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[原]蓝白斑筛选原理 β半乳糖苷酶ω片段（C端）当Lac Z 基因内无外源DNA的插入， N\C完好，表达出b-半乳糖苷酶，在含X-gal的培养基上生长会出现蓝色菌落---阴性克隆。基于这个特点，pUC系列载体DNA（或其他带有lacZ基因载体DNA）以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–... 阅1651 转0 评0 公众公开 22-06-11 10:01 |
Keywords: Medaka, Transgenic, CRISPR/Cas9, Knock-in.B：供体载体整合至鸡基因组原理示意图)Fig. 1 Schematic diagram of CRISPR/Cas9-mediated foreign gene targeted knock-in into the chicken genomic EAV-HP locus.(A) Schematic diagram of donor vector. (B) Schematic diagram of donor vector integration供体载体构建及鉴定本研究... 阅504 转3 评0 公众公开 22-06-11 10:01 |
重叠互补引物的设计是重叠延伸PCR技术成功的关键。为了最大限度地避免碱基的错配，重叠延伸 PCR 反应应避免使用普通 Taq酶，因为 Taq酶会在 PCR 产物末端加 A，从而可能会使产物移码突变。Taq酶会在末端加A，高保真酶有3’— 5’的外切活性，基于重叠PCR原理和酶的性质，第一步和重叠PCR步骤至少有一步使用高保真酶（或者如Taq Plus、Es Taq之... 阅1776 转5 评0 公众公开 22-06-11 10:01 |
