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让基因分型不再困难---高分辨率熔解曲线分析。这篇文章主要为大家讲述,Roche LightCycler? 480 II实时荧光定量PCR仪高分辨率熔解曲线分析,尤其在基因分型方面的应用!对于已知SNP位点的识别,LightCycler? 480 II提供了利用TaqMan探针(水解探针)通过终点法进行SNP分型,和利用杂交探针通过熔解曲线法进行SNP分型两种选择。高分辨率熔解曲线(H...
常见问题处理 | 实时荧光定量LightCycler 480常见问题及处理方法。一、仪器软件设置问题。二、仪器和电脑连接失败。放好微孔板后,点击进仓键,样本架进去一部分,能看到仪器内扫描仪红灯闪烁一下,样本架又出来,由于放置的微孔板类型和操作软件选择的微孔板类型不符导致。首先将仪器关机,打开空调20分钟后,使科室环境温度保持在15度到32度...
HRM(High Resolution Melting analysis,高分辨熔解曲线)同许多荧光PCR技术一样,是利用特定dsDNA染料可以插入DNA双链小沟中(PCR产物)的特性,通过实时监测升温过程中dsDNA解链,荧光染料脱落,荧光信号减弱或消失的过程,高分辨记录熔解曲线,从而对样品进行检测。用于HRM分析荧光染料如LC Green, Ly Green, eva Green等均为饱和染料,能饱...
其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。应用:大片段核酸分子分离,琼脂糖凝胶电泳DNA的回收,酶切检测,PCR反应。6...
相信很多新手宝宝和小笔一样,第一次看师兄师姐捣鼓一天,又是稳压跑蛋白又是稳流转蛋白,然后还要在冰箱里面摇着过夜,脑子彻底懵圈了。蛋白转到了滤纸上?!小笔在此分享的是湿转法:请认准“黑胶白膜”经典套餐,滤纸的长宽比胶小2 mm左右,而膜的长宽比胶大2mm左右,绝对避免上下两层滤纸接触而引起短路,并按照图所示对好正负极后,再接通...
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