2、微生物计数方法1、稀释涂布法：2、血细胞计数板计数：3、比浊法（光电比色法）：一般偏小？一般偏大？误差较大？死细胞染色法：
台盼蓝染色剂活细胞染色法：美蓝空白对照（调零）、润洗、除杂色、去杂质、合适的波长。。。转化到底是如何发生的？（以肺炎双球菌
为例）转化：细菌细胞摄取周围游离的外源DNA片段，通过同源区段的交换而实现基因重组的过程。3、微生物转化①当“转化因子”遇
到处于感受态的R型肺炎双球菌时，就有S型菌DNA片段被R型肺炎双球菌细胞膜表面的“感受态因子”位点结合。②在位点上进一步发
生酶促分解，形成平均分子量为4-5×106的DNA片段，然后双链拆开，其中一条降解，另一条单链逐步进入细胞。③进入细胞的单
链DNA片段与R型肺炎双球菌DNA的同源区段配对，并使受体DNA的相应单链片段被切除，从而将其替换，于是形成一个杂种DNA区段（它
们间不一定互补，故可呈杂合状态）。④随着R型肺炎双球菌的分裂生殖，DNA进行复制，杂合区段分离成两个，其中之一类似供体菌（
S型肺炎双球菌），另一类似受体菌（R型肺炎双球菌）。当细胞分裂后，此DNA发生分离，于是就由R型肺炎双球菌产生出了S型肺炎双球菌的
后代。这个过程称为原核生物的转化，其实质是基因重组。注意：因为R型与S型的DNA可以同源区段配对，形成杂合细菌，通过分裂生
殖形成R型和S型两种后代，不是R型直接变成S型。4、其他的思考为什么血细胞计数板计数要摇匀，而涂布法计数却尽量取悬液？哪
些材料要进行G6玻璃砂漏斗过滤灭菌？细菌等单细胞生物有没有基因选择性表达？诱导酶：是在环境中有诱导物存在的情况下，诱导生成的
酶。例如，将能合成α-淀粉酶的菌种培养在不含淀粉的葡萄糖溶液中，它就不产生α-淀粉酶；在含淀粉的培养基中，它就会产生活性很高的α-
淀粉酶。淀粉α-淀粉酶糊精Β-淀粉酶葡萄糖糖化淀粉酶麦芽糖遇碘显蓝色遇碘显红色遇碘不显色二、酶的应用相关知识
拓展1、淀粉酶的种类与作用淀粉分子链每一圈（6个）可容纳一个I2，与羟基上的氧发生显色反应，产生蓝色需要6圈（36个）葡萄糖残
基。淀粉α-淀粉酶糊精、葡萄糖、麦芽糖Β-淀粉酶葡萄糖糖化淀粉酶麦芽糖α-淀粉酶随机切断α-1，4-糖苷键。Β-
淀粉酶从非还原端开始切断α-1，4-糖苷键，依次切下麦芽糖单位。糖化酶可以从非还原端切断α-1，4-糖苷键，也可以切断α-1，6
-糖苷键问题：淀粉酶能否催化糖原？淀粉酶能否催化纤维素？二、酶的应用相关知识拓展2、亲和层析（洗脱液）凝胶层析？离
子交换？三、食品加工应用相关拓展1、OD值、吸光率与浑浊度OD值（光密度值）：OD值是某一波长下（一般为最大吸收峰），被测物
质的吸光率。OD＝1g（1／trans），其中trans为检测物的透光值。OD值与入射光的波长、通过物质的种类（吸光系数）、浓度、
光程等有关。标准曲线：不同浓度某物质（相同波长下）的OD值连线吸光率：即OD值。但更强调被测物质对某一波长光的吸收。吸收光谱
：不同波长下，某物质的吸光率浑浊度：指水中颗粒物造成水体（溶液）浑浊的情况。有透射式、散射式及散射-透射式测定法。其中，透射式
测定原理与OD值测定一致。1、样品处理过程中，硫酸锌溶液的作用是什么？2、加硫酸锌产生沉淀后，为什么要水浴加热？3、测
定来硝酸盐过程中，氯化铵和乙酸的作用是什么？4、甘露醇有哪些作用？答：与氢氧化钠反应，产生氢氧化锌沉淀，吸附杂质，包括使蛋
白质沉淀。答：更有利于让杂质沉淀。答：重氮化反应要在酸性条件下进行。氯化铵和乙酸会形成醋酸铵-醋酸缓冲溶液，维持弱酸性2、其
他问题的思考答：甘露醇：C6H14O6（已糖）四、基因工程1、Ti质粒与T-DNA◆Ti质粒是一种细菌质粒，它自然存在于
土壤农杆菌细胞中。土壤农杆菌可感染大多数双子叶植物的受伤部位，使之产生冠瘿瘤(growngalltumors)。◆Ti质
粒。Ti质粒的一部分DNA叫做转移DNA（T-DNA），当T-DNA整合到宿主植物细胞的染色体后，就诱导出根瘤，并使根瘤细胞合成
冠瘿碱(opine),作为土壤农杆菌的碳源和氮源。（1）T-DNA区（transferred-DNAregions）T-
DNA是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上导入植物细胞的一段DNA。T-DNA两端各有一段25bp的重复序列(LB,RB)
。T-DNA携带的致瘤基因是一些与激素合成有关的基因，由于激素合成基因使细胞处于不停的分裂状态，形成冠瘿瘤，不能进行细胞分化。
Ti质粒改造后才能应用于植物的基因工程。保留T-DNA两端的末端序列，然后用外源DNA插入或直接取代野生型T-DNA的部分基因
，使转化的植物细胞不具有成瘤能力。（2）Vir区（virolenceregion）Vir区段上的基因与T-DNA从细菌转移到
植物细胞的遗传过程有关，区段上的基因能够使农杆菌表现出毒性，故称之为毒性区。（3）Con区(regionsencodingc
onjugations)该区段上存在着与细菌间接合转移的有关基因（tra），调控Ti质粒在农杆菌之间的转移。（4）Ori区
(originofreplication)该区段基因调控Ti质粒的自我复制，故称之为复制起始区。抗生素：杀死和抑制细菌的
化学物质抗生素：杀死和抑制细菌的化学物质【注意】超链接生物选修复习的一些思考与拓展路桥中学：江峰
2018.32（一）回答与微生物培养及应用有关的问题：（l）对培养基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从_____________
___时开始计时。对于不耐热的液体培养基，一般可将其转入G6玻璃砂漏斗中，采用______方式可较快地进行过滤灭菌。（2）与酿造
果醋相比，利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋，需增加____________的过程。某醋化醋杆菌培养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇
组成，其中甘露醇的主要作用是______。达到设定的温度或压力值抽滤甘露醇分子式：C6H14O6将淀粉分解成糖作为碳
源2020.29（4）与发芽培养基相比，配制转基因丛状苗生根培养基时，可根据实际情况适当添加________，促进从状苗基部细胞
分裂形成愈伤组织并进一步分化形成根________，最终形成根。还可通过改变MS培养基促进生根，如___（A．提高蔗糖浓度B．降低
培养基浓度C．提高大量元素浓度D．不添加琼脂）。凝胶层析：纸层析：亲和层析：亲和层析：通过将具有亲和力的两个分子中的一个固
定在不溶性的基质（也称载体）上，利用分子间亲和力的特异性和可逆性，对另一个分子进行分离纯化。被固定在基质上的分子称为配体，配体与
基质共价结合，构成亲和层析的固定相，称为亲和吸附剂。在淀粉酶的固定化实验中，基质：石英砂；配体：淀粉酶；洗脱液成分：糊精打基
础、明道理、多联系、重操作、我们学校选修复习的一些做法：一、微生物相关知识拓展1）.阻碍细菌细胞壁的合成（繁殖期杀菌剂
）：青霉素类、先锋霉素和头孢菌素类2）.破坏细菌的细胞膜（使碱基与氨基酸等漏出）：多黏菌素3）.抑制蛋白质的合成（与细菌核糖
体或tRNA、mRNA相互作用）：四环素、卡那霉素4）.作用于能量代谢系统：如抗霉素A：呼吸电子传递链的抑制剂1、抗生素的作
用机理5）.干扰核酸合成：博来霉素与DNA结合，干扰DNA合成6）.最近发现部分抗生素对癌细胞的代谢与凋亡也有一定的影响。如：
阿霉素可抑制RNA和DNA的合成，对RNA的抑制作用最强。对多种肿瘤均有作用。可诱导肿瘤细胞的凋亡7）.抗生素对病毒无明显疗效。而抗病毒药物常用：病毒唑、干扰素、盐酸多金刚乙胺等1、抗生素的作用机理2、微生物计数方法1）、稀释涂布法：2）、血细胞计数板计数：3）、比浊法（光电比色法）：一般偏小？抗生素：杀死和抑制细菌的化学物质抗生素：杀死和抑制细菌的化学物质【注意】超链接 |
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