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慢病毒和腺病毒载体系统比较。病毒表达系统。病毒基因组。RNA病毒。双链DNA病毒。病毒基因组整合于宿主基因组，长时间稳定表达外源基因。病毒基因组游离于宿主基因组外，瞬时表达外源基因。感染细胞类型。分裂和不分裂的细胞，原代细胞，也可用于体内实验。分裂和不分裂的细胞。免疫原性。低免疫原性。高免疫原性。最高可达109－10TU/ml. 阅65 转1 评0 公众公开 22-01-06 09:29 |
[原]慢病毒作用机理是什么？ 慢病毒的基因组都很复杂，编码一系列不同于其他逆转录病毒的调控蛋白，这使得它们具有独特的调控途径和病毒持久性机制。逆转录病毒家族包括致癌病毒（RNA肿瘤病毒）、狼疮病毒以及慢病毒，这三个子家族的成员都能感染人类。从那时起，相关的慢病毒陆续从其他的物种中被分离，如猴免疫缺陷病毒(SIV)、猫免疫缺陷病毒(FIV)、山羊关节炎脑炎病毒（... 阅118 转0 评0 公众公开 22-01-06 09:26 |
慢病毒下游工艺解决方案汇总。2.核酸酶处理后的病毒溶液用300-750KD的膜组件进行切向流过滤伴随置换缓冲液，调整病毒粒子的浓度且使病毒溶液适用于下游分离纯化。4.经多模式层析粗纯后，痕量的杂质可以用高刚性琼脂糖微球阴离子交换介质Q Large Scale或者大孔（孔径约400nm) 离子交换介质 Seplife LX-Q400超大分子专用离子交换介质吸附洗脱模式... 阅210 转1 评0 公众公开 22-01-06 09:24 |
[原]慢病毒检测方法有哪些？ 慢病毒检测方法有哪些？在293T细胞株中对纯化的慢病毒进行滴度测定，常用有4种方法进行慢病毒滴度测定，分别是：通过ELISA对病毒颗粒中的p24蛋白进行检测; ?通过定量PCR对病毒颗粒的RNA进行检查;由于并非所有的病毒载体中都含有荧光蛋白，此外，荧光蛋白的表达有时候还受启动子及表达的目的基因影响，因此过定量PCR对整合到基因组DNA中的病毒序... 阅551 转0 评0 公众公开 22-01-06 09:24 |
腺病毒载体常见问题有哪些？AAV是一种小型单链DNA细小病毒，被发现是腺病毒制剂的一种污染物，而腺病毒是一类中型、无包膜的双链DNA病毒。为了避免产生具有复制能力的病毒，不应该连续扩增病毒，因为每一轮扩增都会增加产生具有复制能力的病毒的重组事件的机会。当你的腺病毒载体和包装细胞系中发现的早期基因之间的交叉事件产生野生型腺病毒时... 阅5 转0 评0 公众公开 22-01-05 09:38 |
3）以含10%血清的培养基调整细胞密度为5 ×106个/10 mL，重新接种于10cm细胞培养皿中，37 ℃，5% CO2 培养箱继续培养，转染前细胞密度80%左右。注意：293T细胞的状态非常重要，一般建议购买新的细胞株后分批多次冻存，以保证每次包装病毒时细胞的代数不会超过10代。转染过夜后，小心吸掉细胞培养液弃于盛有消毒液的废液杯中，然后加10mL新... 阅47 转0 评0 公众公开 21-11-16 09:42 |
[原]腺病毒构建原理 现已知有51种腺病毒，根据组织嗜性不同被分成ABCDEF六个不同亚群，其中C亚群的第2和第5血清型为最常见的腺病毒载体。在体内应用时，腺病毒具有嗜肝的特点，可经尾静脉注射感染肝脏，但由于腺病毒免疫原性强，感染剧烈，故常会引起动物局部组织炎症反应和机体免疫反应，对动物体征和实验结果的客观性造成影响，因此，在利用腺病毒进行体内研究时... 阅597 转1 评0 公众公开 21-11-01 10:11 |
◆慢病毒载体（Lentivirus）是一类改造自人免疫缺陷病毒（HIV）的病毒载体，是逆转录病毒的一种，基因组是RNA，其毒性基因已经被剔除并被外源性目的基因所取代，属于假型病毒。◆慢病毒基因组进入细胞后，在细胞浆中反转录为DNA，形成DNA整合前复合体，进入细胞核后，DNA整合到细胞基因组中。体外应用时，慢病毒载体能够有效地感染培养的神经元... 阅127 转3 评0 公众公开 21-11-01 10:10 |
[原]腺相关病毒构建原理 ◆纯化后的AAV病毒载体可以用于侵染细胞，侵染细胞时，AAV与细胞表面特异性受体结合，激活胞内信号通路，进而触发AAV通过受体介导的内吞作用进入细胞，在核内体、高尔基体等细胞器的协助下进入细胞核，随后病毒裂解，其单链DNA复制成为双链DNA后表达目的基因。但近年来开发出的多种新型AAV载体为我们提供了一些新的思路，如AAV-DJ血清型的AAV对... 阅185 转0 评0 公众公开 21-11-01 10:10 |
[原]慢病毒包装实验技术方法 用于包装病毒的293FT细胞必须处于生长旺盛期，细胞状态良好，细胞边缘清晰，传代次数较低。慢病毒滴度测定：滴度测定前1天接种HeLa细胞，12孔板中细胞密度为2×105个细胞/孔，含10% FBS的DMEM为1ml/孔，第2天将500μl病毒液及含10% FBS的DMEM 500μl加入到1.5ml的离心管中混匀，并将其加入到预先种好的细胞中，37℃、5%CO2培养箱培养，48h... 阅225 转1 评0 公众公开 21-11-01 10:07 |
