110中国中西医结合肾病杂志2003盆2f1S二立笙兰塑
学者报道使用肝素抗凝可减少尿蛋白、升高血浆蛋白[5,61
笔者认为低分子量肝素也能用于DN治疗，埋由是:DN肾
小球滤过屏障受损的主要原因是肾小球基底膜(GBM)负电
荷减少[i11,GBM负电荷的主要来源是带负电荷的硫酸类肝
素蛋自多糖,uN时硫酸类肝素蛋白多糖减少与结构改变引
起尿蛋白排泄异常。应用低分子量肝素可使受损的GBM
负电荷屏障重建[51，并能防止系膜基质扩张、GBM增殖，因
而能有效抑制DN的尿蛋白排泄异常。此外DN都有高血
脂，高血脂又进一步加速DN的进程，如脂蛋白(a)可影响
肾小球系膜增殖，通过多途径介导肾小球损害ill。而肝素
类抗凝剂中只有低分子量肝素能对血脂产生良好影响[[51
降低脂蛋白(a),总胆固醉、甘油三酷.载脂蛋白B，从而减轻
或防止高血脂对肾小球损伤。
本组应用低分子量肝素治疗DN，治疗后尿蛋白量、
UAE值比治疗前明显减少，差异显著(P<0.05)将两组
治疗后尿蛋白、UAE减少值比较，治疗组也优于对照组，差
异显著(P<0.01)。治疗后浮肿与高血压例数也比治疗前
明显减少差异显著(P<0.05).支待低分子量肝素改善
DN病情与预后的效用〔，本试验对低分子量肝素治疗DN
作了初步探讨，肯定了其疗效，对DN的治疗作了有益的尝
试。
参考文献
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(收稿:2002一07一22)
肾康灵胶囊对IgA肾病大鼠的实验研究
刘光珍①肖红霞①”兆峰①R明n
肾康灵胶囊为临床治疗IgA肾病的中药中试产品，由
黄芭.当归、生地、丹参、三七参、丹皮、黄柏、五倍子等组成，
具有补气活血、清热养阴之功效。近年来对IgA肾病治疗
的观察表明，本品疗效显著，本文以具有改善微循环作用的
保肾康片为对照药，观察了不同剂量的肾康灵胶囊对IgA
肾病大鼠的影响。
资料与方法
1实验材料
1.1实验动物SD系雄性大鼠，体重(180110)g，由
中国辐射防护研究院提供。
1.2药物与试剂牛血清白蛋白(BSA)(上海生物制
品厂，批号为990801),葡萄球菌肠毒素B(SEB)(解放军军
事医学科学院提供，批号为991003),IgA荧光抗体(DAKO
公司)，纤维连接蛋白抗体(FN一I茄(DAKO公司提供)，
保肾康片(主要成份川芍提取物，成都亨达制药厂，批号为
990401),肾康灵胶囊(主要成份黄蔑、当归、生地、丹参、三
七参、丹皮、黄柏、五味子等，山西省中医药研究院中药中试
基地生产，批号为990213)0
2方法
2.1动物分组与造模大鼠随机分为正常对照组，模
型组、保肾康组、肾康灵大小剂量组，除正常对照组外，其余
各组动物采用免疫复合法，先隔日口服含0.1%BAS的酸化
水((6nunol/LHCI)[''],6周后给1%BSA缓冲液尾静脉注射
(Inil/l00g)，每日I次，连续3次;8周时复加静脉滴注
SEB(0.4mg/kg)[al，每周I次，连续3周，共10周正常对
照组予等量生理盐水。试验期间所有动物给普通标准颗粒
饲料，自由饮水。
2.2给药方法于第10周静注完SEB后开始灌胃给
药，保肾康组剂量为8.0g.掩i,d-1;肾康灵大小剂量组分
别为2.0g-掩''"d-'',4.0g"kg''"d-'';模型组与对照组给
等体积生理盐水。给药3周后取材，检测各项指标
2.3检测项目和方法
2.3.1肾功能测定(1)血液生化:血清肌ff(Scr).尿
素氮(BUN)、胆固醇(TC;(2)尿常规:尿红细胞计数、24h
尿蛋白定量。
2.3.2肾组织光镜观察所取组织用饱和氯化汞-
福尔马林固定液固定，切成2+m厚的切片。用HE常规染
色，在olympus光学显微镜下观察肾组织的病理形态学的改
变。
2.3.3肾组织免疫荧光观察取新鲜组织常规切片.
厚度6)an,室温风干，丙酮固定10min,0.01%PBS缓冲液
洗3次，每次5min,滴加兔抗鼠免疫荧光1gA(异硫氢荧光
素标记),37℃避光孵育45min，用PBS液洗3次，甘油缓
冲液封片，olympusBx60荧光显徽镜下观察。
2.3.4肾组织化学检查(PAP法)取新鲜组织常规
切片，厚度4tun，在1%块q一甲醉室皿封闭31min,PBS
(0.01mol/L)洗后置4%小牛血清中孵育30min(37℃)，加
①山西省中医药研究院(太原030012)
中[AJ中V4lk结合肾病杂造2003玉2坦4递旦竺II1
以FN-Ig(}(1.200),再孵育过夜((4t),取出经PKS冲洗
5min3次.加兔PBS并孵育10min(37℃)，再经PBS冲洗
5minx2次，用0.0050.4ODABH202显色5min流水冲洗
30min，升级脱水.二甲苯透明，中性树胶封片，Olympus光
学显微镜下观察纤维连接蛋白在肾小球的分布情况
3统计学方法采用
结
e检验和秩和检验。
E
1各组肾功能检测结果比较
1.1各组动物血清Scr,BUN和TC的测定结果见
表1:模型组大鼠血清Scr,BUN和w比正常大鼠明显升
高(P<0.01)I肾康灵两个剂量组Scr,BUN和’I℃水平，与
模型组re较差异显著(P<0.05或P<0.01)。说明肾康灵
能改善肾功能
表1各组大鼠血清Scr,BUN及
TC测定结果比较(s土‘)
2.2免疫荧光及纤维连接蛋白(FN)观察结果
正常对照组肾小球系膜区无IgA沉积，模型组肾小球系膜
区有较强的呈线状及块状结构的IgA沉积，而保肾康和肾
康灵各组肾小球系膜区的Ig.4沉积荧光强度较弱另以肾
小球系膜区出现棕黄色颗粒为阳性信号以颗粒的范围和
强度分为三个等级(细线状为1.颗粒状为II，团块状为
m)，正常组FN主要分布于肾小球系膜区，呈细线状，模型
组FN在系膜区范围和强度增强，在节段硬化及一部分球
性硬化的肾小球内FN明显增强.随系膜区增宽向毛细血
管壁周围延伸，并向内皮下插入，并且在肾间质内也大量呈
团块状分布;而肾康灵大小剂量组其FN在系膜区及其他
部位分布范围小，强度较模11''组明显减轻。见表4
表4FN及Igq检查结果
组别只效Sr}扣n幻几)〔(.-In.)
6.常劝照组
校型组
保肾唯组
肾康灵小剂坛纽
肾康灵大剂量组
57.01290
104士34.3-
68,2土16.2''
刀6士19.5''
65.4土价6‘甘
BI入(.朋1夕月J)
7.1611.47
32.2+4.70
21.3上3.03''.
20.8112.13''“
18.5412.35''''
1叭生D51
3.82士1.330
2.0士0断时母
1.92上066"
L85+0.87''
注:治疗组与正常对照组比较，护<。01;与模型组比较，P<
0.05“''P<(YOl
1.2各组尿蛋白含量和红细胞计数比较见表2。模
型组、保肾康组、肾康灵大小剂量组的24h尿蛋白含量和尿
红细胞数均明显增加，与对照组比较差异显著(P<0.001);
其中肾康灵与模型组间比较其蛋白含量显著降低(P<
0.00上)，而尿红细胞数则无差异〔尸>0.05)0
衰2各组大鼠尿蛋白定量及尿红细胞
计数结果比较(S士;)
组别只数尿红细胞数〔个/Hp)
10
10
10
10
川
‘卜常对照组
摸型911
保8康组
肾康灵小1711员组
肾康灵大刘斌组
尿蛋白cni24h〕
10.125士3.445
148.25土42.6690
tIXl.75112.025
110.25士11.368''
96.23土12.317''
0.265土1.458
5.75012.512''
5.500十2.343-
5.625止2.0800
5.114士2.035-
让:与正常对照组比较，-p
2肾组织形态学观察结果
2.1光镜检查结果肾组织病变程度的组织分级参
照ha、分级系统进行t,l模型组多数肾小球系膜细胞重度
增生.基质增多，球囊枯连，局灶性节段性硬化，肾小管多灶
状萎缩和代偿性肥大。而肾康灵大小剂量组仅见少数系膜
细胞和基质增殖，偶见球囊粘连和节段硬化。见表3。
表3各组肾组织病理形态结构h-分级t1较
注:与对照组比较，0P<0.01;与模型组比较.P<0.01
讨论
IgA肾病被认为是一种免疫复合物性肾炎，工萨免疫复
合物沉积是工必肾病发病的重要机制。本研究表明，肾康
灵胶囊OR著减少IgA免疫复合物在肾脏的沉积。同时能
降低尿蛋白，改善肾脏病理学变化，降低血肌醉、血尿素氮
和胆固醇;另外，肾小球硬化是IgA肾病进展的最终结局，
是慢肾衰的主要病理基础，其发病的主要机制被认为是细
胞与细胞外基质(ECM)过度增生的结果，而FN是ECM的
重要组成成份，由于FN特殊的分子构造，在肾小球硬化过
程中作为支点起着中心环节的作用川，故我们把它作为硬
化指标，以观察药物的长远疗效。从研究结果看，正常组
FN分布于系膜区，呈细线状分布，模型组FN除在系膜区
范围内显色增强外，还在节段硬化中也明显呈团块状增强，
并随系膜区增宽向毛细血管周围延伸，还向内皮下插人;另
在间质中也相应增多;而肾康灵大小剂量组的FN变化则
显著减轻。说明该药具有阻止FN的增多，延缓肾小球硬化
的作用，为临床运用本品治疗19气肾病提供了药效学依据。
参考文献
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(收稿:2002一04一20修同:2002一07一()q)
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保Ff康组
肾康灵小剂址组
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注与对照组比较0P<0.01;与模型组比较“P<0.01
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