9种中药对马拉色菌分离株的抑菌实验研究 |
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中国中西医结合皮肤性病学杂志!""#年第!卷第$期
马拉色菌属为人体皮肤正常菌群之一,也是条
件致病菌,它与花斑癣、马拉色菌毛囊炎、痤疮、脂
溢性皮炎、银屑病等疾病相关。上世纪%"年代至
今,随着对菌种形态学和生理学特性的研究,以及
脉冲场凝胶电泳(&’())和随机扩增多态性技术
(+&,)的应用,该菌最终被分为-种:糠秕马拉色
菌(!"#"$$%&’"()())、厚皮马拉色菌(!"#"$$%&’"
+",-./%0"1’$)、合轴马拉色菌(!"#"$$%&’"$.0+2/’3
"#’$)、球形马拉色菌(!"#"$$%&’"4#252$")、钝形马拉
色菌(!"#"$$%&’"251)$")、限制马拉色菌(!"#"$$%&’"
%$1’,1")、斯洛菲马拉色菌(!"#"$$%&’"$#22((’"%)。抑
制马拉色菌的药物研究主要是以抗真菌剂如酮康
唑、伊曲康唑、氟康唑等对相关疾病临床疗效观察
为主
[$]
。中药体外抗真菌实验已有#"年历史,筛选
出#""余种抗真菌中药,但研究的抑制对象主要为
皮肤癣菌。本实验对%种具有明显抑制真菌的中药
进行抑制马拉色菌分离株实验,为马拉色菌相关疾
病药物治疗提供新思路。
!材料与方法
!"!菌株
武汉市第一医院皮肤科真菌室临床分离鉴定保
存的马拉色菌分离株,来源为花斑癣、马拉色菌毛囊
炎、痤疮。鉴定方法为(./0012法
[!]
。选取#!3孵育
!周生长良好的合轴马拉色菌、糠秕马拉色菌、球形
马拉色菌、钝形马拉色菌4种分离株。
!"#菌液的制备
用接种钩挑取适量放入无菌生理盐水中轻轻研
磨成混悬液,在血细胞计数板上调节菌液浓度为56
$"
5
7’89:;。
!"$供试药物
%种中药为:丹皮(安徽),秦皮(河北),射干(湖
北),陈皮(广东),白鲜皮(河南),大黄(宁夏),青蒿
(湖北),地肤子(河南),姜黄(浙江)。以上药物均由
武汉市老中医药门诊部提供,产地明确,为优质生
药,由彭银亭主任中药师鉴定确认。
!"%培养基
浓缩成!""<的;==:/>?和@12:A>培养基。
%种中药对马拉色菌分离株的抑菌实验研究
郑晓晖
$
,高进
!
,郑义
!
,许爱娥
$
($B杭州市第三医院皮肤科,杭州#$"""%;!B武汉市第一医院皮肤科,武汉4#""!!)
摘要:目的筛选有抑制马拉色菌分离株作用的中药。方法用试管药基法测定丹皮、秦皮、射干、陈皮、大黄、
姜黄、白鲜皮、地肤子、青蒿%种中药的CD7。结果丹皮CD7"B!!5?9:;、秦皮CD7"B#5?9:;、射干CD7"B#5?9
:;、陈皮CD7"B5?9:;、大黄CD7"B!5?9:;、姜黄CD7"B5?9:;、白鲜皮CD7"B5?9:;、地肤子CD7"B5?9:;、青蒿
CD7"B!!5?9:;。结论丹皮、大黄、青蒿具有明显抑制马拉色菌的作用。
关键词:马拉色菌;中草药;抗真菌剂9药理作用
中图分类号:#-%B%文献标识码:+文章编号:$E-!F"-"%(!""#)"$F""$EF"#
&’()+,)-./01.2345672..8)9-8+6+.+7-&::);.<7:=+-)>+-3<7:?/3+.+7-/0@)3+;+-)7-.8)9<70/.)3!"#"$$%&’"
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4.>1-%N’$172$+’1"#2(O)-"BI’1.>O)-"BPJKKCC>I-’B"
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;BRI),)0"#2B4";BRG’,1"0B)$/"$.,"+)$G.KIUBRU2,-’"$,2+"’"VIJKALA>L?1%0’$’""BB)";BBE)<20. 1O2J=2KAL/2/1>A0:=L/I/>=:=>2/1>=LAN1W=MAH"B!!5?9:;R"B#5?9:;R"B#5?9:;R"B5?9:;R"B!5?9:;R"B5?9:;R
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·论著·
$E··
中国中西医结合皮肤性病学杂志!""#年第!卷第$期
表!"种中药对马拉色菌的#$%(%&’()
)+
合轴
糠秕
球形
钝形
平均
丹皮
",!
",#
",!
",!
",!!-
秦皮
",#
",.
",.
",#
",#-
射干
",#
",.
",.
",#
",#-
陈皮
",-
/",-
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",-
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白鲜皮
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/",-
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大黄
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",#
",#
",!
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青蒿
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",!!-
地肤子
",-
/",-
/",-
/",-
",-
姜黄
",-
/",-
/",-
",-
",-
(00’12%和345’62培养基:质量分数为$7蛋白胨,
",-7葡萄糖,",$7酵母浸膏,",.7干燥牛胆盐,",$7
甘油,","-7单硬脂酸甘油酯,!7橄榄油,","-7吐
温8",$7全脂牛奶,$,!7琼脂,","-7氯霉素,",-7
放线菌酮。
!&’药样制备
每种生药称取!""%,加蒸馏水$"""’(浸泡
!"’12,然后煮沸!"’12,用纱布滤出煎液。药渣再
加水-""’(,同法煎煮过滤,将两次滤液混合,加热
浓缩成!""’(,即为$%&’(浓度水煎液,用蒸馏水
稀释成不同浓度。将!""7(00’12%和345’62培养
基加热溶解后放入9":恒温水浴箱内保持液态,取
等体积培养基与不同浓度中药液混合均匀,制成终
浓度为",-%&’(,",.%&’(,",#%&’(,",!%&’(,",$
%&’(,","-%&’(的药物培养基。分装试管,每管.
’(,加塞标记。
!&(对照设置
用!""7(00’12%和345’62培养基加入相同
体积蒸馏水后,做成普通$""7(00’12%和34;5’62
培养基。加菌为阳性对照,不加菌为阴性对照。
!&)试管药基法
每支药基管和阳性对照管加菌液-"!(。将接
种完毕的药基管和对照管置霉菌培养箱内,#!:培
养,!<观察$次,连续$"<。
结果
&!判读标准
培养$"<后,如移种之菌不见生长为抑制。与
对照组生长情况相似,为无抑制作用。-管中#管以
上的生长情况判断抑菌情况。实验重复#次,取平
均值。
&观察结果
实验结果如表$所示。
+讨论
马拉色菌相关疾病主要分为两型:一型以马拉
色菌在皮肤上的密度高,通常黏附在角质层细胞上
为特点的疾病,如花斑癣、糠秕马拉色菌毛囊炎;另
一型是以炎症和伴有低密度马拉色菌为特征的一
组疾病,如脂溢性皮炎、痤疮、特应性皮炎和银屑病
等
[#]
。
抗真菌剂的中药实验很多,水煎液提取方便,
无醇或醋的干扰,可以粗筛具有抑制马拉色菌作用
的中药。本实验中=种中药:秦皮、丹皮、射干、地肤
子、大黄、青蒿、陈皮、姜黄、白鲜皮以往实验中都表
现出明显抑制表皮癣菌作用
[.,-]
。实验方法选择试管
药基法,这种方法准确,实验判读方便,可重复性
好。抑制对象选择糠秕马拉色菌、合轴马拉色菌、球
形马拉色菌、钝形马拉色菌.种。没有采用厚皮马
拉色菌、限制马拉色菌及斯洛菲马拉色菌的原因
是:"前两者分离株菌在人皮肤上发现的比例很
少;#厚皮马拉色菌为不依脂真菌,在(00’12%和
34;5’62培养基上生长旺盛,中药难以抑制;$限制
马拉色菌生长慢,多需!>#周,菌落小,培养中易死
亡,实验结果不准确;%斯洛菲马拉色菌未在临床
分离得到。
马拉色菌生长较慢,一般#!:在(00’12%和
345’62培养基需培养$周。在中药药基中生长更加
缓慢,故观察时间设定为$"<。此次实验观察得知
大多中药都可使马拉色菌的生长变慢,菌落小,其中
丹皮(",!!-%&’()、大黄(",!-%&’()、青蒿(",!!-
%&’()具有明显抑制马拉色菌的作用。丹皮性微寒,
味苦、辛,含牡丹酚、芍药甙、挥发油等,牡丹酚具有
镇痛、解痉作用,也有抑菌作用。大黄性寒,味苦,含
游离蒽醌衍生物和结合蒽醌衍生物,游离蒽醌衍生
物为大黄的主要抗菌成分,对病原性真菌有活性并
可抑制发癣菌属的真菌生长
[8]
。青蒿性寒,味苦,含
挥发油,油中含莰烯、异蒿酮、蒎烯、丁香烯等,多烯
类化合物能与真菌细胞膜(主要是麦角固醇)产生不
可逆的结合,在膜上形成微孔,从而改变细胞膜的渗
透性,使细胞内的钾离子和其他低分子量物质,如葡
萄糖、氨基酸等渗漏出,从而破坏真菌正常代谢和抑
制其生长
[9]
。=种中药中其他8种对致病性真菌亦有
抑制作用,但在我们的实验中并未表现出明显的抗
马拉色菌作用。原因可能有:"马拉色菌的生理与其
他真菌有显著区别,培养基的要求不同,培养基表面
$9··
中国中西医结合皮肤性病学杂志!""#年第!卷第$期
覆盖有一层油脂,马拉色菌在培养基表面生长,与
药基部分接触变少;!水煎剂减少了中药中的某些
成分,如挥发油,从而削弱了抗真菌效果。针对这些
因素,需要更深入研究,如提取挥发油和单成分,比
较抗马拉色菌的作用。另外应进一步进行临床药效
观察试验,验证其抗马拉色菌的确切疗效。
参考文献:
%&’()+,-./0&1%+%’-00)2345(&/&6’7!"#"$$%&’"8-2(.&9
7:;-<2-)6)==)’;6&87<&:-&7〔3〕4>62)6-&?@6A&&’8&6()&B+$CCD+
(DC)E##FG#HH4
[$]
我们应用中药湿敷治疗面部湿疹皮炎获得良好疗效。
!资料与方法
临床资料患者来自我科门诊,男$F例,女D#例,年龄
$IF"岁,病程!I$"周,分为两组。中药组J"例,其中接触性
皮炎!"例,急性湿疹F例,脂溢性皮炎$"例,激素性皮炎#
例;对照组J"例,其中接触性皮炎$C例,急性湿疹H例,脂
溢性皮炎$#例,激素性皮炎#例。$月内未接受其他药物治疗。
治疗方法中药组:选用中药(成分:黄连$"/,黄柏$H
/,地榆$H/,地肤子$H/,黄芩$H/,龙胆草#"/,马齿苋#"
/,双花$H/)$付水煎成药液!"""KA左右。对照组:!L硼
酸溶液。两组均用开放性冷湿敷,每次!"I#"K-6,每日!次。
用药期间禁忌外洗。
疗效判断标准治愈:皮疹完全消退,症状消失;显效:
皮疹消退D$LICHL,症状明显减轻;好转:皮疹消退!"LI
D"L,症状减轻;无效:皮疹消退M!"L,或继续加重,症状同前
或加剧。有效率为治愈率加显效率。
"结果
疗效见表$。起效时间#.:中药组!N例,硼酸组$H
例;$周:中药组F例,硼酸组$"例。
副作用:中药组!例患者皮疹消退后面部出现轻度色素
沉着,$月好转。
#讨论
黄连有明显抗菌及拮抗多种细菌毒素作用;黄柏也有抗
菌作用;地榆含鞣质有抗菌及收敛作用;地肤子对皮肤常见
致病性真菌均有不同程度抑制作用;!L硼酸溶液也具有明显
抗菌作用
[$,!]
。研究表明,湿疹皮疹严重程度与金黄色葡萄球
菌密切相关,糠秕马拉色菌、白念珠菌和毛癣菌也与湿疹相
关,故中药组疗效优于硼酸组可能与其特有的抗细菌及真菌
作用有关。中药湿敷为临床治疗提供一种安全、有效的方法。
中药湿敷治疗面部湿疹皮炎N"例疗效观察
孟爽,高颖,程凤兰
(沈阳市第七人民医院皮肤科,沈阳$$"""#)
中图分类号:OFHN4!#文献标识码:P文章编号:$DF!G"F"C(!""#)"$G""$NG"$
·临床经验·
[$]
[!]
贺兴东+钟赣生4临床中药手册〔,〕4北京E人民卫生出版社+
$CCD4J!G$NC4
张丰强+李岩+李晓锐4现代中药临床手册〔,〕4上海E科学普及
出版社+$CCD4JHG!C"4
(收稿日期:!""!G"CG$!修回日期:!""#G"!G$")
参考文献:
组别
表!中药组与硼酸组治疗面部湿疹皮炎疗效分析
$周中药组
硼酸组
!周中药组
硼酸组
#周中药组
硼酸组
$$
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痊愈显效好转无效痊愈率QL有效率QL
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中药组!周痊愈率优于硼酸组("
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中药组#周痊愈
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中药组$周有效率明显优于硼酸
组("
!
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中药组!周有效率优于硼酸组("
!
RJ4!F,(M
"4"H)
%’-00)23+%’&()+A&7)’;.,+%)"#4S.&62-=-:@2-)6)=!"#"$$%&’"
7<&:-&7〔3〕43,1:)0,&.+$CCD+(D)E$"#G$$"4
王群4糠秕马拉色菌相关皮肤病的免疫学研究现状〔3〕4国外医
学·皮肤性病学分册+$CCC+!H(#)E$HJG$HN4
赵哓洋+葛荣明+阎哈一4五味子半夏等八种中药抗真菌作用
〔3〕4中国皮肤性病学杂志+$CC!+D(#):$JC4
王昊+杨风琴+潘梅4$"种中药对致病性浅部真菌的抑菌实验
研究〔3〕4中医杂志+$CCF+#N(F):J#$GJ#!4
任仁安4中药鉴定学〔,〕4上海:上海科技出版社+$CND4JJGJN+
!NHG!NN+H""GH"!4
吴绍熙+郭宁如+侯幼红4抗真菌中药作用机理的研究进展〔3〕4
辽宁医学杂志+$CCN+$!(J):$N"G$N#4
(收稿日期:!""!G"HG$N修回日期:!""!G$!G$N)
[!]
[#]
[J]
[H]
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$N··
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