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原来检测细胞增殖,方法这么多(上)导读 上期我们详细介绍了评价细胞增殖能力之克隆形成实验,但一经查阅文献,殊不知原来相关检测方法居然还有10余种,如MTT、MTS、CCK8、SRB及DNA合成检测和ATP浓度检测等等,那在这些方法中我们该作何选择,确实是个头大的难题。细胞增殖检测实验的意义。1. 细胞代谢活性检测 通过检测活细胞相关的物质的含...
Abbiotec (San Diego, CA, USA);Abgent (San Diego, CA, USA);Advance Targeting System (San Diego, CA, USA);BD Biosciences (San Jose, CA, USA);BD Pharmingen (San Diego, CA, USA);Eton Bioscience (San Diego, CA, USA);Genway Biotech (San Diego, CA, USA);Paul, MN, USA);Percipio Bio Sciences (Burlingame, CA, USA);Santa Cruz Bi...
浓度太低,细胞标记的荧光强度不够,太高了对细胞有毒性,且影响细胞增殖。EdU(5-Ethynyl-2’- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与Apollo荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性,适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记...
干货分享MTT—想说爱你其实不难。用于MTT实验检测的细胞,需是处于对数期阶段的细胞,所谓的对数期,就是生长较快的那个阶段,可以通过牛鲍计数板或者细胞计数器进行计数,药敏试验调整到5000个/100ul,细胞增殖实验调整到10000个/100ul。2、一行12个孔,个人习惯设置两个PBS填充孔,两个对照孔,两个空白孔,6个复孔,即2-3列对照,4-9列复孔...
细胞凋亡检测方法汇总。坏死细胞的PS也会从细胞膜的内表面翻转到细胞膜的外表面,Annexin V也能识别坏死细胞表面的PS, 所以Annexin V无法区分坏死细胞和凋亡细胞。早期凋亡细胞和活细胞的细胞膜仍然完整, PI染料无法自由通过细胞膜进入细胞内与DNA结合,所以PI染料无法标记凋亡细胞和活细胞,而PI染料却能够通过坏死细胞的细胞膜与细胞内的DNA...
关于细胞转染 你知道多少?通过病毒中膜糖蛋白和宿主细胞表面的受体相互作用进入宿主细胞,之后反转录酶启动合成 DNA 并随机整合到宿主基因组中。特点:稳定转染,可用于难转染的细胞、原代细胞,体内细胞等,但携带基因不能太大。转染前细胞最好经过 1-2 次传代保证细胞生长旺盛容易转染,注意贴壁细胞一旦长满就不好转染。一般转染时,贴壁细...
科研新手会用到的Image J使用方法总结1Image J测量western blot蛋白电泳灰度值。选一张肺部的Masson三色染色图,染色结果为:胶原纤维呈蓝色(如光绿液染色为绿色),胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色,胞核黑蓝色。3、此时再将图片下方的调节滑轮拉到中间或是最右边,以获得最佳的对比度→再选择Image按钮→点击Adjust→点击Threshold按钮...
RIP,RNA 结合蛋白便宜共沉淀,是从蛋白出发研究蛋白RNA相互作用的技术。就是已知一个蛋白,推测会与你的目的RNA相互作用,用蛋白的抗体做免疫共沉淀,把蛋白结合的RNA富集出来并鉴定目的RNA,以证实蛋白与RNA的相互作用。RNA pulldown是从RNA出发研究蛋白与RNA相互作用的技术。就是用已知的RNA 去拉蛋白,在做western验证以证实蛋白与RNA的相...
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