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9种中药对马拉色菌分离株的抑菌实验研究
2017-07-29 | 阅:  转:  |  分享 
  
中国中西医结合皮肤性病学杂志!""#年第!卷第$期

马拉色菌属为人体皮肤正常菌群之一,也是条

件致病菌,它与花斑癣、马拉色菌毛囊炎、痤疮、脂

溢性皮炎、银屑病等疾病相关。上世纪%"年代至

今,随着对菌种形态学和生理学特性的研究,以及

脉冲场凝胶电泳(&’())和随机扩增多态性技术

(+&,)的应用,该菌最终被分为-种:糠秕马拉色

菌(!"#"$$%&’"()())、厚皮马拉色菌(!"#"$$%&’"

+",-./%0"1’$)、合轴马拉色菌(!"#"$$%&’"$.0+2/’3

"#’$)、球形马拉色菌(!"#"$$%&’"4#252$")、钝形马拉

色菌(!"#"$$%&’"251)$")、限制马拉色菌(!"#"$$%&’"

%$1’,1")、斯洛菲马拉色菌(!"#"$$%&’"$#22((’"%)。抑

制马拉色菌的药物研究主要是以抗真菌剂如酮康

唑、伊曲康唑、氟康唑等对相关疾病临床疗效观察

为主

[$]

。中药体外抗真菌实验已有#"年历史,筛选

出#""余种抗真菌中药,但研究的抑制对象主要为

皮肤癣菌。本实验对%种具有明显抑制真菌的中药

进行抑制马拉色菌分离株实验,为马拉色菌相关疾

病药物治疗提供新思路。

!材料与方法

!"!菌株

武汉市第一医院皮肤科真菌室临床分离鉴定保

存的马拉色菌分离株,来源为花斑癣、马拉色菌毛囊

炎、痤疮。鉴定方法为(./0012法

[!]

。选取#!3孵育

!周生长良好的合轴马拉色菌、糠秕马拉色菌、球形

马拉色菌、钝形马拉色菌4种分离株。

!"#菌液的制备

用接种钩挑取适量放入无菌生理盐水中轻轻研

磨成混悬液,在血细胞计数板上调节菌液浓度为56

$"

5

7’89:;。

!"$供试药物

%种中药为:丹皮(安徽),秦皮(河北),射干(湖

北),陈皮(广东),白鲜皮(河南),大黄(宁夏),青蒿

(湖北),地肤子(河南),姜黄(浙江)。以上药物均由

武汉市老中医药门诊部提供,产地明确,为优质生

药,由彭银亭主任中药师鉴定确认。

!"%培养基

浓缩成!""<的;==:/>?和@12:A>培养基。

%种中药对马拉色菌分离株的抑菌实验研究

郑晓晖

$

,高进

!

,郑义

!

,许爱娥

$

($B杭州市第三医院皮肤科,杭州#$"""%;!B武汉市第一医院皮肤科,武汉4#""!!)

摘要:目的筛选有抑制马拉色菌分离株作用的中药。方法用试管药基法测定丹皮、秦皮、射干、陈皮、大黄、

姜黄、白鲜皮、地肤子、青蒿%种中药的CD7。结果丹皮CD7"B!!5?9:;、秦皮CD7"B#5?9:;、射干CD7"B#5?9

:;、陈皮CD7"B5?9:;、大黄CD7"B!5?9:;、姜黄CD7"B5?9:;、白鲜皮CD7"B5?9:;、地肤子CD7"B5?9:;、青蒿

CD7"B!!5?9:;。结论丹皮、大黄、青蒿具有明显抑制马拉色菌的作用。

关键词:马拉色菌;中草药;抗真菌剂9药理作用

中图分类号:#-%B%文献标识码:+文章编号:$E-!F"-"%(!""#)"$F""$EF"#

&’()+,)-./01.2345672..8)9-8+6+.+7-&::);.<7:=+-)>+-3<7:?/3+.+7-/0@)3+;+-)7-.8)9<70/.)3!"#"$$%&’"

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56<./;.AB6C);.+D)G1H=0=I22J=2KAL/2/1>A07J/>=H=:=L/I/>=HMJ/IJIA>/>J/N/2!"#"$$%&’"?K1M2JB@).873<

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·论著·

$E··

中国中西医结合皮肤性病学杂志!""#年第!卷第$期

表!"种中药对马拉色菌的#$%(%&’()

)+

合轴

糠秕

球形

钝形

平均

丹皮

",!

",#

",!

",!

",!!-

秦皮

",#

",.

",.

",#

",#-

射干

",#

",.

",.

",#

",#-

陈皮

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/",-

",-

",-

白鲜皮

",-

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",-

",-

大黄

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",#

",#

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青蒿

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",!

",!!-

地肤子

",-

/",-

/",-

/",-

",-

姜黄

",-

/",-

/",-

",-

",-

(00’12%和345’62培养基:质量分数为$7蛋白胨,

",-7葡萄糖,",$7酵母浸膏,",.7干燥牛胆盐,",$7

甘油,","-7单硬脂酸甘油酯,!7橄榄油,","-7吐

温8",$7全脂牛奶,$,!7琼脂,","-7氯霉素,",-7

放线菌酮。

!&’药样制备

每种生药称取!""%,加蒸馏水$"""’(浸泡

!"’12,然后煮沸!"’12,用纱布滤出煎液。药渣再

加水-""’(,同法煎煮过滤,将两次滤液混合,加热

浓缩成!""’(,即为$%&’(浓度水煎液,用蒸馏水

稀释成不同浓度。将!""7(00’12%和345’62培养

基加热溶解后放入9":恒温水浴箱内保持液态,取

等体积培养基与不同浓度中药液混合均匀,制成终

浓度为",-%&’(,",.%&’(,",#%&’(,",!%&’(,",$

%&’(,","-%&’(的药物培养基。分装试管,每管.

’(,加塞标记。

!&(对照设置

用!""7(00’12%和345’62培养基加入相同

体积蒸馏水后,做成普通$""7(00’12%和34;5’62

培养基。加菌为阳性对照,不加菌为阴性对照。

!&)试管药基法

每支药基管和阳性对照管加菌液-"!(。将接

种完毕的药基管和对照管置霉菌培养箱内,#!:培

养,!<观察$次,连续$"<。

结果

&!判读标准

培养$"<后,如移种之菌不见生长为抑制。与

对照组生长情况相似,为无抑制作用。-管中#管以

上的生长情况判断抑菌情况。实验重复#次,取平

均值。

&观察结果

实验结果如表$所示。

+讨论

马拉色菌相关疾病主要分为两型:一型以马拉

色菌在皮肤上的密度高,通常黏附在角质层细胞上

为特点的疾病,如花斑癣、糠秕马拉色菌毛囊炎;另

一型是以炎症和伴有低密度马拉色菌为特征的一

组疾病,如脂溢性皮炎、痤疮、特应性皮炎和银屑病



[#]



抗真菌剂的中药实验很多,水煎液提取方便,

无醇或醋的干扰,可以粗筛具有抑制马拉色菌作用

的中药。本实验中=种中药:秦皮、丹皮、射干、地肤

子、大黄、青蒿、陈皮、姜黄、白鲜皮以往实验中都表

现出明显抑制表皮癣菌作用

[.,-]

。实验方法选择试管

药基法,这种方法准确,实验判读方便,可重复性

好。抑制对象选择糠秕马拉色菌、合轴马拉色菌、球

形马拉色菌、钝形马拉色菌.种。没有采用厚皮马

拉色菌、限制马拉色菌及斯洛菲马拉色菌的原因

是:"前两者分离株菌在人皮肤上发现的比例很

少;#厚皮马拉色菌为不依脂真菌,在(00’12%和

34;5’62培养基上生长旺盛,中药难以抑制;$限制

马拉色菌生长慢,多需!>#周,菌落小,培养中易死

亡,实验结果不准确;%斯洛菲马拉色菌未在临床

分离得到。

马拉色菌生长较慢,一般#!:在(00’12%和

345’62培养基需培养$周。在中药药基中生长更加

缓慢,故观察时间设定为$"<。此次实验观察得知

大多中药都可使马拉色菌的生长变慢,菌落小,其中

丹皮(",!!-%&’()、大黄(",!-%&’()、青蒿(",!!-

%&’()具有明显抑制马拉色菌的作用。丹皮性微寒,

味苦、辛,含牡丹酚、芍药甙、挥发油等,牡丹酚具有

镇痛、解痉作用,也有抑菌作用。大黄性寒,味苦,含

游离蒽醌衍生物和结合蒽醌衍生物,游离蒽醌衍生

物为大黄的主要抗菌成分,对病原性真菌有活性并

可抑制发癣菌属的真菌生长

[8]

。青蒿性寒,味苦,含

挥发油,油中含莰烯、异蒿酮、蒎烯、丁香烯等,多烯

类化合物能与真菌细胞膜(主要是麦角固醇)产生不

可逆的结合,在膜上形成微孔,从而改变细胞膜的渗

透性,使细胞内的钾离子和其他低分子量物质,如葡

萄糖、氨基酸等渗漏出,从而破坏真菌正常代谢和抑

制其生长

[9]

。=种中药中其他8种对致病性真菌亦有

抑制作用,但在我们的实验中并未表现出明显的抗

马拉色菌作用。原因可能有:"马拉色菌的生理与其

他真菌有显著区别,培养基的要求不同,培养基表面

$9··

中国中西医结合皮肤性病学杂志!""#年第!卷第$期

覆盖有一层油脂,马拉色菌在培养基表面生长,与

药基部分接触变少;!水煎剂减少了中药中的某些

成分,如挥发油,从而削弱了抗真菌效果。针对这些

因素,需要更深入研究,如提取挥发油和单成分,比

较抗马拉色菌的作用。另外应进一步进行临床药效

观察试验,验证其抗马拉色菌的确切疗效。

参考文献:

%&’()+,-./0&1%+%’-00)2345(&/&6’7!"#"$$%&’"8-2(.&9

7:;-<2-)6)==)’;6&87<&:-&7〔3〕4>62)6-&?@6A&&’8&6()&B+$CCD+

(DC)E##FG#HH4

[$]

我们应用中药湿敷治疗面部湿疹皮炎获得良好疗效。

!资料与方法

临床资料患者来自我科门诊,男$F例,女D#例,年龄

$IF"岁,病程!I$"周,分为两组。中药组J"例,其中接触性

皮炎!"例,急性湿疹F例,脂溢性皮炎$"例,激素性皮炎#

例;对照组J"例,其中接触性皮炎$C例,急性湿疹H例,脂

溢性皮炎$#例,激素性皮炎#例。$月内未接受其他药物治疗。

治疗方法中药组:选用中药(成分:黄连$"/,黄柏$H

/,地榆$H/,地肤子$H/,黄芩$H/,龙胆草#"/,马齿苋#"

/,双花$H/)$付水煎成药液!"""KA左右。对照组:!L硼

酸溶液。两组均用开放性冷湿敷,每次!"I#"K-6,每日!次。

用药期间禁忌外洗。

疗效判断标准治愈:皮疹完全消退,症状消失;显效:

皮疹消退D$LICHL,症状明显减轻;好转:皮疹消退!"LI

D"L,症状减轻;无效:皮疹消退M!"L,或继续加重,症状同前

或加剧。有效率为治愈率加显效率。

"结果

疗效见表$。起效时间#.:中药组!N例,硼酸组$H

例;$周:中药组F例,硼酸组$"例。

副作用:中药组!例患者皮疹消退后面部出现轻度色素

沉着,$月好转。

#讨论

黄连有明显抗菌及拮抗多种细菌毒素作用;黄柏也有抗

菌作用;地榆含鞣质有抗菌及收敛作用;地肤子对皮肤常见

致病性真菌均有不同程度抑制作用;!L硼酸溶液也具有明显

抗菌作用

[$,!]

。研究表明,湿疹皮疹严重程度与金黄色葡萄球

菌密切相关,糠秕马拉色菌、白念珠菌和毛癣菌也与湿疹相

关,故中药组疗效优于硼酸组可能与其特有的抗细菌及真菌

作用有关。中药湿敷为临床治疗提供一种安全、有效的方法。

中药湿敷治疗面部湿疹皮炎N"例疗效观察

孟爽,高颖,程凤兰

(沈阳市第七人民医院皮肤科,沈阳$$"""#)

中图分类号:OFHN4!#文献标识码:P文章编号:$DF!G"F"C(!""#)"$G""$NG"$

·临床经验·

[$]

[!]

贺兴东+钟赣生4临床中药手册〔,〕4北京E人民卫生出版社+

$CCD4J!G$NC4

张丰强+李岩+李晓锐4现代中药临床手册〔,〕4上海E科学普及

出版社+$CCD4JHG!C"4

(收稿日期:!""!G"CG$!修回日期:!""#G"!G$")

参考文献:

组别

表!中药组与硼酸组治疗面部湿疹皮炎疗效分析

$周中药组

硼酸组

!周中药组

硼酸组

#周中药组

硼酸组

$$

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$!

痊愈显效好转无效痊愈率QL有效率QL

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中药组!周痊愈率优于硼酸组("

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%’-00)23+%’&()+A&7)’;.,+%)"#4S.&62-=-:@2-)6)=!"#"$$%&’"

7<&:-&7〔3〕43,1:)0,&.+$CCD+(D)E$"#G$$"4

王群4糠秕马拉色菌相关皮肤病的免疫学研究现状〔3〕4国外医

学·皮肤性病学分册+$CCC+!H(#)E$HJG$HN4

赵哓洋+葛荣明+阎哈一4五味子半夏等八种中药抗真菌作用

〔3〕4中国皮肤性病学杂志+$CC!+D(#):$JC4

王昊+杨风琴+潘梅4$"种中药对致病性浅部真菌的抑菌实验

研究〔3〕4中医杂志+$CCF+#N(F):J#$GJ#!4

任仁安4中药鉴定学〔,〕4上海:上海科技出版社+$CND4JJGJN+

!NHG!NN+H""GH"!4

吴绍熙+郭宁如+侯幼红4抗真菌中药作用机理的研究进展〔3〕4

辽宁医学杂志+$CCN+$!(J):$N"G$N#4

(收稿日期:!""!G"HG$N修回日期:!""!G$!G$N)

[!]

[#]

[J]

[H]

[D]

[F]

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