相关介绍: Gray:betweenwhiteandblack 1.1光密度与灰度—迷惑人的不同概念 Example: 1.Thebrightvalueondisplayscreenis grayvalue. ?光密度:吸收光的物质的光学密度。(optical density,就是常说的OD值)光密度值是直接与 2.Thedarkvalueonawhitepaperis alsothegrayvalue. 染色物质的量相关的。 ?灰度:灰是不够黑,是反射亮度的单位。电子 照片上像素的亮度称为灰度。 255
用OD值是正确的 OpticalDensity: 吸光物质的光学密度. ?分光光度计与酶标仪的测定值是OD值 ?被测物质的量越多,光密度(OD值)越高,透射出的光越少,反 ?透射的显微镜图象上的光强度要用OD值 映在照片上就越黑。 ?蛋白电泳条带的测量也是OD值。 ?OD值与物质的量直接相关,数字图象上点的灰度值与对应物 质OD值成对数关系,符合朗伯-比尔定律。 ?萤光显微镜及萤光分光光度计的测量值是萤光强度 ?理论上OD值是从零到无穷大。实际应用中,OD值的范围常用 (Fluorescenceintensity) 0-2.0或者0-3.0。 ?用EB染色的DNA凝胶电泳条带也是萤光强度,但处 理方法与光密度相同,故也用OD值。这个OD与前面 的OD又有不同的意义。它就是荧光的光密度。反映 着荧光物质的多少。
用标准样品才能把OD值1.2定量分析的指标: IOD(Integratedoptiondensity) 与样品量关联到一起 与MeanDensity ?OD值是一个没有单位的相对值。 ?使用酶标仪或分光光度计时要作标准曲线。 ?将图片上各点的光密度值累加起来,得到 对电泳条带进行定量分析时一样要作标准曲 IOD。此值与目标物质的总量成正比。 线。 ?IOD值除以有效目标分布区域的面积,得到 ?电泳条带照片的灰度值与样品量的关系为指 Meandensity,此值反映了目标物质的单位面 数函数。在把灰度值转换成OD值时,用一 积浓度。对样品照片进行数字图像分析比较 个标准点进行定量分析是不准确的。多个标 时,就是比较它们之间的平均光密度值的大 准点的标准曲线亦有很大误差,因此只能说 小。 是半定量分析。
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