| 共 34 篇文章 |
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我读书少，你表骗我——最清楚的QPCR原理讲解。荧光 正比于 DNA产物数目 某种关系于 DNA初始量。假设我们做了细胞内p53mRNA和GAPDH的qPCR，那么我们得到了Ct(p53)和Ct(GAPDH)lgN(p53)= K1 X Ct(p53) +K2,lgN(GAPDH)=K1 X Ct(GAPDH) + K2我们想看p53相对于内参的表达量时：如果你有一个实验组和一个对照组，那么实验组比对照组的比值就是2^-△△... 阅1 转自ypgao 公众公开 20-09-03 16:00 |
常见启动子。调控手段（浓度）LacUV5.乳糖操纵元。lacI/IPTG (0.1-1mM)色氨酸操纵元。trpR 3-β-吲哚丙烯酸。结合了色氨酸启动子的-35序列和乳糖启动子的-10序列。PL.λ噬菌体。λcI阻遏物/温度。噬菌体T5.T5噬菌体。阿拉伯糖操纵元。AraBAD/阿拉伯糖（1μm-10mM）T7.T7 RNA聚合酶。非常强。 阅1 转自binhuren 公众公开 20-04-11 14:31 |
在大肠杆菌表达体系中要表达的基因即外源基因，包括原核基因和真核基因;原核基因可以在大肠杆菌中直接表达出来，但是真核基因韩有内含子不能，大肠杆菌不能对mRNA进行剪切，从而形成成熟的mRNA，所以真核基因一般以cDNA的形式在大肠杆菌表达系统中表达。结果表明,HPV18L1蛋白可以在大肠杆菌表达系统中以可溶形式表达,经过纯化的HPV18 L1蛋白可... 阅537 转2 评0 公众公开 20-02-28 16:05 |
大肠杆菌表达系统。目的基因：在大肠杆菌表达体系中要表达的基因即外源基因，包括原核基因和真核基因；表达宿主菌：表达蛋白的生物体即大肠杆菌。T7 RNA聚合酶一种高活性的RNA聚合酶，mRNA的合成速度比大肠杆菌内的RNA聚合酶快5倍，并某些不能被大肠杆菌RNA聚合酶转录的序列也可以转录，所以T7 RNA聚合酶和T7噬箘体启动子的存在的情况下，大肠... 阅933 转3 评0 公众公开 20-02-27 18:13 |
乳糖操纵子结构基因IPTG诱导原理。IPTG诱导表达原理图IPTG诱导表达实验方法材料。5μg质粒加100μL TE)将质粒与TE混匀，吸取2μL混液与感受态细胞混匀将感受态细胞放入冰箱（4℃）中，30min取出后立即放入水浴锅中（42℃），热激90s,再次放入冰箱（4℃）中，3min拿出后取200μL的LB液体培养基加入到已转入质粒的感受态细胞中放入摇床（37℃; 1... 阅5194 转17 评0 公众公开 20-02-27 17:21 |
什么原因，什么原因呢，隐约记得上次蛋白量比较多好像是160rpm摇的，马上换转数，SDS-PAGE图如下：蛋白大小又回到原来大小了，原来转数真的影响表达啊，没有加IPTG的菌体自身蛋白比较多，说明IPTG对菌体还是有影响的，IPTG的浓度真的没有多大关系，这次0.2mM的也诱导出来了。蛋白怎么表达这么少呢，是不是诱导时间太少，我又做了6h诱导时间，结... 阅2950 转7 评1 公众公开 20-02-26 23:16 |
放大表达&纯化，交付您需要的蛋白量四大蛋白纯化方法，先进的AKTA纯化设备，可纯化标签/无标签蛋白。蛋白表达：目的蛋白很难直接表达出来，通过在蛋白序列前段加入一段非信号肽的前肽，使目的蛋白成功表达；Lane M：SDS-PAGE Protein marker Lane 1：酶切前 Lane 2：酶切后不加抑制剂 Lane 3：酶切后+抑制剂（TPCK） Lane 4：与NHS磁珠孵育... 阅817 转3 评0 公众公开 20-02-26 22:22 |
医药行业系列之重组蛋白。重组蛋白的很多适应症是由于单基因或者明确的简单原因造成的某个蛋白的缺乏或功能丧失，如Ⅰ型糖尿病患者不能分泌内源性胰岛素，Ⅱ型糖尿病患者分泌胰岛素低于正常值、中后期口服降糖药失效，便必须外源补充重组胰岛素，因此胰岛素是Ⅰ型糖尿病和Ⅱ型糖尿病中后期患者的最后一道屏障，疗效不可被其他种类药物替代。国... 阅1 转自QICH 公众公开 20-02-26 20:52 |
蛋白表达/四大蛋白表达系统/原理/操作/FAQ (持续更新)分类：蛋白表达。在蛋白表达系统的相关研究中，蛋白表达是指利用基因重组技术表达蛋白质的过程。本蛋白表达专题主要包括：蛋白表达系统介绍（大肠杆菌，酵母及哺乳动物细胞），多种系统蛋白表达的原理、实验操作及区别比较，并附有蛋白表达实验中常见FAQ总结及常用试剂的配置，涵盖内容专业... 阅517 转4 评0 公众公开 20-02-26 17:02 |
反复冻融可能引起蛋白质的再折叠和冷变性，在一些时候会引起蛋白质的二硫键断裂，虽然二硫键在空气中能够自动氧化，但是蛋白质冷变性后且二硫键断裂开再重新形成可不一定会形成原来天然蛋白质的二硫键，因为原来的细胞内的折叠环境已经不存在了。再有考虑，原核生物中的蛋白质没有翻译后修饰，这样也不会形成活性蛋白质。另外，蛋白质如果有转... 阅1324 转1 评0 公众公开 20-02-24 19:41 |
