安徽医科大学学报ActaUni-sitatisMedicinalisAnhui2002Jun;37(3)183
丹皮酚的体内外抗肿瘤作用
孙国平沈玉先张玲玲王华魏伟徐叔云
摘要目的研究丹皮酚在体外的细胞毒作用和体内抗肿
瘤作用。方法唾哇兰(MT丁)体外试验法和灌胃给药体内
抗肿瘤试验。结果丹皮酚对体外培养的人红白血病细胞
K5m、人乳腺癌基因细胞T6-}7和肝癌细胞BEI-7404的半数
抑制浓度(1C,)依次为25.38mg/L,10.81mg/L和93.39
mg/L。体内灌胃给予丹皮酚50mg/kg-d'',200mg/kg-d-''
和800tng/kg"d-''igx14d对小鼠肿瘤HepA的抑制率分别
为39.26%一42.55%,49.69%一55.32%和64.42一
72.64%,P<0.01,差异有显著性。结论丹皮酚在体外有
细胞毒作用灌胃给药有抗肿瘤作用
主顺词牡丹皮酚尸药理学;抗肿瘤药(中药)满理学;小鼠
中图分类号8284.1
文献标识码A文s编号1000-1492(2002)03一0183一03
牡丹皮是安徽省道地中药材。药理研究表明，
牡丹皮的有效成分或部位具有解热镇痛、抗炎和免
疫调节、抑制血小板聚集、抗血栓形成和中枢抑制作
用。临床研究发现，在宫颈癌、肝癌、肺癌、喉癌、乳
腺癌等有效治疗方剂中均包含有牡丹皮川。但对
牡丹皮抗癌作用的有效成分及作用机制，国内外均
未对其进行深入研究。本研究探讨了牡丹皮的主要
活性成分丹皮酚(Paeonol)的体内外抗肿瘤作用。
公司产品,MTT及RPMI-1640为Sigma公司产品，
EL-301Stripreader(酶标仪)为美国Bio-TeK公司产
口
口口。
1.2方法
1.2.1体外抑瘤试验采用MTT法，按文献(2,3)
描述的方法进行试验。取对数生长的肿瘤细胞Ix
1护/L接种于96孔培养板上，每孔0.2ml。设不同
浓度的丹皮酚组、细胞对照组和空白对照组，各组设
4个平行孔。悬浮生长的细胞直接加人不同浓度的
丹皮酚，置370C5%Cq培养箱中培养48h,贴壁
生长的细胞需待细胞贴壁后再加人不同浓度的丹皮
酚，继续培养48h，实验终止前4h加人MTT液，再
培养4h,测试前加人DMSO，待结晶溶解后在波长
570nm处测每孔的A值，按下列公式求出生长抑
制率。
生长抑制率(%卜(卜男灌爵蓦爱氰\100%
材料和方法
1.1材料
1.1.1肿瘤细胞株人红白血病细胞株K526、乳腺
癌基因细胞株T6-17,肝癌细胞株BEL7404均由安
徽省医研所病毒室提供。肝癌细胞株HepA由安徽
医科大学临床药理研究所传代保株。
1.1.2动物昆明种小鼠18一22g,早舍兼用，由
本校实验动物中心(皖医实动准字02号)提供。
1.1.3试剂与仪器丹皮酚注射液为上海第一制
药厂产品，丹皮酚原料由安徽医科大学临床药理所
植化室提供，环磷酞胺(CTX)为江苏恒瑞医药有限
以药物浓度为横轴，抑制率作纵轴，绘制生长抑制曲
线，用回归法求出ICso0
1.2.2体内抑瘤试验在无菌条件下抽取生长7d
的HepA腹水型小鼠腹水，用生理盐水调节细胞浓
度为1xlom/L，接种于小鼠右腋皮下，每只0.2
ml，随机分成对照组，CTX20mg/kg组和丹皮酚不
同剂量组。每组12一14只小鼠，接种24h后灌胃
给药，每日1次，连用14do停药次日处死小鼠，称
体重和瘤重。按下列公式计算抑瘤率。
nod(%)=(1-籍鬓器U-100%
数据处理
结果
2002一03一05收稿,2002一04一15修回
基金项月:安徽省自然科学基金资助课题(编号:00044414)
作者单位:安徽医科大学临床药理研究所，合肥230032
作者简介:孙国平，男，41岁，博士生.副主任医师，副教授，现在安徽
氏科大学第一附月医院肿瘤科〔合肥7,30022)工作
2.1丹皮酚在体外对肿瘤细胞生长抑制作用丹
皮酚3.91一250mg/L对K562及几一，7的生长均有
抑制作用，抑制率随药物的浓度升高而升高，其1C,
分别为25.38和10.81mg/L。对BEL-7404的抑制
作用较差，在31.25mg/L浓度下抑制率仅为
15.70%,IC5o为93.39mg/L。见图to
2.2丹皮酚对小鼠移植性肝瘤HepA的抑制作用
阳性对照药CTX在20mg/掩-d-tigx14d，对
万方数据
184安徽医科大学学报ActorUniveesitati.sMFxdicinalisAnhui2002Jun;37(3)
表1丹皮酚对小鼠移植性肿有“印A的抑制率
组别
对照
CIX
丹皮酚
剂量与方案动物数〔只)平均瘤重后
一14
14
x144立一(哪勺.0‘i8
体重变化
(9)
+16.00
+10.36
+12.69
+13.50
+10.33
+11.00
48.92
+12.27
+11.25
+12.00
斗10.83
+9.40
(x3.29_-1R_)01
抑瘤率
t%〕
0.77士0.54''''
1.89士1.25"
1.50土0.67二
1.47土0.72''甘
1.33士0.72二
0.90士0.42''''
3.26-1.12
0.79土0.26一
1.98士0.90''''
1.64土0.50''''
1.16士0.45二
76.60
42.55
54.41
55.32
59.57
7264
黑
丹皮酚
75.77
39.26
49.69
64.42
13
14
12
12
13
12
佗
12
12
10
前
一14
14
14
14
14
14
14
12
12
12
12
12
2050
100200
400绷
~20
50姗
绷
与对照组比较:''P<0.01
00
90
阴
70
阴
朋
叨
朋
朋
﹁尹
︸
荟、
﹃汗
章
10}0仁二一
8215.6331.2562
药物浓度(mg/L)
圈1丹皮醉在体外对肿，细胞生长抑制作用
HepA的抑制率分别为76.60%和75.77%，均P<
0.01,显示明显差异。丹皮酚在50--800mg/kg-
d-’均有明显抑瘤作用，50mg/kg"d-’抑瘤率达
42.55%和39.2696，当剂量增至800mg/kg-d-‘时
抑瘤率高达70%左右。在总共二批试验158只小
鼠中，死亡8只，其中50mg/kg-‘剂量组死亡1
只，200和400mg/kg-d-’剂量组各死亡2只，800
mg/kg-d一’剂量组死亡3只，模型组和CTX对照组
均无死亡
皮酚3.91-250mg/L对人红白血病细胞Kw2及人
乳腺癌基因细胞T6-17细胞的生长均有抑制作用，
药物浓度越高，抑制作用越强。其1C5。分别为
25.38mg/1和10.81mg/L，丹皮酚对小鼠移植性
肝癌13KL-7404的生长抑制较弱，I(:5。为93.39mg/
L。结果表明丹皮酚对肿瘤细胞的生长抑制作用具
有浓度依赖性，对不同的细胞株有其选择性。
丹皮酚50mg/kg"d-1igx14d对小鼠HepA
的生长即有明显抑制作用，其抑瘤率达40%左右，
随着剂量的增加抗肿瘤作用增强，文献川报道，丹
皮酚给小鼠口服用药的日殆。为3430mg/kg。本实
验158只小鼠中共死亡8只。各剂量组小鼠死亡率
均低于2096，用药后体重均有明显增加。实验中观
察各组小鼠的一般状态良好，外观、毛色、大便、活动
等均正常，未见明显毒副作用。
本研究结果表明丹皮酚在体外和体内试验均有
抗肿瘤作用。丹皮酚抗肿瘤作用的机制尚未见报
道，作者已对丹皮酚作用后细胞凋亡和凋亡相关基
因的表达进行了研究，初步发现丹皮酚可以通过影
响凋亡相关基因Fas,bcl-2,Bax和p53的表达，诱导
细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用(另文报道)。
3讨论
丹皮酚是牡丹皮的主要活性成分之一。研究表
明丹皮酚具有广泛的药理活性，包括解热、镇痛、抗
菌消炎、抗动脉粥样硬化，抑制血小板聚集及增强细
胞免疫功能和抗氧化作用(a,5)。体外研究还发现，
丹皮酚能够逆转人红白血病细胞株K526/ADM细胞
的多药耐药性(6)
本实验对丹皮酚的抗肿瘤作用进行了研究。丹
参考文献
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术出版社，1999:675-680
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60(2):206-210
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西安公司，1996:186-187
张广饮。禹志颖，赵厚长.丹皮酚对大鼠反复性脑缺血的保护
作用.中药材.1997:20(12)-626-628
万方数据
安徽医科大学学报ActaUni}itatisMedicinalisAnhui2002fun;37(3)185
褪黑素镇痛作用的依赖性及免疫增强作用
郝吉庆‘沈玉先2魏伟“徐叔云2
摘要目的观察褪黑素(Mr的镇痛作用是否有耐受性和
依赖性及其对免疫功能的影响。方法依赖性观察采用小
鼠竖尾实验和跳跃实验;免疫功能的检测采用免疫器官称重
法、碳粒廓清实验及脾淋巴细胞增殖反应等。结果MT40
mg/kg(gdx7d，川产生镇痛作用而无耐受现象，并能提高
C-A诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应;小鼠,cMT350mg/
kg未出现竖尾现象;MT350mg/kg(bidx5d)后，用纳洛酮
(5mg/kg)催瘾未出现跳跃现象，且对盐酸吗啡依赖小鼠的
跳跃实验无明显影响MT350mg/kg(bidx5d)后，脾、胸腺
指数及碳粒廓清实验中K,a值高于溶媒组，提示NTI,能显
著增加小鼠的非特异性免疫功能;盐酸吗啡30mg/kg(bid
x5d)对小鼠的免疫功能有抑制作用。结论MT镇痛作用
无明显的耐受性及依赖性，并对免疫功能有促进作用
主题词褪黑激素/药理学;镇痛;免疫性
中图分类号8977.1
文献标识码A文章编号1000一1492(2002)03一0185一04
以吗啡为代表的麻醉性镇痛药，另一类是以阿斯匹
林为代表的非m体抗炎药。前者效能虽强，但易产
生耐受和依赖，并伴有机体免疫功能的降低(1);后
者虽无明显的依赖性，但镇痛作用弱，不良反应较
多，因而限制了这两类药物的使用。褪黑素(mela-
tonin,M7)是松果腺分泌的主要活性物质，参与了
机体多种生理功能的调节，如调节昼夜节律和诱导
睡眠[(2)，并对阿片肤镇痛的昼夜节律有调节作
用((3)研究发现，松果腺上存在阿片受体，内源性
的MT参与创伤后的疼痛调节(4)，提示内源性的
MT参与了疼痛调节。我们以往的研究表明，外源
性的MT有镇痛作用，并与At替吮有协同作用(5)
本研究拟在上述研究的基础上，进一步观察MT的
镇痛作用是否有依赖性及其对免疫功能的影响。
材料和方法
目前临床上使用的镇痛药主要有两类:一类是
2002一Ol一]4收稿.2002一03一21修回
作者单位’安徽医科大学第一附属医院肿瘤科，合肥230022
2安徽医科大学临床药理研究所，合肥230032
作者简介郝吉庆，女，32岁，硕上，主治医师;
徐叔z:,男,70岁，教授，博t生导师，中国药理学会副理
事长
1.1动物昆明种小鼠，由安徽医科大学实验动物
中心〔皖医实动准字01号)提供。
1.2仪器DYQ-DI型多头细胞收集器:绍兴坡塘
医疗器械厂;FJ-2107型液闪计数仪:西安262厂生
产;YJ-1450型医用净化工作台:苏州净化设备公司
产品;Napco-6100CQz培养箱:美国杜邦公司产品;
721型分光光度计:上海第三分析仪器厂。
章灵华，尚培根，黄艺等.丹皮酚的药理与临床研究进展
中国中西医结合杂志。1996:16(3):187-189
孙慧君，王晓琦，于丽敏等.丹皮酚对卜门】〕R逆转作用的研究
解M1科学进展，2000;6(1):59-62
Anti-tumoreffectofpaeonolinvitroandin
SunGuoping,ShenYuxian,ZhangLinglingetal
(InstituteofClinicalPharmacology，AnhuiMedicalUniversity,Hefei
vlvo
230032)
AbstractObjectiveToinvestigatetheanti-tumoreffectofpaeonolinvitroandinvim.MethodsM"ITas-
sayandanti-tumortestinvimwereused.ResultsIC50ofpaeonolonK562cells,T6一17cellsandBEL-7404
cellswere25.83，10.81and93.39mg/L,respectively.Underthedoseof50,200,800mg/kg/dfor14d,
theinhibitoryratesofpaeonolonHepAinmicewere39.26%一42.55%,49.69%一55.32%and64.42%一
72.64%respectively.ConclusionPaeonolpossessesanti-tumoractivitiesinvitroandinvim
McSHpaeonol小harmacology;antineoplasticdrugs(TCD)巾harmamlogy;mice
万方数据
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