基因工程综合试题（二）一、多选题1．下图为农杆菌Ti质粒的TDNN区段结构示意图。农杆菌附着植物细胞后，T-DNA首先在农杆菌中从右边界到
左边界被剪切、复制，然后进入植物细胞并整合到染色体上，继而诱犮细胞异常生长和分裂，形成植物肿瘤，以下有关叙述正确的是（）A．Ti质
粒存在于农杆菌的拟核DNA处B．植物肿瘤的形成与A、B两个基因的表达有关C．清除植物肿瘤组织中的农杆菌后肿瘤不再生长D．利用T-D
NA进行转基因时需要保留LB、RB序列2．下列有关说法，正确的是A．PCR所用的引物能与DNA单链进行碱基互补配对B．基因表达载
体是指能表达标记基因的结构C．植物体细胞杂交前要用聚乙二醇去除细胞膜D．利用胚胎细胞核移植的方法可获得克隆动物3．据报道，研究人员
将口蹄疫病毒结构蛋白VP1的某一活性肽基因片段导人胡萝卜愈伤组织细胞培育转基因胡萝卜，用于生产可直接口服的口蹄疫疫苗。相关叙述正确
的是A．胡萝卜愈伤组织细胞可利用胡萝卜体细胞诱导脱分化获得B．可将活性肽基因片段直接导人胡萝卜愈伤组织细胞C．可利用PCR、DNA
分子杂交等技术鉴定目的片段是否已整合到胡萝卜染色体中D．转基因是否成功需要对愈伤组织再分化形成的植株进行活性肽含量测定4．若某种限
制性核酸内切酶的识别序列是CCTAGG，它在C和G之间切断线性DNA。下图表示用该酶处理某基因后产生的片段。下列有关叙述正确的是A
．该正常基因中有3个CCTAGG序列B．产生的DNA片段可用DNA聚合酶连接起来C．用该酶处理得到图示基因片段要水解3个磷酸二酯键
D．若该基因某处有一个CCTACG突变为CCTAGG，用该酶处理后将产生5个片段5．科研人员先分别PCR扩增尿酸酶基因和原核生物胞
外蛋白信号肽基因(编码的肽链能引导新合成的蛋白质转移、分泌)，再将它们拼接形成融合基因，并导入大肠杆菌生产尿酸酶。相关叙述正确的是
A．两个基因拼接时需考虑两者的拼接方向和次序B．融合基因可共用一个启动子和终止子C．在导入融合基因前，应先用NaCl处理大肠杆菌，
使其变为感受态细胞D．该技术成功的标志是无需裂解大肠杆菌，在其培养液中就能收获尿酸酶二、综合题6．近日，患罕见重症“视神经脊髓炎谱
系疾病”10年、双目相继失明的20岁女孩小易，在中南大学湘雅医院首次采用基因工程重组“蛋白A免疫吸附柱”进行救治并获得成功，她右眼
得以重见光明，并于日前康复出院。请回答下列有关基因工程的问题：（1）金黄色葡萄球菌蛋白A能够特异性地与多种哺乳动物的抗体结合，但金
黄色葡萄球菌为致病菌，因此，通过规模化培养金黄色葡萄球菌的方法来获取蛋白A有一定风险，需要进行基因工程操作来解决上述问题：将___
_______基因插入到基因工程最常用的运载替____________中，需要用到的工具酶有____________。此过程属于基
因工程操作四步曲的第_____________步，即_____________。（2）经过上述操作后，选用大肠杆菌作为表达宿主菌，
使其大量表达蛋白A并制成基因工程重组“蛋白A免疫吸附柱”。重组质粒能够整合到大肠杆菌的核DNA上，原因是_____________
____。检测目的基因是否转录出了mRNA所用的技术名称为______________。（3）将_____________类疾病患
者的血浆输入吸附柱，让吸附柱上的基因工程重组葡萄球菌蛋白A分子，快速“抓住”并清除患者血浆中的致病性抗体，再让净化后的血液回输到人
体内，如此循环往复，持续清除血液中的致病物质，从而达到救治目的。7．“玉米夫人”芭芭拉·麦克林托克在玉米杂交实验中发现，使籽粒着色
的基因在某一代“接上”或“拉断”，又在另一代的染色体上重新出现，科学界把这种基因称之为“跳跃基因”。“跳跃基因”是指能够进行自我复
制，并能在生物染色体间移动的基因。回答下列问题：(1)在基因工程中一般常用的运载体是____________________(至少
答出两种)。而跳跃基因技术能够更有效地使引入动物细胞的基因进行稳定表达，为使跳跃基因在特定的时间和空间表达，构建的表达载体中需要有
合适的______________________。(2)进行PCR扩增，在反应体系加热到90～95℃时，跳跃基因双链间的____
______打开；在退火的过程中需要一段______________________以便合成引物；延伸的过程中在_________
___酶的作用下形成________________键。(3)HIV中含有这类跳跃基因，能将其复制并插入T细胞染色体上，使T细胞产
生更多病毒颗粒，推测此过程可能涉及到的酶有________________(至少答出两种)。在进化过程中，许多动物形成了减少HIV
跳跃基因移动的生理功能系统，这样的系统可以看成动物______________的一部分。8．科研人员利用转基因技术将乙烯形成酶（E
FE)反义基因导入番茄中获得耐储存番茄。（1）科研人员将EFE反义基因与T——DNA构建重组质粒，将番茄的愈伤组织侵入含有上述重组
质粒的_________菌液中，通过该菌的作用使EFE反义基因进入番茄细胞并插入到细胞的上。（2）将上述愈伤组织细胞进行即
可诱导得到试管苗，该过程体现了植物细胞具有。（3）为检测耐储存番茄中EFE反义基因是否转录处mRNA，首先要从该番茄中提取mRN
A，然后将放射性同位素等标记的作为探针，根据是否形成进而判断EFE反义基因是否转录出mRNA，从个体生物学水平上鉴定，耐储存番
茄产生的（激素）比正常的番茄少。9．许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因，其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下
，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过
程如下图。请据图回答：（1）基因工程中，构建基因表达载体的目的是。（2）限制酶EcoRⅠ的识别序列和切点是—G↓AATTC—，S
maⅠ的识别序列和切点是—CCC↓GGG—。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列
是，连接过程中需要的基本工具是。（3）转化过程中，大肠杆菌应先用处理，使其处于能吸收周围DNA的状态。（4）菌落的颜色为白色
的是，原因是。（5）菌落③中的目的基因是否能表达，可采用的检测办法是。10．下图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，
结合所学知识及相关信息回答下列问题：（1）图中cDNA文库基因组文库（填“大于”、“等于”或者“小于”）。（2）①过程提取的DN
A需要酶，B过程是。（3）为在短时间内大量获得目的基因，可用扩增的方法，其原理是。（4）目的基因获取之后，需要进行，其组
成必须有以及标记基因等，此步骤是基因工程的核心。（5）将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是，其能否在此植物体内稳定
遗传的关键是，可以用技术进行检测。11．将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下
是与植物疫苗制备过程相关的图和表。请根据以上图表回答下列问题。（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不
同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是。（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根
据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？__________。（3）图1步骤
③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？。（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通
常为。（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_________种DNA片断。②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到_________种DNA片断。本卷由系统自动生成，请仔细校对后使用，答案仅供参考。本卷由系统自动生成，请仔细校对后使用，答案仅供参考。答案第1页，总2页答案第1页，总2页 |
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