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作者单位： 裘宇容 杨春莉 (第一军医大学南方医院检验科，广州，510515)；洪军 (第一军医大学南方医院康复科，广州，510515）
关键词： 关键词：剥夺睡眠；免疫功能
摘 要：
摘要：目的 探讨睡眠与免疫功能的关系。方法 采用流式细胞仪和单向琼脂扩散法对20例军校学员进行了剥夺睡眠48 h后细胞免疫和体液免疫功能的测定。结果 剥夺睡眠48 h后，T细胞亚群CD4、CD8以及免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和补体C3、C4的含量与剥夺睡眠前相比无显著性差异（P>0.05），NK细胞值则显著降低（P<0.01）。结论 剥夺睡眠48 h对人体免疫功能有影响，睡眠与免疫功能有关。
中图分类号：R446
Effects of sleep deprivation on human immune function
Qiu Yurong，Yang Chunli
(Department of Medical Laboratory，Nanfang Hospital，First Military Medical University，Guangzhou，510515)
Hong Jun
(Department of Medical Rehabilitation，Nanfang Hospital，First Military Medical University，Guangzhou，510515)
Abstract：Objective To study the relationship of sleep to immune functions．Method The effect of 48 h sleep deprivation on some immune function of 20 military students was studied by flow cytometer and simple agar diffusion test．Result 48 h sleep deprivation led to decreased the percentage of NK cells significantly，but the percentages of CD3、CD4、CD8 and contents of immunoglobulin IgG、IgA、IgM and complements C3、C4 was unaffected．Conclusion Sleep deprivation can affect on human immune function and sleep is associated with immune function.
Key words：sleep deprivation; immune function
为研究睡眠与免疫功能的关系，观察了20例军校学员剥夺睡眠48 h后T细胞亚群、NK细胞、免疫球蛋白及C3、C4补体的变化，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 研究对象 军校学员20例，男性，平均年龄20岁，身体健康。
1.2 研究方法 实验连续4 d。第一天为正常的昼夜节律，第二天早晨6:00时抽取外周静脉血进行免疫功能的检测，并以此检测结果作为剥夺睡眠前的对照。自第二天早晨至第四天早晨，受试者不睡眠，期间进行脑电图、肌电图、心电图的检测，并参加一系列活动如看书、看电视、看录像、打牌及一些体育活动。第四天早晨6:00抽取外周静脉血进行免疫功能的检测，并以此为剥夺睡眠后的检测结果。研究期间，受试者禁酒、禁烟、禁喝咖啡。
1.2.1细胞免疫的检测 于两只试管中分别加入100 μl的抗凝静脉血，再分别加入20 μl的双标记单克隆抗体CD3/NK，CD4/CD8（购于法国国际免疫公司），室温避光孵育20 min，加入红细胞溶解液500 μl，充分溶解20 min后，以1200 r/min的速度离心5 min，去上清，PBS缓冲液冲洗2次，最后以0.5 ml的PBS缓冲液使细胞悬浮，流式细胞仪（Coulter）分析。
1.2.2 体液免疫的检测 采用单向琼脂扩散法。单扩板购于北京华夏科海医用检验试剂有限公司。
2 结果
2.1 细胞免疫 剥夺睡眠后T淋巴细胞总数CD3，T细胞亚群CD4稍有升高，CD8降低，与剥夺睡眠前相比无显著性差异（P>0.05）；NK细胞值明显低于剥夺睡眠前（P<0.01）。
2.2 体液免疫 剥夺睡眠后免疫球蛋白IgG、IgM、补体C4升高，免疫球蛋白IgA、补体C3降低，与剥夺睡眠前相比无显著性差异（P>0.05）。
3 讨论
睡眠在人类健康与疾病作用中的研究近年来已经取得很大进步，但睡眠的功能仍不是很清楚。剥夺睡眠是研究睡眠功能的一种方法.早在1979年Palmblad等[1]对健康人群进行了64 h的剥夺睡眠的研究，发现在64 h的剥夺睡眠后受试者对PHA的反应减弱，但内分泌功能正常，血浆皮质醇水平正常。Moldofsky等[2]对10例健康人进行了剥夺睡眠40 h的细胞免疫功能的观察,发现剥夺睡眠40 h期间，受试者对PWM（一种B细胞刺激因子）反应是逐渐升高的，NK细胞活性是逐渐降低的，而对PHA（体外T细胞刺激因子)分裂原的反应不受影响，由此认为T细胞活性或某些T细胞亚群功能不易受40 h的剥夺睡眠的影响。NK细胞活性降低，细胞数目减少，恢复睡眠后，NK细胞活性逐渐恢复正常。作者观察了20例军校学员剥夺睡眠48 h后的细胞免疫和体液免疫，结果显示：NK细胞值显著降低,T细胞亚群和体液免疫功能没有显著性改变,说明短期剥夺睡眠，受影晌的是NK细胞，而T细胞亚群和体液免疫功能不受影响，但随着剥夺睡眠时间延长，T细胞亚群和体液免疫功能是否会改变有待于进一步研究。
研究表明[1,3]，剥夺睡眠期间血浆皮质醇昼夜节律水平不变。在剥夺睡眠的研究期间，受试者无精神紧张，说明剥夺睡眠期间NK细胞数目、活性的降低，以及对PWM的反应升高不是内分泌功能改变引起，而是剥夺睡眠本身引起的变化，说明剥夺睡眠对人体免疫功能有影响，从而也说明睡眠与免疫功能密切相关。
NK细胞是一种自然杀伤细胞，它不需要抗体存在，不受MHC限制，可直接杀伤某些肿瘤细胞或病毒感染的细胞。NK细胞数目减少,功能降低对剥夺睡眠48 h的人体没有重大影响,但较长时期的剥夺睡眠,是否容易导致人体发生感染性疾病,目前未见文献报道，但是对大白鼠长期剥夺睡眠的实验研究显示：长期剥夺睡眠后，大白鼠皮肤潰烂,2～4周后死于菌血症，死后尸解未发现组织形态学和病理学的改变。我们推测大白鼠的死亡可能与NK细胞数目减少,功能降低及其它免疫功能相继紊乱有关,长期剥夺睡眠的人体肯定也如此。
作者简介：裘宇容，女，1963年出生，1988年毕业于第一军医大学，硕士
参考文献
1 Palmblad J，Petrini B，Wasserman J et al．Lymphocyte and granulocyte reactions during sleep deprivation．Psychosom Med，1979,41:273
2 Moldofsdy H，Leu FA，Davidson JR et al．Effects of sleep deprivation on human immune function．FASEB J,1989,3:1972
3 Carol AE．Sustained sleep deprivation impairs host defense．Am J Physiol，1993,265:R1148
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