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[原]漫谈蛋白质的变性 漫谈蛋白质的变性。比如在做SDS电泳变性样品的时候，由于SDS的存在，变性蛋白仍然溶解在缓冲液中。而且蛋白质变性后疏水残基外露，会导致很多分子凝聚到一起，就会成为不可逆的变性。研究蛋白质的变性，可采取某些措施防止变性，如添加明胶、树胶、酶的底物和抑制剂、辅基、金属离子、盐类、缓冲液、糖类等，可抑制变性作用。比如提取鸡的卵粘... 阅1880 转22 评0 公众公开 19-11-19 15:33 |
蛋白质的变性与沉淀是两个不同的概念。其实这是两个完全不同的概念，变性的蛋白质并不一定发生沉淀，发生了沉淀的蛋白也未必一定是变性蛋白。这是因为在缓冲液中含有大量的SDS，肽链上吸附了很多带负电荷的SDS，SDS的极性使变性的蛋白能够溶于水，而且变性蛋白之间靠负电荷互相排斥而不聚集沉淀。所以说，蛋白质的变性与沉淀是两个完全不同的概... 阅314 转18 评0 公众公开 19-11-19 15:30 |
血红素，补铁与吸血鬼的传说。血红素分子是由卟啉和二价铁离子络合构成的。这里有个常见的误会，因为游离二价铁离子是浅绿色，三价铁离子是棕黄色，所以一些人以为血红素中的铁是三价的。如果血红蛋白中的铁被氧化成三价，就成为高铁血红蛋白（methemoglobin，MHb），失去携氧功能。作为正常人预防缺铁还可以，但如果有缺铁症状需要快速补铁的... 阅287 转10 评0 公众公开 19-11-19 15:30 |
胶原的结构、功能以及为什么不能通过饮食补充。胶原蛋白模型。细胞内核糖体合成的原初产物称为前原胶原，除了用来构成三股螺旋的序列之外，还含有2段用来指导原胶原定位和组装的序列，即信号肽和前肽。胶原蛋白被水解成氨基酸后吸收，正常的氨基酸可以用来合成人体自身的蛋白质，也可以氧化分解提供能量，还可以被转化成糖和脂肪。如果胶原或羟... 阅252 转8 评0 公众公开 19-11-08 11:39 |
[原]蛋白质的分离纯化（二） 蛋白质的分离纯化（二）从原料中抽提得到的蛋白质溶液一般蛋白质含量较低，并含有多种杂质。但如果目的蛋白对某种变性因素抗性较强，也可以选择性地变性杂蛋白，从而实现快速纯化目的。盐析是在溶液中加入大量中性盐，中和蛋白质表面电荷，破坏蛋白质水化层，从而使蛋白质沉淀。盐析一般在蛋白质的等电点进行，因为此时蛋白溶解度最小。因为蛋... 阅284 转15 评0 公众公开 19-08-01 23:02 |
[原]蛋白质的分离纯化（一） 蛋白质的分离纯化（一）蛋白质纯化的流程大致包括选材及预处理、细胞破碎及抽提、初步提取和精制纯化等部分，根据具体的纯化目的和要求可以有所不同。如目的蛋白在细胞内，需要进行细胞破碎，使蛋白释放出来。在细胞破碎时一般会加入缓冲液进行抽提，将目的蛋白溶出，同时保持合适的pH和离子强度。一般可溶蛋白用稀盐提取，脂蛋白可用稀SDS或有... 阅557 转14 评0 公众公开 19-07-30 12:19 |
[原]蛋白质的颜色反应 蛋白质的颜色反应。Folin-酚反应是双缩脲反应的发展，蛋白质与铜离子生成复合物后，其分子中的酪氨酸和色氨酸还原Folin-酚试剂中的磷钼酸及磷钨酸，生成蓝色化合物（钨蓝和钼蓝的混合物）。蛋白质的黄色反应是指含有芳香族氨基酸特别是酪氨酸和色氨酸的蛋白质在溶液中遇到硝酸后，先产生白色沉淀，加热则变黄，再加碱颜色还会加深，变为橙黄色... 阅7813 转10 评0 公众公开 19-07-27 11:32 |
蛋白质的等电点、水化层和双电层。蛋白质是两性电解质，分子中的可解离基团主要是侧链基团，也包括末端氨基和羧基。蛋白质种多数可解离基团分布在分子表面，但也可以有少量基团埋藏在分子内部，对等电点没有贡献。蛋白质中的解离基团可以与溶液中离子结合，所以等电点其实与溶液的离子组成有关。蛋白分子表面的可解离基团带相同电荷时，可与周... 阅3400 转13 评0 公众公开 19-07-24 21:46 |
层析、电泳与蛋白质分子量测定。蛋白质的分子量可以通过多种方法进行测定，比如元素分析、渗透压、沉降分析、分子筛层析和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）等。测定分子量时，先用标准蛋白测定出一条标准曲线，再根据目的蛋白的洗脱体积计算分子量。因为蛋白质能否进入凝胶与其分子形状有关，所以标准蛋白的分子形状应与待测蛋白相同。用已... 阅279 转10 评0 公众公开 19-07-22 20:53 |
四级结构就是寡聚蛋白天然构象中各个亚基的空间排布方式。当其中一个亚基与氧结合时，所有亚基都会发生运动，引起四个亚基相对空间位置的变化，使两个α亚基相互接近，两个β亚基则远离。这个变化会增加其余亚基对氧的亲和力，而第二、第三个亚基与氧结合同样增加剩下亚基对氧的亲和力。这样，第四个亚基对氧的亲和力可以达到第一个亚基的300多... 阅1630 转11 评0 公众公开 19-07-22 00:04 |
