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几种常用离子去垢剂的使用

 sundaefeng 2011-10-04

Triton X-100是一种非离子型去垢剂,

分子式C14H22O(C2H4O)n

用途Triton X-100是一种比较温和的去垢剂(表面活性剂或称界面活性剂),常作为添加剂使蛋白保持稳定,尤其是膜蛋白。

性质

1. Triton X-100对细菌等微生物没有杀伤作用。
2. Triton X-100
在紫外波段下有光吸收(lambda max = 275 nm and 283 nm in methanol),因此,当缓冲液中存在Triton X-100时不能通过测定280nm光吸收来进行蛋白定量。
3. Triton X-100
常与CHAPSzwitterionic 去垢剂一起使用来纯化膜蛋白,使膜蛋白保持其天然构象。
4.Triton X-100
可以提高真核细胞细胞膜的通透性,因此在Immunostaining时常使用含 0.1%-0.5%Triton X-100PBSTBS
5. Triton X-100
非常稳定,密封避光 +2 to +8℃条件下可以长期保存。
6.Triton X-100
是透明,略显粘稠,稍微发黄的液体。
7. Triton X-100
的密度为1.07 g/mlpH6.0-8.05%的溶液)。
8. Triton X-100
可以高压灭菌。
9.
Triton X-100来裂解细胞时,0.1% Triton X-100就足够了,不过,达到0.5%时也没问题。
10.
蛋白酶K在含1% Triton X-100的溶液中依然保持活性。
11.
可以使用Amberlite hydrophobic XAD resins and Rezorian A161 cartridges 来去除Triton X-100

Tween:

吐温是(TWEEN)的音译,也叫吐温型乳化剂,为司盘(Span,山梨醇脂肪酸酯)和环氧乙烷的缩合物,为一类非离子型去污剂,于聚山梨酯分子中有较多的亲水性基团一聚氧乙烯基,故亲水性强,为一种非离子型去污剂

1.生物学实验中乳化蛋白,在使用时,Tween 和同类型的Triton X-1OO(聚乙二醇辛基苯基醚)非离子型去污剂不破坏蛋白的结构,可减少对蛋白质之间原有的相互作用的破坏。离子型去污剂如SDS则破坏蛋白的结构。

2. 在生物学实验中作封闭剂,封闭剂应该封闭所有未结合位点而不替换膜上的靶蛋白、不结合靶蛋白的标委、也不与抗体或检测试剂有交叉反应。Tween-20有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力。在做westen blot时,用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点,可以降低抗体的非特异性结合。最常见的封闭剂是BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶和Tween-200.05 – 0.1%)稀溶液。

3.常作为水包油(O/W)型乳化剂,使其他物质均匀在溶液中分散,主要用于农药、食品、化妆品。与其他乳化剂如月桂醇硫酸钠或司盘类合用,能增加乳剂的稳定性。吐温可用来使精油乳化后溶解于水液体中,完全发挥作用。相对来说,吐温20更温和一些,吐温80的乳化性更强一些

4.药用:
1)可作某些药物的增溶剂。
2)有溶血作用,以吐温-80作用最弱。
3)水溶液加热后可产生混浊,冷后澄明,不影响质量。
4)在溶液中可干扰抑菌剂的作用。

Tween20的溶液不可以灭菌,尤其溶液中还存在金属离子时。Tween20对加热比较敏感,温度升高时,颜色会变黑。

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