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siRNA实验方法和常见设计问题解答Q:如何选择转染方法和转染试剂？而siRNA的工作浓度就是使siRNA能够达到最佳沉默效果的转染浓度，一般10～100 nM范围内，锐博生物推荐的转染浓度是50nM。A:我们提供的转染对照siRNA带有Cy3或Cy5荧光标记，可以通过荧光显微镜，共聚焦显微镜，流式细胞仪等荧光检测仪器检测。Q:siRNA的作用效果应该如何检测？Q:用... 阅1585 转6 评0 公众公开 20-06-18 11:28 |
细胞转染的方法主要包括：电穿孔法、磷酸钙沉淀法、脂质体转染法、病毒介导的转染等，理想的细胞转染方法是具有高转染效率、对细胞的毒性作用小等，本文主要介绍细胞转染常用的方法-脂质体转染的原理和操作步骤等。带正电的阳离子脂质体，DNA并没有预先包埋在脂质体中，而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上，形成DNA-阳离子脂质体复合物... 阅1 转自whtjzhuhe 公众公开 20-06-14 17:23 |
实验前准备lipofectamine2000（转染试剂）（避光），Opti-MEMI 减血清培养基（避光），目的基因的质粒或者 siRNA（以 siRNA 为例），细胞，六孔板，培养基，以及一些细胞实验所需的普通物品。步骤1）细胞接种：转染实验前天接种细胞，各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。2）这些质粒或者 siRNA 过期了。或者加大质粒或者 s... 阅1 转自微笑如酒 公众公开 20-06-14 16:33 |
如何做好质粒DNA细胞转染实验？如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几率会高一些。既然质粒纯化已经不成问题，初学者通常都不会在乎甚至愿意多加点DNA，但是要注意的是，DNA量过少固然转染效率不高，DNA量过多同样会降低转染效率。有的转染试剂要求DNA的量多些，有的转染试剂效率高只要很少DNA。 阅1 转自实验专家 公众公开 20-06-14 11:07 |
