配色: 字号:
蛋白条带IOD值测量
2021-05-24 | 阅:  转:  |  分享 
  
相关介绍:
Gray:betweenwhiteandblack
1.1光密度与灰度—迷惑人的不同概念
Example:
1.Thebrightvalueondisplayscreenis
grayvalue.
?光密度:吸收光的物质的光学密度。(optical
density,就是常说的OD值)光密度值是直接与
2.Thedarkvalueonawhitepaperis
alsothegrayvalue.
染色物质的量相关的。
?灰度:灰是不够黑,是反射亮度的单位。电子
照片上像素的亮度称为灰度。
255


用OD值是正确的
OpticalDensity:
吸光物质的光学密度.
?分光光度计与酶标仪的测定值是OD值
?被测物质的量越多,光密度(OD值)越高,透射出的光越少,反
?透射的显微镜图象上的光强度要用OD值
映在照片上就越黑。
?蛋白电泳条带的测量也是OD值。
?OD值与物质的量直接相关,数字图象上点的灰度值与对应物
质OD值成对数关系,符合朗伯-比尔定律。
?萤光显微镜及萤光分光光度计的测量值是萤光强度
?理论上OD值是从零到无穷大。实际应用中,OD值的范围常用
(Fluorescenceintensity)
0-2.0或者0-3.0。
?用EB染色的DNA凝胶电泳条带也是萤光强度,但处
理方法与光密度相同,故也用OD值。这个OD与前面
的OD又有不同的意义。它就是荧光的光密度。反映
着荧光物质的多少。


用标准样品才能把OD值1.2定量分析的指标:
IOD(Integratedoptiondensity)
与样品量关联到一起
与MeanDensity
?OD值是一个没有单位的相对值。
?使用酶标仪或分光光度计时要作标准曲线。
?将图片上各点的光密度值累加起来,得到
对电泳条带进行定量分析时一样要作标准曲
IOD。此值与目标物质的总量成正比。
线。
?IOD值除以有效目标分布区域的面积,得到
?电泳条带照片的灰度值与样品量的关系为指
Meandensity,此值反映了目标物质的单位面
数函数。在把灰度值转换成OD值时,用一
积浓度。对样品照片进行数字图像分析比较
个标准点进行定量分析是不准确的。多个标
时,就是比较它们之间的平均光密度值的大
准点的标准曲线亦有很大误差,因此只能说
小。
是半定量分析。


10
献花(0)
+1
(本文系TRYTRYTRY3首藏)