结果解释----慢生长NTM药敏板抗生素鸟分枝杆菌复合群判读标准(ug/mL)(参考CLSIM62Table3)堪萨斯分枝 杆菌判读标准(ug/mL)(参考CLSIM62Table4)其余的慢生长分枝杆菌判读标准(ug/mL)(参考CLS IM62Table5)抗生素缩写SIRSIR提示海分枝杆菌耐药MIC(ug/mL)利福平RIF待 定≤1≥2≤1≥2异烟肼INH待定待定待定链霉素STR待定待定待定乙胺丁醇EMB待定待定待定 莫西沙星MXF≤12≥4≤12≥4≤12≥4利福布汀RFB待定≤2-≥4≤2-≥4阿米卡 星(IV)AMI≤1632≥64≤1632≥64≤1632≥64阿米卡星(liposomal,inhaled )AMI≤64≥128≤1632≥64≤1632≥64乙硫异酰胺ETH待定待定待定环丙沙星CIP 待定≤12≥4≤12≥4克拉霉素CLA≤816≥32≤816≥32≤816≥32强力霉素(多 西环素)DOX待定≤12-4≥8≤12-4≥8甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲恶唑SXT待定≤2/38-≥4/76 ≤2/38-≥4/76利奈唑胺LZD≤816≥32≤816≥32≤816≥32结果解释---结核分枝 杆菌抗结核药临界浓度(ug/mL)较高浓度(ug/mL)缩写中文名INH异烟肼0.21RIF利福平1/ EMB乙胺丁醇510AMI阿米卡星4/ETH乙硫异烟胺5/KAN卡那霉素5/MXF莫西沙星 0.5/OFL氧氟沙星2/PAS对氨基水杨酸2/RFB利福布汀0.5/STR链霉素210CY C环丝氨酸25/说明:如果测试菌株对INH,EMB和STR临界浓度为耐药时,需增对推荐的较高浓度进行药敏判定。质 控标准—结核分枝杆菌NTM质控范围谢谢!。ThermoFisherScientific分支杆菌 药敏检测细节介绍目录分枝杆菌药敏MIC板条介绍---结核分枝杆菌药敏板---速生长分枝杆菌药敏板--- 慢生长分枝杆菌药敏板板条操作流程与注意细节结果判读与解释报告结核与非结核分枝杆菌药敏检测结核分枝杆菌MIC药敏板条快速生 长分枝杆菌MIC药敏板慢生长分枝杆菌MIC药敏板结核与非结核分枝杆菌MIC药敏检测名称药敏检测对象特点结核分枝杆菌 MIC药敏板结核分枝杆菌4种一线药,8种二线药每种药各有7-8个浓度最快10天就能出结果慢速生长分枝杆菌MIC药敏板 缓慢生长的非结核分枝杆菌13种药每种药各有7-8个浓度7-14天出结果快速生长分枝杆菌MIC药敏板快速生长的分枝杆菌、 诺卡氏菌、需氧放线菌15种药每种药各有7-8个浓度2-5天出结果Sensititre结核分枝杆菌MIC药敏检测板(MYCO TBI)包括一线和二线药物(12种)一线药物链霉素,异烟肼,乙胺丁醇,利福平二线药物氧氟沙星,莫西沙星,阿米卡星,利 福布汀,对氨基水杨酸,乙硫异烟胺,环丝氨酸,卡那霉素真实的MIC检测Sensititre结核分枝杆菌MIC药敏检测 板(MYCOTBI)OFLMXFRIFAMISTRRFBPASETHCYCINHKANEMB3281 6163216644025644032OFLMXFRIFAMISTRRFBPASETHCYC INHKANEMB16488168322012822016OFLMXFRIFAMISTRR FBPASETHCYCINHKANEMB8244841610641108OFLMXFRI FAMISTRRFBPASETHCYCINHKANEMB41224285320.554 OFLMXFRIFAMISTRRFBPASETHCYCINHKANEMB20.5112142 .5160.252.52OFLMXFRIFAMISTRRFBPASETHCYCINHKANEMB 10.250.50.510.521.280.121.21OFLMXFRIFAMISTRRFBP ASETHCYCINHKANEMB0.50.120.250.250.50.2510.640.060 .60.5OFLMXFRIFAMISTRRFBPASETHCYCINHPOSPOS0.250.06 0.120.120.250.120.50.320.03CONCON抗生素OFL氧氟沙星MXF莫西沙星 RIF利福平AMI阿米卡星STR链霉素RFB利福布汀PAS对氨基水杨酸ETH乙硫异烟胺CYC环丝氨酸I NH异烟肼KAN卡那霉素POS阳性对照EMB乙胺丁醇快速生长分枝杆菌的MIC药敏测试RAPMYCO:适用于偶 发分枝杆菌群(偶发分枝杆菌、外来分枝杆菌和偶发分枝杆菌第三生物变种)、龟分枝杆菌、脓肿分支杆菌、产粘液分枝杆菌和耻垢分枝杆菌群(耻 垢分枝杆菌、顾德分支杆菌和沃林斯基分枝杆菌)、诺卡氏菌属和其它有氧放线菌药敏检测生长时间≤7天Amikacin阿米卡星1- 64Amoxicillin/clavulanicacid阿莫西林/克拉维酸2/1-64/32Cefepime头孢吡 肟1-32Cefoxitin头孢西丁4-128Ceftriaxone头孢曲松4-64Ciprofloxacin环 丙沙星0.12-4Clarithromycin克拉霉素0.03-16Doxycycline强力霉素0.12-16I mipenem亚胺培南2-64Linezolid利奈唑胺1-32Minocycline米诺环素1-8Moxifl oxacin莫西沙星0.25-8Tigecycline替加环素0.015-4Tobramycin妥布霉素1-16 Trimethoprim/sulfamethoxazole甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲恶唑0.25/4.75-8/152快速生长 的分枝杆菌MIC药敏板15种抗生素,适用于快生长分枝杆菌、诺卡氏菌、需氧放线菌,如M.fortuitumgroup偶然 分枝杆菌群M.chelonae/abscessusgroup龟/脓肿分枝杆菌群M.smegmatisgroup 耻垢分枝杆菌群Amikacin阿米卡星1-64Ciprofloxacin环丙沙星0.12-16Clarithr omycin克拉霉素0.06-64Doxycycline强力霉素0.12-16Ethambutol乙胺丁醇 0.5-16Ethionamide乙硫异烟胺0.3-20Isoniazid异烟井0.25-8Linezolid 利奈唑胺1-64Moxifloxacin莫西沙星0.12-8Rifampin利福布汀0.12-8Rif abutin利福平0.25-8Streptomycin链霉素0.5-64Trimethoprim/sul famethoxazole甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲恶唑0.12/2.38-8/152缓慢生长分枝杆菌MIC药敏板13种抗生 素,适用于慢生长分枝杆菌,如M.marinum海洋分枝杆菌M.kansasii堪萨斯分枝杆菌M.avium complex(MAC)鸟分枝杆菌复合群Sensititre分枝杆菌药敏分析系统Viewer手工判读系统Vizion 自动微生物药敏分析系统结核分枝杆菌药敏MIC测试带玻璃珠的吐温盐水1、配置菌悬液(固体培养基上培养的菌株):0.5 McFarland2、漩涡震荡器混悬1-2分钟3、取100uL到肉汤中。肉汤(Middlebrook 7H9withOADC)1、混匀1-2分钟2、药敏板每孔加入100uL菌液3、封膜 4、35-370C孵育10天,观察结果;如有必要再次孵育11天。注意事项选取的结核分枝杆菌落菌龄不能超过5周。菌悬液要 充分静置后才能进行浊度测试。可选取两支盐水管,一只配制较高浓度菌悬液后,充分静置后取上部悬液于另一盐水管配制菌悬液。为保证板卡封 膜效果,可在板卡四周使用透明胶带加固封膜效果接种剩余的菌悬液需接种到血平板上进行培养,以排除污染存在。定期应进行阳性对照孔中接 种物菌液浓度检查板卡堆叠不能超过2块。快分枝MIC药敏测试操作无菌去离子水1、配置菌悬液(固体培养基上培养的菌株) :0.5McFarland2、充分漩涡震荡3、取50uL到肉汤中。肉汤(Mueller–Hinto nwithTES)1、混匀1-2分钟2、药敏板每孔加入100uL菌液3、封膜4、培 养:快速生长型分枝杆菌---在非CO2培养箱----30℃----72小时(如生长不佳,则继续培养4 8h后看结果)诺卡氏菌,有氧放线菌---在非CO2培养箱----35°C----2~3天 无菌去离子水1、配置菌悬液(固体培养基上培养的菌株):0.5McFarland2、充分漩涡震荡 3、取50uL到肉汤中。肉汤(Mueller–Hintonwith5%v/vOADC)1、混匀 1-2分钟2、药敏板每孔加入100uL菌液3、封膜4、非CO2孵箱,35℃下培养7天后开始读取 结果,如果阳性对照生长情况良好,读取结果。否则,重新培养最多14天。慢分枝MIC药敏检测注意事项放线菌通常为 具有坚硬外壳的菌落。可能有必要与玻璃珠一起进行涡旋振荡,以获取均一悬液。如果涡旋震荡后依然残存大的团块,应当使其沉降,并取上清配制 悬液。如使用含有吐温的水可能会对MIC造成影响。含有≥32μg/ml多西环素或米诺环素的药敏板孔位可能会在培养后出现沉 淀。可以在添加肉汤前加入5μl无菌蒸馏水进行复溶,避免沉淀出现。CLSI建议将无色素、快速生长型分枝杆菌培养14天,确 保可以检测出诱导的大环内酯类抗生素耐药性,除非在较早阶段已表现出此种耐药性。定期应进行阳性对照孔中接种物菌液浓度检查板卡堆叠不 能超过3块注意事项延长培养时间可能需要采取相应措施以避免每个微孔内容物因挥发而造成损失。将平板置于顶部半开的塑料容器中,以促进 气体交换。结果判读判读时应首先读取阳性生长对照孔。如果在阳性生长对照孔中未出现生长,则结果无效。在判读结核分枝杆菌异烟肼 ,利福平,莫西沙星,氧氟沙星,环丝氨酸,阿米卡星和卡那霉素药敏结果时,其MIC值时为该抗生素生长明显抑制,完全无生长迹象的最低抗生 素浓度。而在判读链霉素,乙硫异烟胺,对氨基水杨酸,利福布汀和乙胺丁醇时,其MIC值为该抗生素生长受到约80%抑制的最低抗生素浓度。 在判读非结核分枝杆菌药敏结果时,除磺胺类药物之外,MIC值是指完全抑制生长的最小浓度,而磺胺类药物MIC值是能够抑制80%生长的 最低浓度。利奈唑胺可能会出现拖尾生长,其最低抑菌浓度为开始拖尾的第一个浓度。结果的判读阳性对照孔至少是2+才能开始记录MIC值 疑问如果检测菌株阳性对照孔超过最大孵育天数(快分枝5天,结核,慢分枝21天)而不能生长,该如何处理?如果无法生长,应报告不 能在可接受的时间内生长和/或重复测试或采用其他方法。个别脓肿分枝杆菌复合群分离株在肉汤中生长非常缓慢,对于这些分离培养株培养长 达14天是必须的,但是,由于抗菌药物的不稳定性,这种情况只有克拉霉素和阿米卡星可以报告结果,且需要添加相应的注释。(来源于行业领域 内专家的说明)快分枝和奴卡复方新诺明应读取80%抑制利奈唑胺的拖尾生长结核分枝杆菌图中的1、2、3列为100% 抑制图示,5,6,7列为80%抑制图示跳孔造成跳孔可能的原因:菌液不均匀,检测板叠放过多导致的温度不均匀,一些难生长菌生 长不良容易导致跳孔(耐药菌)结果解释----快速生长NTM药敏板抗生素速生型分枝杆菌复合群判读标准(ug/mL)(参考C LSIM24Table7)诺卡菌和其他需氧放线菌判读标准(ug/mL)(参考CLSIM24Table9) 名称缩写SIRSIR莫西沙星MXF≤12≥4≤12≥4阿米卡星AMI≤1632≥64≤8 --≥16阿莫西林/克拉维酸AUG2待定≤8/416/8≥32/16头孢吡肟FEP待定≤816≥32 头孢西丁FOX≤1632-64≥128待定头孢曲松AXO待定≤816-32≥64环丙沙星CIP≤12≥4≤12≥4克拉霉素CLA≤24≥8≤24≥8强力霉素(多西环素)DOX≤12-4≥8≤12-4≥8亚胺培南IMI≤48-16≥32≤48≥16利奈唑胺LZD≤816≥32≤8----米诺环素MIN待定≤12-4≥8替加环素TGC待定待定妥布霉素TOB≤24≥8≤48≥16甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲恶唑SXT≤2/38——≥4/76≤2/38--≥4/76结果解释----M.kansasii结果解释----MAC结果解释----除MAC和M.kansasii之外的慢分枝。 |
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