秉承中科，专“新”致“质”（始于 2004 年）中药成分分析（包含体内成分分析）——样本准备要求与建议
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目录药物样本............................................................................................................................. 21. 基本要求:.......................................................................................................................22. 样本量与准备要求：...................................................................................................23. 样本寄送：....................................................................................................................3生物样本(体内成分分析)................................................................................................. 41. 基本要求:.......................................................................................................................4
2. 样本设置建议：........................................................................................................... 43. 样品量要求：............................................................................................................... 44. 样本保存和寄送要求：...............................................................................................5【注意事项】.....................................................................................................................6附录......................................................................................................................................7血液样本制备方法（仅供参考）................................................................................... 71. 血浆样本的制备：.......................................................................................................7
2. 血清样本的制备：.......................................................................................................83. 动物组织样本的制备：...............................................................................................8
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药物样本1. 基本要求:1）成分分析：常见样本形式或剂型均可进行检测，中科已具有检测经验的剂型包括：冻干粉、散剂、提取液、药材/饮片粉末、胶囊、配方颗粒、注射剂、发酵液等。样本剂型的选择与实验目的保 持 一 致 ；2）体内成分分析：药 物 剂 型 与 状 态 需 与 药 理 实 验 的 保 持 一 致 ， 即 同 一批 次 药 物 分 一 份 进 行 成 分 分 析 ， 一 份 进 行 动 物 给 药 ；
3）样本信息提供：提供样本制备信息（如提取方式，醇提、水提等）。如制剂中含有辅料（甘油、PEG、泊洛沙姆等）需提前与我司沟通，以便我司根据样本状态对应进行后续样本处理；4） 若 无 法 达 到 最 低 送 样 量 ， 可 能 会 影 响 结 果 ， 请 务 必 提 前 与 我 司 对 接人 沟 通 确 认 并 在 电 子 送 样 表 中 写 明 情 况 ；2. 样本量与准备要求：
样本类型 最低送样量/样 准备要求冻干粉 2g ①保存条件：装入自封袋中，放入干燥器中保存；②保存期限：半年，建议制备后尽快送样；复方/单味药材/饮片（提取液） 20mL ①最低送样量以相当于 10g 饮片投料量计算；②保存条件：建 议 提 取 液 制 备 后 ，置 离 心 管 ，-20℃ 冷 冻 保 存 ；③保存期限：半年，建议制备后尽快送样；④ 样 本 不 可 装 的 太 满 ， 一 般 不 超 过 离 心 管的 2/3，因 结 冰 后 会 把 盖 子 顶 开 导 致 样 本 泄露 和 污 染 。并用封口膜封好；
药材/饮片（粉末） 5g ①自行打粉，过三号筛；②保存条件：参照药典（通风干燥处、防蛀防霉）；③保存期限：半年，建议制备后尽快送样；胶囊、配方颗粒 5g ①直接提供胶囊里的颗粒或粉末即可；
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②不接受软胶囊样本；散剂 5g 参照药品说明书进行保存片剂 咨询 ①不同剂型的片剂载药量不同，请咨询我司；②参照药品说明书进行保存；注射剂 20mL ①参照药品说明书进行保存；②最好有关注的物质；标准品 1mL ①请将配置好的标准品邮寄到我司；②溶剂：甲醇、水、不同比例的甲醇水（70%甲醇水、50%甲醇水、10%甲醇水等）均可；③浓度：1mg/mL；
其他 无法达到上述建议要求或其他类型样本，请另外咨询；3. 样本寄送：建议采用顺丰快递，样品置于泡沫盒，并用干冰覆盖，干冰使用量= （快递天数+1）×5kg；
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生物样本(体内成分分析)1. 基本要求:1）关于动物选择：a. 大鼠、小鼠均可，与药效实验一致；b. 正常动物或造模动物均可，有条件的可考虑采用造模动物，更接近实际药物吸收情况；2）关于给药方案：在动物耐受的情况下，尽量采用中、高浓度剂量。目前常采用的给药方式有三种，a.7-10d 给药法（每天 1 次，连续给药 7-10d）；b.3 次给药法（连续 3 次。第 1、2 次间隔 20h，第 2、3 次间隔 4h）；c.2 次给药法（第 1 次给
药后 2h，再以相同剂量重复给药 1 次）。其中第一种给药法采用的相对较多，也可结合药效或药动实验情况；3）关于采样时间：采样时间通常在末次给药后 0.5-3h，一般 1h 较多，不超过 6h，也可结合药效或药动实验情况；取血前一夜禁食不禁水；4）关于采血方式：没有严格要求，只要不溶血即可，推荐使用静脉血；5）关于血样制备：血清或血浆均可，推荐血清；对血清/血浆样本制备过程中的转速、离心时间、离心次数等条件没有特殊要求；2. 样本设置建议：
类型 组数 生物重复数量动物 ? 中药药物? 给药前? 给药后 1.每组 6~8 只；2.小鼠样本因血量有限，可能需要2~3 只合并，需要增加动物数量；人 每组至少 10 名以上3. 样品量要求：类型 样本 最低送样量/样 备注血样 动物血 400μL 建议 500μL人临床血 500μL 建议 1mL
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组织 动物 大于 500mg 1. 用预冷的 PBS 缓冲液或生理盐水清洗干净，以去除血液残留和污物；2. 用干净的无尘吸水纸吸干水分，将组织样本装入冻存管；3. 管子上做好标记后迅速放入液氮中冷冻处理 15min，于-80℃下保存；其他 无法达到上述建议要求或其他特殊类型样本，请另外咨询4. 样本保存和寄送要求：1）血液体样本务必使用1.5mL 或 2mL进口离心管保存（不要用冻存管），血 液样 本 不 可 装 的 太 满 ， 一 般 不 超 过 离 心 管 的 1/2， 因 结 冰 后 会 把 盖 子 顶 开
导 致 样 本 泄 露 和 污 染 ；2) 用油性记号笔或医用胶带进行样本标注，并封口膜封好；3）血液体样本冷冻时，保证样本位置在瓶底，建议放在冻存盒中；4）血液样本收集完成之后尽快保存于-80℃，不可长期置于 4℃（不超过 48h）或-20℃（不超过 7 天）。建 议 一 个 月 内 干 冰 送 样 ；5）寄送方式：建议采用顺丰快递，样品置于泡沫盒，并用干冰覆盖，干冰使用量=（快递天数+1）×5kg，所有样品建议做好备份，防止寄送过程出现异常导致样品
损坏；6）其他样本参照血液样本进行收集和保存，其中组织样本收集时需先洗尽血液再冻存。尿液、粪便、乳汁、瘤胃液样本等样本具体咨询。
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【注意事项】1）血 液 样 本 中 不 能 含 高 盐 ， 如 PBS、NaCl buffer 等 ； 不 能 含 去 垢 剂 ，如 SDS、Triton、NP-40 等 。2）血样不可出现溶血。下图第一种状态可以接受，其他状态样本均是溶血状态。
3）全血样本加与不加抗凝剂处理后如下图展示：
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附录血液样本制备方法（仅供参考）1. 血浆样本的制备：1）用含有肝素钠的 5mL 采血管（根据具体实验具体选择）采集血液，采血后立即轻轻颠倒混匀采血管 5-10 次，以确保抗凝剂发挥作用；
2）采血后需在 30min 内尽快离心分离出血浆(若不能尽快离心，采集的血液需放在 4℃冰箱保存，并必须在 4h 内完成离心及分装），4℃条件下 3000rpm 离心 10min-15min，吸取适量上清液（即血浆）置于合适的已编号的 EP 管中；3）如此重复分装成多管血浆以避免反复冻融，尽快将血浆保存于-80℃冰箱中；注：①取血时如用酒精消毒，请擦干擦拭部位，待酒精完全挥发后再取样；
②血浆参考产率≈50%，例如 1mL 全血大约能得 0.5mL 血浆；③对血浆抗凝剂没有要求，各组保持一致即可；④取血管的管帽色标参照如：
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2. 血清样本的制备：1）用不含抗凝剂的样本收集管采集血样，或将采好血样的采血管室温静置（注意：不能振摇采血管）；2）静置 30min-60min 使其凝结后，再将采血管放入冷冻离心机内，4℃条件下 3000rpm，离心 10min-15min，吸取上清液（即血清）分装于合适的已编号的 EP 管中；3）如此重复分装成多管血清以避免反复冻融，尽快将血清保存于-80℃冰箱中；
注：①取血时如用酒精消毒，请擦干擦拭部位，待酒精完全挥发后再取样；②血清参考产率≈30%~50%，例如 1mL 全血大约能得 0.3~0.5mL 血清；3. 动物组织样本的制备：1）根据具体实验设计准确切除所需组织，迅速剥去非必需的脂肪和结缔组织等非研究所需的组织类型；
2）用预冷的 PBS 缓冲液或生理盐水清洗干净，以去除血液残留和污物；3）用干净的无尘吸水纸吸干水分，将组织样本装入冻存管；4）管子上做好标记后迅速放入液氮中冷冻处理 15min，于-80℃下保存；
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