金 黄色葡萄 球菌肠 毒素抗 原（SEB-Ag ）检 测试剂 （ 胶体金 法 ） 说明书
【产 品名称】
通用名称： 金黄色葡萄球菌肠毒素抗原（SEB-Ag ）检测试剂（胶体金法）
【包 装规格】1 人份/ 袋、10 人份/ 盒
【预 期用途】
本品仅用于疑似 食品、环境污染物和临床标本中 SEB 样本的医学研究 ，不能用于临床 诊断。
【检 验原理】
金黄色葡 萄球菌(Staphylococcus aureus) 是引 起 食品污染 和细菌 性食物 中毒的 一种重 要细菌 ， 在自然界 中分
布广泛。由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒发 生频率极高[1] 。金黄色葡萄球菌的致病力主要取决于 其产肠毒素
和 酶的能力。其中金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxin ，简称 SE) 是一组结构相 关、毒力相近的单
肽链毒性蛋白质，按血清学分类，有 A 、B 、Cs 、D 和 E 等血清型[2] 。据估计进食者吃下约 100ng 的肠毒素即
可出现食物中毒症状[3] 。在食品检验中，没有金黄色葡萄球菌检出，并不能说明不存在肠毒 素，因为肠毒素非
常耐热，经过 100℃ 煮沸 30min 仍然具有性。 因此对金黄色葡萄球菌进行食品安全性的确切评价，必须检查分
离到的金黄色葡 萄球菌是否 产生肠毒 素。近年 来国际上已将肠 毒素的检 测 列入食品 检 验法 规 ，建立敏感、特异
的食品中的肠毒素检测方法，是食品检 测的一项重要研究内容。
本品采用双抗体夹心法 将抗 B 型金黄色葡萄球菌肠毒素（SEB ）天然特异性抗体 包被在硝酸纤维膜上，用
于 捕 捉标 本中 金黄 色葡 萄球 菌肠 毒素 SEB 型抗 原 ，用 标记 了 特 异性 抗体 的免 疫胶 体金 探针进 行 检测 ，可 用 于
样本中金 黄色葡萄球菌肠毒素（SEB ）感染检测。
本试剂用于食品、环境污染物和临床标本中 SEB 的检出。
【主 要组成成分 】
组份
1 人份/ 袋 10 人份/ 盒
金黄色葡萄球菌肠毒素抗原（SEB-Ag ） 检测卡
【适 用仪器】 无
【 储 存条件及有 效期】
试剂于 2-30℃ 保存，有效期 12 个月。生产日期、失效日期见标签。
【样 本要求】
食品、环境污染物和临床标本。
【检 验方法】
1. 样品制备：
（1）食 品 ： 固 态食品 如肉类 、豆制 品、腌 制 的菜、酱 等，如 是动物 可取饲 料，称 取约 2 克，充分 剪碎，
加 5mL 生理盐水振 荡 10 分钟，使内容物充分 浸出，自然沉降后取上清 0.3mL 作为样品检测 液；液态食品如蜂
蜜、乳液等，吸取 0.1mL ，加生理盐水 0.4mL ，混均后作为样品检测液。
（2）环境污染物 ：取疑似 SEB 污染的土壤、灰尘、或物体表面 、动物皮毛的擦拭子，浸于 0.5ml 生理 盐
水中，自 然沉降或离心后或挤干擦拭子，取上清 0.3ml 作为检测液；或取疑似污染 水 0.3ml 作为检测液。
（3）临床标本 ：取少量疑似 SEB 中毒者粪便 和呕吐物，剪碎，加 5ml 生理盐水振荡 10 分 钟，使内容物
充分浸出，自然沉降或离心后取上清 0.3ml 作 为检测液；或取疑似 SEB 中毒者血清 0.1ml ， 加生理盐水 0.4ml ，
混匀后作为检测液。
第 1 页 共 2 页
2. 检测过程： 取试剂一个，撕开外包装，吸取样品检测液，滴加 3-4（约 150μl ）于试剂圆 孔中，2 分钟后
开始观察结果，15 分钟终止观察 。
【结 果释义】
阳性结果：试剂窗 口“C” ( 对照) 和“T” （检测） 处出现 2 条红色沉淀线为阳性，即检出。
阴性结果：试剂窗口仅“C” 处出现 1 条红色沉淀线为阴性，即 未检出。
试纸卡失效：试剂窗口“C” 处无红色沉淀线， 即试纸卡失效。
【检 验方法的局 限性】
本产品仅用于 食品、环境 污染物 和临 床标本样本 的医学研究 ，阳性结果 需结合其它 方法进行 确证 且不能 作
为 临床诊断的依据 。
【注 意事项】
1. 试纸卡取出后应立即使用，以保证试剂使用 时干燥，因为试剂在空气中暴露时间过长后会受潮失效。
2. 试剂用过后放入包装袋中，集中消毒后再处 理，以防污染环境。
3. 本试剂 最 低可 检出 SEB ：2.0ng/ml 。因此， 为提高检出率应尽量使样品浓缩 或富集 。
4. 检测血清标本时 会出 现封闭 现象， 如“T” 处 出现沉淀 线，“C” 处未出 现沉淀 线， 可将标 本 按 1:40 稀释 重取
试剂检测。若重测结果“C” 处出现沉淀线，“T” 处未出现沉淀线，则此份标本判为阳性，即有 SEB 检出。
5. 固态食品标本处理时需充分沉降， 最好离心 取上清检测，否则会影响层析效果，出现非特异性反应。
【参 考文献】
1. 胡东良, 林雁春, 刘佩红. 乳及乳制品中金黄色 葡萄球菌的分布及其理化特性研究[J]. 食品科 学, 1996, 17(1):
69-73.
2. Naomi B, Avraham R. Staphylococcal enterotoxins[J]. Int J Food Microbiol ，2000, 61(1): 1-10.
3. Reginald W Bennet, Gayle A Lancette bacteriological analytical manual online(FDA-CFSAN)[M]. 2001.
4. Bergdoll M S. Analytical methods for staphylococcus aureus[J]. Int J Food Microbiol, 1990, 10: 91-100.
5. 向阳. 食品中金黄色葡萄球菌及肠毒素的检 测方法[J]. 中国食品学报, 2002, 2(2): 57-61
6. Park C E, Akhtar M, Rayman M K. Nonspecific reactions of a commer cial enzyme-linked immunosorbent assay
kit(TECRA) for detection of staphylococcal enterotoxins in foods[J]. Appl Environ Microbiol, 1992,58: 2509-2512.
7. 王小红, 谢笔钧, 史贤明, 等. 金黄色葡萄球菌 B 型肠毒素的培养产毒与柱层析纯化[J]. 食品科学, 2005, 26(5):
88-91.
8. 徐义俊. 免疫血清学技术在农业上的应用[M]. 南京: 南京农业大学出版社, 1987.
9. 《中国生物制品规程》2000 版
【
第 2 页 共 2 页 |
|
