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细胞裂解液是以去污剂为基础、针对细胞裂解应用、成分优化的缓冲液和试剂。对于不同细胞类型、蛋白定位、以及下游应用，需要不同的细胞裂解液进行有效的细胞裂解和蛋白提取。 去污剂主要类型及其作用根据去污剂类型、蛋白定位、及目的蛋白性质来确定细胞裂解液的种类。 去污剂主要类型及其作用 ▼ ▲
类型
带电情况
作用
应用
举例
离子型
(变性去污剂) 带电荷的
阴离子性或阳离子性的 破坏蛋白活性、功能及蛋白间相互作用力
总蛋白提取
SDS-PAGE SDS
ETMAB 非离子型
(非变性去污剂) 不带电荷
较少破坏活性及功能，可维持蛋白间作用力
酶学检测
免疫检测 Triton X-100
Tween 20 NP-40 两性离子型
具有正电荷和负电荷的基团
但净电荷为零 兼具离子型和非离子型去污剂的特点，能破坏蛋白质间相互作用
CHAPS
CHAPSO 根据蛋白定位不同推荐的裂解液种类 ▼ ▲
蛋白定位
全细胞
细胞质
（可溶性蛋白） 细胞质
（细胞骨架等不溶性蛋白） 细胞膜
细胞核
线粒体
裂解液种类
NP-40或RIPA
Tris-HCl
Tris-Triton
NP-40或RIPA
RIPA
RIPA
常用细胞裂解液#RIPA缓冲液 最初以其开发的测定方法(放射免疫沉淀测定法)来命名，是两种离子去污剂和一种非离子去污剂的Tris缓冲液,也是哺乳动物细胞或软组织裂解和蛋白提取的常用选择。 常用配方： 25 mM Tris-HCl, pH 7.6 150 mM NaCl 1% NP-40 1%去氧胆酸钠 0.1%十二烷基硫酸钠(SDS) 兼容应用： BCA及去污剂兼容型的Bradford试剂蛋白浓度测定、SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹、ELISA及纯化等。 #IP缓冲液 是一种修饰型的RIPA缓冲液（不含SDS），可有效溶解细胞蛋白，但无法释放基因组DNA或破坏蛋白复合物，可兼容下游的免疫沉淀或者亲和吸附的应用。 常用配方： 25 mM Tris-HCl, pH 7.4 150 mM NaCl 1% NP-40 1% mM EDTA 5% 甘油 兼容应用： BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀及报告基因检测。 #NP-40缓冲液 NP-40是一种非离子型聚氧乙烯表面活性剂，常作为细胞裂解缓冲液或其他用于提取和溶解蛋白质的溶液的组分。 常用配方： 150mM NaCl 1.0% NP-40 50mM Tris-HCl，pH值8.0 兼容应用： BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀。 #Tris-Triton缓冲液 非离子型表面活性剂，常用作细胞裂解缓冲液或其他用于提取和溶解蛋白质的溶液。Trition X-100效果介于NP-40和SDS之间。 常用配方： 10mM 三羟甲基氨基甲烷(Tris)，pH值7.4 100mM NaCl 1mM EDTA 1mM EGTA 1% Triton X-100 10% 甘油 0.1% SDS 0.5% 去氧胆酸钠 兼容应用： BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀。 产品列表▼ ▲
产品号
产品名称
规格
Cas
包装
发布日期：2020/12/14 10:14:06 |
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