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植物亚细胞定位GFP表达载体的选择问题双子叶用pBI121，pBI221，当然要自己把GFP连上去单子叶就pCAMBIA系列 ，我们用3301，pGA1611应该也可以。 阅634 转8 评0 公众公开 12-03-25 16:16 |
植物亚细胞定位GFP表达载体的选择问题。如果要打洋葱或者做转化的话，普通的启动子载体（如pCAMBIA，pMDC系列）就可以做亚细胞定位（把GUS或者其他的报告基因换成GFP，保证读码框正确）；如果要做原生质体转化，就要选择小一点的载体，象PM999，BiFC系列。另外，亚细胞定位不一定非要GFP的，RFP/YFP/CFP等等都可以。 阅931 转7 评0 公众公开 12-03-25 16:14 |
【求助/交流】基因的功能验证RNAi ,.酵母单双杂交，gene -knockout ,基因互补，转基因，同源物种分析，免疫后反响推导。 阅311 转1 评0 公众公开 12-03-19 00:36 |
（一般可以做RT-PCR，Northern就算了）第六步（可在第二步与第三步之间），在不同的鸡品种中，拿出该基因，研究该基因在不同品种中的多态性进行分析（可尝试关联分析）研究该基因对表型的影响，并研究这些多态性的特点以及相关的品种间的保守性。 阅333 转9 评0 公众公开 12-03-19 00:05 |
酵母双杂交酵母双杂交的目的是检测两种蛋白的是否有相互作用。酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白－蛋白的相互作用。如果在BD上接上一个蛋白X，在AD上接一个蛋白Y，再将这二个质粒共同导入酵母菌中，若X，Y蛋白在酵母内发生交互作用，则相当于将GAL4的BD和AD又连在一起，即可以转录激活下游报告基因的表达，通过测定报... 阅484 转16 评0 公众公开 12-03-15 15:24 |
gus基因检测gus基因检测 gus基因就是转β-葡糖醛酸酶基因 该基因产物为GUS 蛋白质，相当稳定而不易降解，并为一水解酵素，有简易的测定方法；作用原理：gus基因表达出GUS，在适宜条件下该酶可将X-Gluc水解生成蓝色物质，初始产物并不带颜色，为无色的吲哚衍生物，后经氧化二聚作用形成5,5’-二溴-4,4’-二氯靛蓝染料，此靛蓝染料使具有Gus... 阅2948 转25 评0 公众公开 11-12-17 17:53 |
阅156 转5 评0 公众公开 11-12-16 20:17 |
常见启动子。调控手段（浓度）LacUV5.乳糖操纵元。lacI/IPTG (0.1-1mM)色氨酸操纵元。trpR 3-β-吲哚丙烯酸。结合了色氨酸启动子的-35序列和乳糖启动子的-10序列。PL.λ噬菌体。λcI阻遏物/温度。噬菌体T5.T5噬菌体。阿拉伯糖操纵元。AraBAD/阿拉伯糖（1μm-10mM）T7.T7 RNA聚合酶。非常强。 阅2483 转12 评0 公众公开 11-12-16 19:54 |
TA克隆。但因为TA克隆法操作最简单，快速和高效的原因，成为Taq聚合酶PCR产物的最佳克隆方法。Invitrogen公司TA克隆系统和Topo TA克隆系统都提供一个线性含3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR产物。所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物，不需将PCR产物进行优化，不需把PCR产物做平端处理（Invitrogen另有平端载体供高确限度酶克隆）。 阅5594 转26 评0 公众公开 11-12-16 19:33 |
由于大肠杆菌本身不含T7 RNA 聚合酶，需要将外源的T7 RNA 聚合酶引入宿主菌，因而T7 RNA 聚合酶的调控模式就决定了T7系统的调控模式——非诱导条件下，可以使目的基因完全处于沉默状态而不转录，从而避免目的基因毒性对宿主细胞以及质粒稳定性的影响；然后用λCE6噬菌体侵染宿主细胞——CE6是lambda噬菌体含温度敏感突变(cI857ts)和pL/pR启动子... 阅290 转20 评0 公众公开 11-12-16 19:27 |
