腺苷受体参与糖尿病创面愈合与瘢痕形成的信息传递和调控方面开展研究

1、项目的立项依据
烧伤的细胞、组织释放大量腺苷。腺苷受体A2A激动剂在创面愈合方面的细胞和组织的作用仅在近些年才被人们发现。新近研究表明局部应用腺苷受体A2A激动剂可促进创面愈合。（点评：言语很简练，但是三句话可以融合成一句。A点：A2A与创面愈合相关）糖尿病患者烧伤创面一直是临床治疗难题。毛细血管基底膜增厚,局部缺血、缺氧等诸多因素导致了糖尿病创面愈合延迟1。糖尿病创面愈合与瘢痕形成的分子生物学机理仍不清楚。（点评：B点：糖尿病的创面愈合延迟与过度的机理有待解决）本课题拟对腺苷受体参与糖尿病创面愈合与瘢痕形成的信息传递和调控方面开展研究，有利于临床合理开展难愈创面修复和瘢痕防治工作。（点评：提出问题：A与B相关）就个人体会而言，此立项依据写的很精练，但句子之间衔接稍欠周密，不知道这是否是最终版，另外个人推测陆树良教授可能是当年的评委。
1.1 腺苷受体与炎症反应
机体烧伤受损后,大量炎性细胞趋化至创面，起初是中性粒细胞，接着是单核巨噬细胞和淋巴细胞，起到清除坏死组织和预防细菌严重感染的作用。炎性细胞还释放一系列炎性介质，在一些病理环境下，持续或过度的炎性反应可以影响创面愈合。本课题组曾用放射免疫分析法检测烧伤休克期淋巴液中肿瘤坏死因子TNF-α、白介素IL-6、IL-8水平，发现烧伤后6 h开始TNF-α、IL-6 、IL-8升高，24 h达到高峰。本课题组前期研究结果表明：烧伤后2小时淋巴液内毒素开始升高，提示严重烧伤后于第三间隙异常贮留的高内毒素含量的水肿液, 大量进入淋巴循环，并最终成为内毒素血症的主要来源之一。
腺苷在缺血、炎症等损伤的细胞、组织释放，通过A2A 受体抑制调节中性粒细胞、巨噬细胞功能，此信号转导机制与cAMP有关，且仅在TNF或内毒素激活的中性粒细胞上发生2,3。本课题拟探讨腺苷受体激动剂对烧伤后炎症反应的抑制作用。（腺苷写的很突兀，腺苷的释放与烧伤后的时间变化有无联系等均未提及，并且相比第一段最后一句，本段最后一句在缩小研究范围）1.2 腺苷受体对血管新生和内皮细胞功能的影响
本课题组前期研究利用扫描电镜观察发现,烧伤后内皮细胞的损伤程度与病变的发展程度呈正相关。伤后24h，肠系膜淋巴管内皮细胞出现轻度损伤,伤后48h，肠系膜淋巴管内皮细胞出现损伤加重, 内皮细胞肿胀, 内皮细胞间为纵横交错的纤维蛋白所网络，细胞间隙较大,细胞连接消失。由此可认为淋巴管内皮细胞的损伤是淋巴循障碍发病机理的始动环节之一。
早期研究利用证实培养的人（脐静脉）内皮细胞表达所有4种腺苷受体信息，已有体外试验证实腺苷受体激活有潜在的促进血管新生的作用，其机理可能与腺苷A2A 受体激动剂对抗血管生成基质蛋白血小板反应素TSP1的下调作用有关4。而遗传上A2A 受体敲除小鼠在创面愈合过程中微血管数量显著减少。本课题拟探讨腺苷特异性A2受体对内皮细胞增殖、迁移的促进作用及其对转化生长因子TGF-β和血管内皮细胞生长因子（VEGF）的影响。（A2，似乎省掉了后面一个A）
1.4腺苷受体与成纤维细胞及瘢痕形成
本课题组前期研究发现腺苷可以通过刺激胶原合成而促进创面愈合，反之，利用腺苷受体拮抗剂可以减轻硬皮病实验动物模型中皮肤胶原纤维增生硬化5。本课题组前期成功利用扩张螺丝在小鼠背部创面愈合后定期增加张力，制作出增生性瘢痕模型，相比传统的兔耳瘢痕与裸鼠瘢痕模型，能更深入地进行如基因敲除，基因治疗等深层次的分子生物学研究。本课题组前期研究发现腺苷A2A 受体基因敲除小鼠在相同张力下，瘢痕显著减轻，而且瘢痕组织转化生长因子-β（ TGF-β）、结缔组织生长因子（ CTGF）、基质金属蛋白酶2、9、13(MMP2、9、13)和金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP3) 等细胞外基质(ECM)调控相关因子表达显著降低。
故本课题下一步拟探讨腺苷受体拮抗剂ZM241385对增生性瘢痕实验动物模型和体外培养成纤维细胞的影响，研究 TGF-β、CTGF、 MMP2、9、13、 TIMP3表达的改变（ZM241385与A2A敲基因效果有无比较？因为都是抑制A2A的表达或作用，如果一致的话，感觉就是用ZM241385换敲基因模型，而其余的地方就是把原来的工作重复一遍，前面提及研究A2A激动剂对烧伤后炎症反应的抑制作用，为何此处又变成了拮抗剂？）。有利于临床合理开展难愈创面修复和瘢痕治疗预防工作。（立项依据中写的探讨A2A与糖尿病患者烧伤创面的关系，为何此处没有提及？）

个人总结：如果这是一份中标的标书，我认为可能是原始版，而非最终版本。从立项依据、选题到设计，有许多值得大家学习和借鉴的地方。就该课题本身而言，可以有三个很好的闪光点，或许就是三篇SCI：1）借助机械应力制造小鼠瘢痕模型，除了斯坦福一个小组利用口腔科的钛合金架这样成功制作外，尚未有更多的人尝试过；2）利用A2A敲基因小鼠探讨A2A与创伤愈合的关系，也是比较新的吧；3）A2A抑制剂对创面愈合的影响。总之，标书的写法值得大家仔细学习。个人意见，仅供参考，不当处，请批评指正。