R601-V1-HyperScript III miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop),miRNA逆转录Kit

NovaBio
TM
HyperScriptIIImiRNA1stStrand
www.xinbeibio.com
cDNASynthesisKit(bystem-loop)
货号：R601
保存条件：-20℃长期储存
产品介绍：
本品为以microRNA(miRNA)为模板利用茎环法合成1stStrandcDNA的试剂盒。通过使用茎环逆转录引物本试剂盒可以合成高
度均一的cDNA用于qPCR定量。试剂盒所使用的逆转录酶是基于M-MLV定向进化而来的新一代逆转录酶，具有更低的RNase
H活性、更高的热稳定性和cDNA合成效率，搭配为其优化的最适buffer，有利于miRNA特异性逆转录产物。后续的miRNA定量
PCR可以使用本公司的2×S6miRNASYBRqPCRMix。茎环引物可咨询本公司。
产品组成：
组分R601-01(50个反应)R601-02(100个反应)

5×RTMix200μL400μL

TM
HyperScriptIIIEnzymeMix100μL200μL
RNase-freeddH2O1.5mL1.5mL
温馨提示：
·5xRTMix若出现白色沉淀，请颠倒混匀确保沉淀完全溶解后使用。
·为保证实验成功率和准确性，请勿使用过度降解的RNA。
·配置反应液时，请使用RNase-free枪头、Microtube等。
产品使用：
1.配置逆转录反应体系
请配置如下反应液：
TotalRNA1ng-5μg
5×RTMix4μL
TM
HyperScriptIIIEnzymeMix2μL
Stem-LoopPrimers2pmol(1μM,2μL)
RNase-freeddH2O补足至20μL
2.逆转录反应程序
请按如下条件进行逆转录反应：
25℃5min
50℃15min
85℃5sec
TM
注：a.HyperScriptIII在37-60℃均有较强活性；若目标RNA区域有高GC部分，可提高逆转录温度至55℃。
b.85℃5s可以失活逆转录酶，请勿省略该步骤。
逆转录产物可直接用于下游实验，也可置于4℃短暂放置，3-6个月内-20℃保存，长期存放请置于-80℃冰箱，cDNA小份分装
避免反复冻融。
4.附，茎环法逆转录过程：
miRNA与茎环引物末端互补配对
miRNA
逆转录酶延伸
茎环引物逆转录延伸miRNA互补序列
茎环引物
Version1.3本品仅供科研使用，不能用于人和动物医疗诊断Page1/2