| 共 14 篇文章 |
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一、问题：RT-PCR灵敏度：在琼脂糖凝胶分析中看到少量或没有RT-PCR产物。在用来验证完整性之前先在变性胶上分析RNA使用良好的无污染技术分离RNA；将对照RNA同样品混合，同对照RNA反应比较产量以检验抑制剂。对于＞1kb的RT-PCR产物，保持反应温度<=65℃。7．引物或模板对残余的RNA模板敏感。对两步法RT-PCR，不要在PCR步骤中使用超过1/5的逆... 阅441 转12 评0 公众公开 10-10-19 02:12 |
问:我有一个问题请教，RT-PCR要求模板RNA的260nm/280nm的比值最低为多少，如果太低是不是会影响结果？【经验】如何确认RNA的质量各位都知道，提取到质量良好的RNA（包括总RNA和mRNA，以下同）是非常困难，关于RNA的提取技术，我就不说了，为什么呢？如果两者的条带一致或者无明显差别（当然，它们的条带也要符合方法2中的条件），则说明RNA溶液... 阅475 转14 评0 公众公开 10-10-19 02:10 |
在所有RNA实验中，最关键的因素是分离得到全长的RNA。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解，而所制备的RNA的纯度和完整性又可直接影响RNA分析的结果，所以RNA的制备与分析操作难度极大。四、如何确认RNA的质量各位都知道，提取到质量良好的RNA（包括总RNA和mRNA，以下同）是非常困难，关于RNA的提取技术，我... 阅445 转15 评0 公众公开 10-10-19 02:08 |
RT-PCR实验有三步：抽提RNA，RT，PCR。后来考虑到本人的克隆的PCR的片断位于我们实验另一位同学克隆的片断当中，而该同学已经用RT-PCR克隆出她的片断（尽管她用这些ＲＴ－ＰＣＲ产物做模版再进行ＰＣＲ时也没办法重复出她的产物），因此，我先用她的引物和条件扩增出她的片断，然后用她的ＲＴ－ＰＣＲ产物作模板（有点改进，逆转录反应换用了９... 阅1146 转35 评0 公众公开 10-10-19 02:04 |
Imagepro plus操作7 - 计量，关于标尺的操作 -资料-中国显微图像网。在图像分析过程中，程序只能处理象素，要把象素值转换成实际物体的长度与面积，就必须告诉程度：一个象素对应着多大的实际尺寸呢？IPP关于标尺的操作有两项内容：一是校正标尺，就是告诉程序，一个象素相当于实际上的长度尺寸。所以不必把微标尺放在切片上，也没法放，而是单... 阅999 转2 评0 公众公开 10-10-02 21:26 |
科研工作常用软件。4. 质粒绘图软件：Vector NTI和DNAMAN其实也可以画，但是不如下面这几个来的专业或方便：SimVector 4，与Primer Premier同一家公司的软件，画质粒的一个软件，效果还行，与VectorNTI画出来的风格不一样，有的杂志喜欢；Allele ID 6.0/Beacon Designer 7.0，RT-PCR设计软件，与Primer Premier同一家公司的软件，软件界面非常... 阅1318 转24 评0 公众公开 10-09-06 11:34 |
