| 共 4 篇文章 |
|
HUVEC成管操作protocol.4.在用生长因子减少的基质胶涂布96孔板后，用胰蛋白酶从烧瓶表面去除细胞，用DMEM与血清中和，在室温下以1200rpm（276xg）离心3分钟使细胞沉淀，重悬于2-3ml无血清DMEM中，通过计数细胞来测定HUVEC的浓度，并通过向上和向下吸移几次以4×105/ml无血清DMEM重悬HUVEC细胞，以确保均匀的单细胞悬浮液。3.在HUVEC细胞血... 阅1 转自Wenson360L 公众公开 23-11-20 16:12 |
贴壁细胞相比较悬浮细胞——在转染效率方面贴壁细胞和悬浮细胞之间的差异显著。我自己的体会是，一般的细胞，用脂质体2000和fugeneHD转染效率相差不大，虽然最近有文献说脂质体2000脱靶效应很高，但国内在乎的人貌似不多;但是干细胞，原代细胞和肿瘤细胞等一些比较难转的细胞系，Fugene HD比较温和，细胞毒性很低，转染效率明显要好;悬浮细胞，... 阅3413 转21 评2 公众公开 18-04-03 11:23 |
去除基因组污染(gDNA Eraser)，TaKaRa反转录试剂盒推介。PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因组DNA进行Real Time RT-PCR反应的专用反转录试剂。因为实验目的不同，也可以不使用RT Primer Mix，而选择Oligo dT Primer或Gene Specific Primer进行反转录反应，引物使用量如下： Oligo dT Primer 50 pmol／20 μl反应体系 G... 阅7083 转26 评0 公众公开 18-04-02 18:13 |
