皮肤性病基本实验及操作技术项目
一、真菌直接镜检法
【适应症】
头癣、体癣、股癣、手癣、足癣、甲真菌病、深部真菌病、着色芽生菌病、念珠菌病等
【用品】
10％氢氧化钾、玻片、酒精灯、手术刀、显微镜
【操作方法】
1．标本采集浅部真菌病常取鳞屑、菌痂、甲屑和毛发等标本，头癣取折断的病发，甲癣刮取深层的甲屑等，深部真菌病根据病情取脓液、痰、尿、粪、各种腔道分泌物、穿刺液和病变组织等标本。所有取材应在无菌条件下进行。
2．制片方法氢氧化钾涂片法：取少许标本置于玻片上，加1滴10％氢氧化钾溶液，盖上盖玻片，在火焰上微微加热以加速角质溶解，轻压盖玻片，用吸水纸吸取周围溢液；脓液或尿液等标本则不必加热；
【结果与临床意义】为最简单而重要的诊断方法，发现菌丝或孢子为阳性，反之为阴性。直接镜检阳性提示有真菌感染，但阴性不能除外真菌感染，必要时重复检查或作真菌培养。可用于评价真菌病治疗的疗效。
二、斑贴试验（patchtest）
【适应症】
接触性皮炎、职业性皮炎、手部湿疹、化妆品皮炎等。
【用品】
纱布、透明玻璃纸、橡皮膏、受试物
【操作方法】
根据受试物的性质配制适当浓度的浸液、溶液、软膏或原物作为试剂，置于4层1cm×1cm的纱布上，贴于背部或前臂曲侧的健康皮肤，其上用一稍大的透明玻璃纸覆盖，再用橡皮膏固定边缘。同时作多个不同试验物时，每两个之间距离应大于4cm。同时必须设阴性对照。
【结果与临床意义】
1．结果判定：24～48小时后观察。
－：受试部位无任何反应；
±：受试部位皮肤出现轻微瘙痒发红；
+：受试部位皮肤出现单纯红斑、瘙痒；
++：受试部位皮肤出现水肿性红斑、丘疹；
+++：受试部位皮肤出现显著红斑、丘疹及水疱。
2、临床意义
阳性反应说明患者对受试物过敏，但应排除原发性刺激或其他因素所致的假阳性反应，假阳性反应者将受试物除去后，皮肤表现很快消失，而真阳性反应除去受试物后24～48小时内皮肤表现往往可增强。阴性反应则表示患者对试验物无敏感性。
【注意事项】
应注意区分过敏反应及刺激反应；
阴性反应可能与试剂浓度低、斑试物质与皮肤接触时间太短等有关；
不宜在皮肤病急性发作期作试验，不可用高浓度的原发性刺激物作试验；
受试前2周和受试期间服糖皮质激素、受试前3天和受试期间服用抗组胺类药物均可出现假阴性；
如果在试验后72小时至1周内局部出现红斑、瘙痒等表现，应及时到医院检查。
三、皮肤点刺试验过敏性皮肤病一次性点刺针变应原点刺液包括：(1)组胺(阳性对照液)；(2)生理盐水(阴性对照液)；(3)屋尘螨；(4)粉尘螨；(5)羽毛；(6)花；(7)海蟹；(8)海鱼；(9)胶乳；(10)香烟；(11)；(12)牛奶等是一种有效测定过敏性皮肤病的特应性(对一种或多种变应原敏感)的方法。
操作步骤(1)选择左前臂掌侧皮肤进行点刺。(2)用记号笔在左臂中部标记所用点刺液名称，两种点刺液间的距离不小于5cm，以防止反应红晕融合；消毒皮肤。(3)自下而上滴各种点刺液1小滴(比针尖大即可)。(4)用一次性消毒点刺针垂直点在每一液滴中，轻压刺破皮肤(以不出血为度)，1秒后提起弃去，5分钟后将全部液滴擦去，30分钟后观察并记录皮肤反应。阳性结果判断标准以变应原及组胺(阳性对照液)所致风团面积比而定其反应级别，无反应或与阴性对照相同者为(-),比值为组胺风团(阳性对照)1/4以上者为(+),等于或大于阳性对照范围的1/2为(++),与阳性对照相等的为(+++),大于阳性对照范围2倍者为(++++)。
1．挤刮法选取鼻沟、颊部及颧部等皮损区，用刮刀或手挤压，将挤出物置于玻片上，滴一滴生理盐水，盖上盖玻片并轻轻压平，镜检有无蠕形螨。
2．透明胶带法将透明胶带贴于上述部位，数小时或过夜后，取下胶带贴于载玻片上镜检。
五、疥螨的检查
【适应症】
疥疮
【用品】
针头、手术刀、玻片、生理盐水、显微镜
【操作方法】
选择指缝、手腕的屈侧等处未经搔抓的丘疱疹、水疱或隧道，用消毒针头挑出隧道盲端灰白色小点置玻片上，或用蘸上矿物油的消毒手术刀轻刮皮损6～7次，取附着物移至玻片上，滴一滴生理盐水后镜检。
六、阴虱的检查
【适应症】
虱病
【用品】
剪刀、70％乙醇、玻片、10％KOH、显微镜
【操作方法】
用剪刀剪下附有阴虱和虫卵的阴毛，以70％乙醇或5％～10％甲醛溶液固定后放在玻片上，滴一滴10％KOH溶液后镜检。
七、醋酸白试验
【适应症】
尖锐湿疣
【用品】
5％冰醋酸、棉签
【操作方法】
首先用棉签清除局部分泌物后，用棉签蘸冰醋酸液涂在受试损害上及周围正常皮肤粘膜，一般在涂药2～5分钟后损害变为白色，周围正常组织不变色为阳性反应，醋酸白阳性者可诊断尖锐湿疣。
八、束臂试验血小板减少性紫癜坏血病压脉带
在前臂屈侧肘窝下4cm画一直径5cm的圆圈（先把已有的出血点标出），然后在上臂用压脉带加压至收缩压与舒张压之间，持续8分钟后，解除压迫。5分钟后在充足的自然光线下数出新出的血点的数目，超过20个为阳性。湿敷疗法纱布是指用纱布蘸药敷患处来治疗疾病的一种方法。纱布从药液中捞出，拧挤得不干不湿，有抑制渗出、收敛止痒、消肿止痛、控制感染、促进皮肤愈合等作用。塑料薄膜是在涂擦外用药物之后用敷料和塑料薄膜进行密封包扎封包每次24小时，每天换1次，3天为1疗程。封包疗法适用于手足部位。
【原理】
利用制冷剂产生低温使病变组织坏死达到治疗的目的，细胞内冰晶形成、细胞脱水、脂蛋白复合物变性及局部血液循环障碍等是冷冻的效应机制。
【不良反应及注意事项】
（1）疼痛：可有不同程度的疼痛，多为暂时性，一般均能耐受而无需特殊处理。
（2）水肿：治疗后均有一定程度的水肿，而在组织疏松的部位如眼睑、唇、舌、包皮和阴唇等可致严重水肿，水肿可逐渐自然消退。
（3）水疱与血疱：其形成与冷冻时间长短和冻融次数有关，尤其好发生于光损伤和老年萎缩性皮肤，以及以往曾局部外用糖皮质激素和放射治疗的皮损处。对于较大的水疱或血疱应在无菌条件下抽取疱液，这可减轻患者的肿痛感，同时应保护创面，避免感染。
（4）色素脱失：这一现象较易发生于皮肤较黑的患者，因为黑素细胞对低温敏感。轻者在数月内可消退，而重者则为永久性脱失。
（5）色素沉着：是炎症后色素沉着，较常发生，冷冻后避免日晒可使其发生减少或程度减轻，一般在数月内可逐渐消退。
（6）感觉障碍和麻痹：这是由于冷冻损伤了神经末梢所致，故在治疗指侧、耳后等部位时，应注意避免损伤神经。
（7）皮肤附属器损害：由于冷冻易损害毛囊和汗腺，故常可致治疗治疗部位毛发脱失和少汗。
（8）瘢痕形成：多为柔软的萎缩性瘢痕，极少发生增殖性瘢痕。
十二、氦氖激光
【适应症】
皮肤粘膜溃疡、斑秃、带状疱疹及后遗神经痛、皮肤瘙痒症、慢性荨麻疹等。
【原理】
波长为632.8nm，为红色光，属小功率激光，临床主要用于低功率照射。
氦氖激光照射引起的生物效应有：
扩张血管，加快血流，改善皮肤微循环；
增加细胞膜的通透性，激活酶的活性，从而促进组织代谢
③钾离子致痛试验及临床治疗证明，氦氖激光具有镇痛作用，其机制可能与降低末稍神经的兴奋性和减少炎症介质如5-HT等形成有关；
④增强巨噬细胞的吞噬作用，抑制粒细胞移动，增加溶菌酶和淋巴因子，因此有抗炎作用；
⑤增加血中免疫球蛋白和补体含量，促进淋巴细胞转化，具有增强细胞和体液免疫、调节机体免疫功能的作用。
十三、二氧化碳激光治疗
【适应症】
可用于各种皮肤良性赘生物的治疗，如色素痣、寻常疣、睑黄瘤、尖锐湿疣、毛发上皮瘤、汗管瘤、软纤维瘤、、脂溢性角化、皮肤恶性肿瘤及带状疱疹及后遗神经痛、慢性溃疡、寒冷性多形红斑等
【原理】
波长10600nm，属远红外线，皮肤科临床使用的二氧化碳激光器输出功率多为3～30W。二氧化碳激光的能量（92%）主要被细胞内、外的水分所吸收，故穿透极为表浅，仅为0.2mm。
二氧化碳激光经扩束成低光密度后，局部照射可用于治疗带状疱疹及后遗神经痛、慢性溃疡、寒冷性多形红斑等，均有一定疗效。治疗时以局部有舒适的温热感为度，光能量密度一般约为50～150mW／cm2，每次治疗时间5～15分钟，每日1次，15天为一疗程。
十四、超脉冲CO2激光
【适应症】
皮肤增生性病变：寻常疣、湿疣、色素痣、多发性皮脂腺囊肿、汗管角化症、老年疣、皮赘、睑黄瘤、单纯性血管瘤等通过组织吸收高能量的激光后所产生的光热反应，使局部温度在数秒内骤然升高到数百度或更高，组织发生凝固性坏死，甚至碳化或汽化，与此同时，由于急剧发热，组织的水分突然剧烈丧失，聚焦后，可用以切割或烧灼病变组织。
1.近期不良反应：包括红斑、干性皮肤瘙痒症、偶尔会出现光损害水疱和频率逐渐增加的周期性单纯疱疹。亚急性作用如瘙痒症和皮肤干燥，冷浴后应用柔和皮肤润滑剂效果良好。
2.过度照射导致的中等疼痛性红斑，可以局部应用皮质类固醇激素治疗。
十六、白癜风表皮移植术白癜风稳定期患者
1、发病与外伤有关，有同形反应及进展期的患者禁用。2、此项治疗总有效率在95%以上,由于存在个体差异，患病的类型和部位的不同，少数患者有不成活的可能。
3、凡患有糖尿病、末梢神经炎、瘢痕体质等的患者均不宜做此项治疗、术后治疗部位保持清洁干燥，加压包扎10天内避免接触水、多休息、少活动，避免出汗。、术后供皮应、受皮区均有可能出现色素沉着，随时间推移，正常人可自行消退
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