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那些肿瘤干细胞的研究套路-序章与实验方法介绍。采用肿瘤干细胞微球Oncosphere体系对常规肿瘤细胞系或者病人来源的肿瘤干细胞进行培养: Oncosphere即干细胞成球,通过无血清的干细胞培养基在低吸附的培养板上对肿瘤细胞进行培养可以得到悬浮的球状细胞团(图1),细胞处于无血清培养基及超低黏附培养板中,在这种培养条件下,分化的肿瘤细胞渐...
去势抵抗性前列腺癌(CRPC)的发生机制和可选择的治疗手。去势抵抗性前列腺癌(CRPC)是指经过初次持续雄激素剥夺治疗(ADT)后疾病依然进展的前列腺癌,根据2014年中国泌尿科学会的指南,诊断CRPC需符合以下4个条件:1、血清睾酮达到去势水平(<50ng/dl 或<1.7nmol/L;几乎所有的晚期前列腺癌患者在接受内分泌治疗后,都会最终进展为去...
我们在进行qPCR实验时,对于内参基因的选择往往会不假思索地选择GAPDH和β-actin或18S rRNA之类的内参基因。为什么18S rRNA被选作内参基因?同样是rRNA的5S rRNA和5.8S rRNA以及28S rRNA就不适合作为内参,因为①5S与5.8S在核糖体大亚基中的rRNA分子序列短,提供的信息少;其实不仅仅是GAPDH和β-actin或18S rRNA这三个基因在作为内参基因的存...
基金申请利器:GSEA分析TCGA免疫浸润机制。(B) Volcano plots for the enrichment (blue) and depletion (yellow) of immune cell types across cancers for tumors with high, intermediate, and low mutational load calculated based on the NES score from the GSEA.(F) Volcano plot for BRAF- and RAS-mutated TCHA tumors calculated ba...
如何用Origin绘制热图?将数据复制粘贴到Origin中后,计算样本两两之间的相关系数(当然也可以将数据转置后计算基因间的相关系数),具体方法见下面的动图。Origin表格的与Excel的表格相类似,选中相关系数矩阵表中的数据部分,通过Plot\Contour\Heat Map(见下图)进入数据选择窗口。添加数据之前,需要把多列数据合并为1列,选中数据后,通过...
名库风采 - 北京协和医院临床生物样本管理中心。中心同时重视对外交流与合作,先后对美国UCSF组织样本库、阜外医院生物样本库、上海仁济医院样本库、中山大学肿瘤医院样本库等开展访问和学习交流,并加入ISBER和中国医药生物技术协会组织生物样本库分会,在室内质控和室间质评等方面积极参与国内外的交流与协作,并参加中国CNAS组织的生物库认...
双萤光素酶报告基因检测(启动子活性检测)摘要:通过双萤光素酶报告基因系统检测转录因子steroidogenic factor-1(SF-1)能否与Oct-4启动子片段发生作用。一、 实验原理萤光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶,一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。双萤光素酶报告基因检测系统在细胞中同时表达萤火虫萤光素酶和...
手把手教你双荧光素酶报告实验。荧光素酶报告基因被广泛用于miRNA靶基因验证。荧光素酶报告基因的原理在于miRNA主要通过作用于靶基因的3’UTR起作用,可以将目的基因3’UTR区域构建至pGL3-basic载体中报告基因Luciferase的后面,构建荧光素酶质粒。定量萤火虫荧光强度之后,再在同一样品中加入Stop&Glo Reagent试剂,将上述反应淬灭,并同...
一直苦于不知道西红柿怎么打顶、整枝,也看了一些帖子,但介绍都不是很明白,经过不懈努终于找到了,图文并茂,供大家参与,闲话不多说,上菜。植株调整 整枝的方式主要有下列两种:(1)单干式---这种方法,只留主干,而把所有的侧枝全部摘除。(2)双干式---除主枝外,再留第一次花序直下叶腋所生的一条侧枝,而把其它的侧枝全部摘去。整枝摘...
战争总需要武器,CRISPR/Cas系统也要制造足够的”军火“来打击入侵者。目前的研究表明,CRISPR/Cas系统共有三种方式(Type Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)来制造”军火“。CRISPR/Cas9系统属于Type Ⅱ,是目前最成熟也是应用最广的类型。因此,图3将重点介绍CRISPR/Cas9的原理。当入侵者到来,CRISPR序列会在”指挥官“(前导区)的调控下转录出两种“军火材料”...
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