免疫组织化学IHC实验的设计变量有哪些？

免疫组织化学IHC实验的设计变量有哪些？免疫组织化学（IHC）是一种相对简单明确的试验方法，但是我们仍然要根据不同的实验对每次IHC实验中的
多个变量进行优化。所以我们特地整理了一些需要考虑的因素和变量来确保实验结果的可重复性和可靠性。变量考虑的因素1：抗原①抗原的种类；
②表达水平；③样品的类型（包括组织标本和细胞标本，前者包括石蜡切片和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片2：抗原表位①若
已表位作图，主要考虑一下翻译后修饰3：合适的对照实验①空白对照（不加一抗的对照实验）；②同型对照；③吸附对照（包括组织标本和细胞标
本，前者包括石蜡切片和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片）。④组织类型对照4：样品制备①石蜡固定切片；②冰冻切片；5：
固定方法①浸泡法②蒸汽法③注射、灌注法④微波固定法6：固定剂①醛类固定剂（比较常用，需要进行抗原修复）②非醛类固定剂③丙酮及醇类固
定剂7：封闭蛋白封闭（例如用血清或BSA）防止非特异性结合造成的假阳性，必要时封闭内源酶干扰和生物素；还要考虑会不会受到Fc受体干
扰。8：抗原修复①高压热修复法②微波热修复法③酶消化法9：检测方法直接法还是间接法（信号需不需要放大）10：检测复合物①ABC②L
SAB③聚合物或微聚合物11：一抗①实验种属：Human，Mouse，Rat等；②样本抗原蛋白的结构性质；③单抗与多抗的选择：这个
需要结合试验的类型WB/IHC/ICC/ELISA等等。免疫组化（IHC）推荐使用兔单抗。12：二抗①物种（根据一抗选择的结果来选
择二抗，比如一抗选择兔单抗，二抗就选择羊抗兔）②标记（根据后续实验需要）13：标记方法①化学显色法②荧光法14：标记物①DAB系统
②AEC系统③BDHC系统④TMB系统⑤BCIP/NBT系统15：成像与分析①荧光显微镜或者标准显微镜②肉眼分析或者成像软件分析这
15各变量决定着免疫组化的成与败，也决定着免疫组化结果的优与汰。我们要在实验之前确定这些变量。在一些关键步骤上要严格的精选比如选择
一抗、抗原修复等环节，这样做的好处同样体现在试验出现问题了，我们可以及时的对照和更正。我相信，一个美丽的免疫组化结果应该是离你越来
越近的。