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关于他
| 共 19 篇文章 |
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首先检测是否是融解质粒的TE问题，最后将此问题排除然后检测是否是质粒本身的问题，酶切时同时做以前阳性的质粒酶切做对照（注意，该阳性的质粒和待检测的质粒不是同一批提取的，顺便说一句，我们也用碱裂解法），发现阳性的质粒对照条代完好，而酶切的质粒条代弥散或者空白，未酶切的待检测的质粒条代有时也跑不出来条代（尽管刚提完质粒时跑... 阅4781 转21 评0 公众公开 11-06-02 21:38 |
提取RNA及用DEPC去除RNase的个人总结(转）快速的操作，低温环境，少量取上清主要是抽提之后吸取上清时要特别小心，只要不把蛋白层吸出来就不会有RNase污染。2 如果你要用DEPC水处理Tips等等东东，那么就要用高压前的水，即DEPC水的a状态。试验所用试剂也可用DEPC处理,加入DEPC至0.1%浓度,然后剧烈振荡10分钟,再煮沸15分钟或高压灭菌以消除残存... 阅10084 转139 评0 公众公开 11-06-02 17:30 |
③点击OK，软件即开始自动搜索引物，搜索完成后，会自动跳出结果窗口，搜索结果默认按照评分（Rating）排序，点击其中任一个搜索结果，可以在"引物窗口"中，显示出该引物的综合情况，包括上游引物和下游引物的序列和位置，引物的各种信息等。当然，搜索出的引物，其扩增产物很短，你可以不选择它，或是引物3端>=2个A或T,或引物内... 阅1699 转54 评0 公众公开 11-05-29 22:49 |
SDS-PAGE胶浓度与对蛋白的分辨率对应图_绿谷生物网SDS-PAGE胶浓度与对蛋白的分辨率对应图Update:2009-03-15From:ibioo.Com Hot:688. 阅163 转自飞絮620 公众公开 11-05-29 09:31 |
朗伯－比尔定律：A 吸光值I0 入射光强度I 投射光强度c 吸光物质的摩尔浓度（mol/L）d 光通过的液层厚度（cm） 摩尔吸光系数（Lmol-1cm-1）2. A280nm是蛋白和酚类物质最高吸收峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估：纯DNA的A260/A280比值为1.8，纯RNA为2.0。比值=1.5相当于50％蛋白质/DNA溶液3. A230nm是碳水化合物最高吸收峰的吸收波... 阅15067 转61 评0 公众公开 11-05-25 19:11 |
PCR常见问题分析PCR常见问题分析 PCR在产物序列中引入了错误？②引物的浓度不仅要看OD值，更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳，一定要有引物条带出现，而且两引物带的亮度应大体一致，如一条引物有条带，一条引物无条带，此时做PCR有可能失败，应和引物合成单位协商解决。4 Mg2+浓度：Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大，浓度过高可降低PCR扩增... 阅468 转自指环读王 公众公开 11-05-12 20:59 |
关于Touchdown PCR关于Touchdown PCR.对于使用简并引物或者含有错配碱基的的引物进行的TD-PCR，程序运行的调整包括降低退火温度范围（例如从50度降至35度），而在最后15个循环中采用50度或更高一些的退火温度（一旦扩增开始，引物会全部补充到新合成的复制子中，会有更高的Tm值，这时低的退火温度则不利于扩增）。hot start PCR 热启动PCR是... 阅183 转自zhuimengf... 公众公开 11-05-12 20:52 |
PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带？PCR体系是10ul的，每次PCR完了以后，管壁上有一层水气，需不需要覆盖矿务油？PCR加样孔上有很亮的条带，但没有产物条带？PCR的产量有许多因素决定他们的主次关系是什么,各因素又是怎么调节的？PCR产物大约有900bP，哪种测序方法比较好？直接用纯化的PCR产物测序还是克隆到T载体上再测序？纯化PCR产物... 阅35 转自zhuimengf... 公众公开 11-05-12 20:51 |
RNA 质量RNA 质量主要包括RNA的纯度（没有蛋白质和DNA的污染）以及完整性。反转录反应系统1.RT和PCR单一酶系统2.RT和PCR分离的酶系统3.RNA逆转录引物的选择引物主要有三种：1.随机引物：随机引物，特别是6nt引物对所有的靶位点不产生十分稳定一致的结果，建议使用15nt的随机引物.2.oligo-dT：只能用于mRNA完整的样品，特别有polyA .而且对于一... 阅174 转自ha-ppy 公众公开 11-05-12 20:49 |
引物结合位点DNA序列的改变以及两扩增位点之间DNA碱基的缺失、插入或置换均可导致扩增片段数目和长度的差异，经聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳分离后通过EB染色以检测DNA片段的多态性。使用特定的双链接头与酶切DNA 片段连接作为扩增反应的模板,用含有选择性碱基的引物对摸板DNA 进行扩增,选择性碱基的种类、数目和顺序决定了扩增片段的特殊性,只... 阅1203 转6 评0 公众公开 11-05-11 09:52 |
