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测序过程常见问题分析与解答DNA测序样品用什么溶液溶解比较好?与测序引物有关的问题：答：对于通用测序引物，只要正确使用，一般不会有太大问题，测序引物问题主要发生在客户自己提供的PCR引物上。应该明确的一点是并不是所用的用于PCR的引物都可以用来作测序，以下几种PCR引物将是不适 合用作测序引物的：通常用于测序的引物纯度要在90%以上，... 阅1468 转19 评0 公众公开 11-11-02 15:06 |
质粒DNA提取及琼脂糖凝胶电泳检测。细菌培养物加入SDS和NaOH碱性溶液处理后，菌体裂解，可使细菌的质粒DNA、染色体DNA和RNA一起从细胞内释放出来，经琼脂糖凝胶电泳，因各种核酸分子的迁移率不同将上述核酸分成不同的带。二、琼脂糖凝胶电泳。【材料】 1、琼脂糖、10×TAE电泳缓冲液（40mMTris,20mMNaAc,1mMEDTA，PH8.0） 2、载... 阅1952 转33 评0 公众公开 11-11-02 15:03 |
琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA.【实验目的】 通过实验掌握琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA的原理与方法。琼脂糖凝胶电泳是分离、鉴定和纯化DNA片段最为常用的方法之一，这种方法简便易行。使用电场强度和电泳方向恒定的水平板琼脂糖凝胶电泳的方法，可以很好的分离长度在50-20,000 bp 的DNA片段。琼脂糖的浓度；一个给定大小的线性DNA片段，在不同浓度的琼脂糖... 阅1810 转23 评0 公众公开 11-11-02 14:55 |
琼脂糖电泳步骤之超级基础篇。融胶，加热到胶产生大量的气泡时，拿出摇匀，继续加热到完全溶解，拿出摇匀，再加热到沸腾。倒胶，可用水浴的办法使胶冷却到60度左右，即手可以握住瓶子的温度，沿着制胶板的一侧，缓缓地一次性倒入。高浓度胶例如2%以上的EB很难摇匀，而且凝的速度也相对快，强烈建议跑完胶之后再用EB染色。暂时不用的胶最好放入... 阅865 转21 评0 公众公开 11-11-02 14:52 |
三、PCR反应体系的组成与反应条件的优化 PCR反应体系由反应缓冲液（10×PCR Buffer）、脱氧核苷三磷酸底物（dNTPmix）、耐热DNA聚合酶（Taq酶）、寡聚核苷酸引物（Primer1，Primer2）、靶序列（DNA模板）五部分组成。4． 引物：引物是决定PCR结果的关键，引物设计在PCR反应中极为重要。⑵ 引物的3’端不应与引物内部有互补，避免引物内... 阅229 转2 评0 公众公开 11-11-02 14:35 |
DNA检验可以弥补血清学方法的不足，其中STR位点和单核苷酸（SNP）位点检测分别是第二代、第三代DNA分析技术的核心，是继VNTRs（可变数量串联重复序列多态性）研究而发展起来的检测技术。二、DNA亲子鉴定的原理。．DNA释放后，尽量确保DNA的完整性。打拐办民警带曾超到北京市公安局法医中心DNA实验室抽取血样进行DNA检测，在全国丢失儿童父母DNA... 阅670 转16 评0 公众公开 11-11-02 10:55 |
12000rpm 5分钟，离心，吸上层入另一1.5ml离心管；2 DNA浓度的测定取15ul DNA 标本加1485μl 双蒸水，充分混匀后，用紫外分光光度计测定波长分别为260nm、280nm、330nm时的OD值，计为OD260、OD280、OD330，计算浓度和比值，判断DNA的浓度和纯度。DNA浓度（μg/ml）=（OD260-OD330）×50μg/ml×稀释倍数（100）DNA纯度=（OD260-OD330... 阅616 转15 评0 公众公开 11-11-02 10:31 |
血块中提取DNA的方法1.取15ml研磨器，加入5ml血块，4-5ml溶血试剂，研磨至无凝块存在。转移 到50ml离心管中，2500rpm，10min。9.加TE，水浴至DNA溶解，测DNA浓度。260nm光吸收值为1时（A260=1），dsDNA的质量浓度相当于50ug/ml，则dsDNA的浓度为： A260 值× 50ug/ml ×稀释倍数。注意点：提取的DNA应该完全溶解后再测其浓度，而且在测... 阅127 转4 评0 公众公开 11-11-02 10:28 |
DNA十分钟快速提取新方法BioGene-ExpuzeTMDNA 10分钟快速提取试剂盒中文说明书。从全血样本提取DNA的操作规程1、在离心管中加入900 µl的溶液 1及250-300 µl的全血，振荡30秒。11、将Spin Column放到另外一根1.8ml离心管中，加入430 µl 溶液E（溶液E使用前放于65-60℃温浴），浸泡1分钟后离心30秒提取DNA（15000 rpm）。 阅270 转0 评0 公众公开 11-11-02 10:25 |
阅372 转1 评0 公众公开 11-11-02 10:22 |
