机制、独特的生产工艺和成分（包括副产品和杂质）无法证明来自不同生产系统的两种生物技术产品是完全相同的Bi
odrugs2007;21(6):351-356生物仿制药的可互换性尚未被认可“我们不能确定生物仿制药与原研药是可互换
的，这需要在全国范围内进行讨论”EMEAExecutiveDirectorThomasL?nngren2006由
于生物仿制药与标准生物制剂在医学上相似但又不完全相同，对患者是否使用生物仿制药或标准生物制剂应该听取权威医学药学专业人士的建议。
London,19April2007Doc.Ref.EMEA/74562/2006可互换性：能在等价的特定条件下,
将一种药物换成另一种药物,证明彼此是具可互换性的。生物制剂具有不可替代性来源：欧洲非专利药物协会，生物相似药物的EGA手册
（2008年）替代性替代性：指药物的国内政策,其允许从一种药物换成另一种药物。这两种药物经证实在质量、安全性和有效性方面相
同可能不可能生物仿制品替代法国、西班牙等多个欧洲国家不允许生物仿制药代替生物制剂权威机构：仿制药的规则不适用于生物制剂
的仿制EMEAFDA生物仿制药不同于传统低分子仿制药物，目前用于批准仿制药的规则不适用于生物仿制药由于两者存在明显
差异，EMEA和FDA一致认为：已确立的“本质相似”（EU）和“生物等效性”（USA）法规不适用于生物仿制药JEndocrin
olInvest.2008,31:479-488.主要内容生物制剂目前不可精确复制生物仿制药的潜在危害——免疫原性
国外权威监管机构对生物仿制药的特殊规定原研甘精胰岛素来得时?，品质保证，应用简便来自单纯红细胞再生障碍（PRCA）的教训
重组人肾红细胞生成素上市10年后发生PRCA的爆发由α-重组人神红细胞生成素（Eprex?）诱导抗体（免疫源性）导致的PRCA
在美国以外地区的爆发对欧洲生物仿制药监管法规产生了重大影响PRCA的爆发很可能仅是由生产流程中的细微改变引起KidneyBl
oodPressRes,2007,30:267–272.ClinJAmSocNephrol,2008,3:
174–178.正常骨髓PRCA骨髓PRCA：单纯红细胞再生障碍免疫原性：生物制剂和生物仿制药最重要的安全问题免疫原性：
人体在使用生物技术制剂后产生的抗体反应所有生物技术制剂都存在诱导抗体反应的潜能免疫原性是生物技术制剂特有的安全性问题生
物仿制药的免疫原性并不能在临床前试验和非人体试验中被完全预测KidneyBloodPressRes2007;30:26
7–272.免疫原性的潜在危害增强或降低生物活性23免疫原性药代动力学改变中和抗体丧失生物活性抑制所有同类产品
的疗效严重不良反应全身免疫反应（过敏反应、血清疾病）致命的并发症（PRCA）KidneyBloodPressRes
2007;30:267–272.ClinJAmSocNephrol,2008,3:174–178.PRCA：单纯
红细胞再生障碍免疫原性产生的机制长期治疗后缓慢发生，治疗撤回后消退机制尚未完全明确可能由杂质或聚合物引起如果没有临床研究
和长期监控，不可能预测免疫原性免疫原性产生的可能机制对抗原反应（经典的疫苗反应）打破免疫耐受打破B细胞耐受（通常直
接攻击自身抗原）多种因素均可影响免疫原性人类细菌序列变异糖基化污染物和杂质（来自最初生产过程或下游处理过程）免疫
原性剂型给药途径剂量疗程长短分析技术患者特征未知因素SchellekensH.NatRevDrugDis
cov,2002,1:457-462.产品相关性和患者相关性因素对免疫原性的影响剂型和储存条件对免疫原性有重要影响HSA
：人血清白蛋白常温保存明显增加生物技术制剂的免疫原性虽然HSA通常作为稳定剂可减少免疫原性，但对于人IFN-α2a，HSA增加
其免疫原性SchellekensH.NatRevDrugDiscov,2002,1:457-462.案例1IF
N中和单位时间（月）A：冻干粉常温保存B：冻干粉冷藏保存C：含HSB液态冷藏保存D：超纯(不含HSA)液态冷藏保存E：
超纯(不含HSA)冻干粉冷藏保存稳定剂和给药方式同样影响免疫原性HSA：人血清白蛋白；Johnson&JohnsonP
RCA病例报告摘要；http://www.jnjpharmamd.com/company/n-casereports.htm;于2006年9月11日评估。促红细胞生成素抗体阳性PRCA病例数从Eprex?中移除HSA稳定剂撤出皮下注射制剂EPOa（Eprex?），除美国外所有抗体阳性PRCA与PRCA案例增多有关的Eprex?生产过程变化案例2主要内容生物制剂目前不可精确复制生物仿制药的潜在危害——免疫原性国外权威监管法规对生物仿制药的特殊规定原研甘精胰岛素来得时?，品质保证，应用简便欧盟为生物仿制药单独建立监管法规欧洲委员会已达成一致意见：与传统的化学仿制药物不同，对生物制剂的复制仅能达到“相似”，而不能与原研生物制剂“完全相同”，因此不能将其认为是仿制药或按照仿制药的法规管理JournalofBiopharmaceuticalStatistics,2010,20:3–9.生物仿制药的审批应该有更严格的独立的监管法规EMEA：生物仿制药监管法规概况KidneyBloodPressRes2007;30:267–272.指南主题应用总体指南质量指南非临床和临床指南附加非临床和临床指南生物药物制剂相似性指南含生物技术衍生蛋白质作为活性物质的生物药物制剂相似性指南：质量方面含生物技术衍生蛋白质作为活性物质的生物药物制剂相似性指南：非临床和临床方面一般指南：适用于所有生物仿制药特殊指南：需要产品相关数据重组人促红细胞生成素重组人G-CSF重组人胰岛素重组人生长激素G-CSF=粒细胞集落刺激因子EMEA指南对生物仿制药的特殊要求与原研生物制剂相比：制剂质量安全性有效性不能单纯根据与原研生物制剂可比的生物等效性批准生物类似物应该提供与原研生物制剂相似的安全性和有效性的非临床和临床数据无临床显著意义可比性JournalofBiopharmaceuticalStatistics,2010,20:3–9.仿制药则无需负担药物研发的费用；无需经过昂贵的临床试验提供证明其安全性和有效性的数据EuropeanJournalofPharmaceuticsandBiopharmaceutics.2009,72:479–486 |
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