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分光光度计的使用方法 一、实验原理 吸光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法。其理论基础是光的吸收定律——朗伯-比尔定律： A=Kdc 当液层厚度d以cm，吸光物质浓度c以mol?L－1为单位时，系数K就以ε表示，称为摩尔吸光系数。朗伯-比尔定律表示为： A=εdc 二、仪器介绍 吸光光度法具有较高的灵敏度和一定的准确度，特别适合于微量组分的测量。 吸光光度法操作简便、快速、适用范围广，在分析化学中占有重要的地位。 吸光光度法的主要仪器是分光光度计，其主要结构如下： 光源 单色器 比色皿 光电元件 输出装置 7220型分光光度计是较为常用的一种数字显示分光光度计。 它以碘钨灯为光源，光栅为色散元件。可用波长范围是330~800nm，波长精度2nm，波长重现性为0.5nm，单色光带宽6nm，吸光度显示范围为0~1.999，吸光度的精度为0.004(A=0.5)，试样架可置四个吸收池。 1、样品室门 2、显示窗 3、波长显示窗 4、波长调节旋钮 5、电源开关 6、操作键区 7、样品池拉手 操作键区面板从左至右： 1、方式选择 2 、100%T、ABS 0 3、 0%T 4、 选标样点 5、 置数加 6、 置数减 7、 确认 8、 打印 三、仪器使用方法 1、开机 安装好仪器后，检查样池位置，使其处在光路中（拉动拉手应感应到每档的定位），关好样品室门，打开仪器电源开关，预热10分钟，即可进行测量。 2、打开样品室门，将方式定于透过率档，按0%T进行机械调零。 3、从蒸馏水中取出比色皿，擦干。注意拿比色皿的时候拿毛玻璃面。向比色皿内注入少量试液，润洗三次，然后注入3/4至4/5的试液，用滤纸片擦干外壁所挂水珠。 将比色皿按顺序放入样品池。注意光面对光源。 4、在样品池中放置空白液与样品 5、按需要调节波长旋钮，使显示窗显示所需波长。 6、使空白溶液位于光路中，按方式选择键使吸光度指示灯亮，按100%T键调100%，至窗口显示100%。 7、打开样品室门，将功能调于透射比档，观察显示是否为0.0，若否则按0%T键调零。调零后再放回吸光度档。 8、重复上两步，直至仪器稳定。 9、将样品置入光路，从显示屏上读取吸光度。 用7220型分光光度计可以直接测出样品浓度。 测定采用工作曲线法，曲线由仪器自动生成，并自动给出样品浓度。 |
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