分子生物学实验室常用试剂配方：医药观察之我见2.常用试剂配方（PrescriptionsofOrdinaryReagents）（高媛
）.217(1)PBS217(2)胰酶Trypin217(3)Tris-NH4Cl217(4)Runningbu
ffer218(5)Washingbuffer218(6)湿转液218(7)LB培养基218(8)LB培养板
218PBS:PBS是磷酸缓冲盐溶液（phosphatebuffersaline）一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用。主要成
分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广；而NaC
l和KCl主要作用为增加盐离子浓度。配置方法：NaCl:320g优级纯Na2HPO4.12H2
O61.44gKCl8gKH2PO48g三蒸水4L烧杯溶解后用HCl调PH为7.2-7.4，
细胞用需要高温灭菌，放于超净台冷却，贴上封口膜及标签。胰酶：Trypsin一种胰蛋白酶，通过在特定位置上降解蛋白，使细胞膜上和培
养皿壁结合处蛋白降解，使两者分离。细胞消化胰酶常用工作浓度为0.25%，PH为7.2-7.4，储存液放在-20冻存，使用液放在4度
。配置方法：5L体系4L体系3L体系NaCl40g3224KCl1.0g0.80.6KH2PO41.0g0.80.6NaHPO4
12H2O7.93g0.3444.758EDTA2Na12.735g10.1887.425Trypsin7.5g64.5溶解
调PH7.2-7.4(HCl或NaOH调)，过滤，-20保存，4度使用。Tris-NH4Cl:红细胞裂解液，是一种从人，
鼠及其他哺乳动物等体内烦人组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，应用低渗的原理，改变红细胞渗透压，使得红细胞胀大破裂。配置方
法：2L体系：NH4Cl:14.94g溶于1800mLddH2O混匀HCl调节PH为7.2-7.4过滤Tris
:5.15g溶于200mLddH2O3L体系NH4Cl:22.41g溶于2700mLddH2O混匀H
Cl调节PH为7.2-7.4过滤Tris:7.725g溶于300mLddH2ORunningbuffer:
4L（5X）Tris:60.6gGly:288.3gSDS:20gddH
2O3.78LWashingbuffer:4L(10X)Tris:48.6gNaCl:116.9g
Tween20:40mLddH2O:3.9L湿转液：4L(10X)Tris:121.4
gGly:576.6gddH2O3.57LLB液体培养基：名字来源于英语lysogenybr
oth即溶菌肉汤，应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。配置方法：Tryptone(胰蛋白胨)10g/LYeast(酵母
)5g/L溶解定容，分瓶，不拧紧灭菌（A1程序）NaCl10g/L封口膜封口，4度冷
却使用LB固体培养基：Tryptone(胰蛋白胨)2g/200mLYeast(酵母)1g/200mLNaCl
2g/200mLAgar(琼脂)3g/200mL于锥形瓶中溶解，定容，高压灭菌（A1），紫外照射
，约室温时加入氨苄和卡那霉素（1000X），均匀涂抹于平板，紫外照射凝固，封口膜封口，注明日期及抗生素抗性，放于4度保存。 |
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