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一、有关酶 1、限制酶： 识别双链DNA分子某种特定的核苷酸序列，在DNA每一条中的特定部位两核苷酸之间的磷酸二酯键切割。 2、DNA连接酶： 连接的是DNA片段，恢复的是被限制酶切开的磷酸二酯键。 3、DNA聚合酶： （1）在DNA复制过程（或在PCR等生物体外合成DNA）中起作用。 （2）需要以解开的DNA每一条链为模板。 （3）向引物或非模板链DNA单链片段上加单个的脱氧核苷酸，形成磷酸二酯键。 （4）在PCR技术中要用热稳定DNA聚合酶。 4、RNA聚合酶： （1）在转录过程中起作用。 （2）识别DNA基因上的启动子，并与之结合，然后开始转录过程。 （3）要以DNA的一条链为模板，形成的是RNA。 5、逆转录酶： （1）以RNA为模板先在逆转录酶的作用下形成一条DNA单链（此时RNA单链与DNA单链互补-----即DNA与RNA杂交分子。） （2）用RNA酶将RNA水解，剩下DNA单链。 （3）以DNA单链为模板，DNA聚合酶作用下形成双链DNA分子。 6、DNA酶： 把DNA水解成脱氧核苷酸的酶。 二、DNA探针 1、以一段已知目的基因片段为模板合成的。 2、用荧光或放射性同位素等标记。 3、检测目的基因或目的基因转录产物RNA。 三、黏性末端 1、被限制酶切割后长出的部分就是黏性末端。 2、两黏性末端如果碱基序列相同（也就是互补），就称为相同的黏性末端或互补的黏性末端。 3、同种限制酶从中轴线两侧切开所形成的末端一定进相同的黏性末端。不同的限制酶切开后形成的末端有可能相同，也可能不同。 四、抗生素基因和抗生素抗性基因 1、抗生素基因： 抗生素基因表达成功的细胞，能产生抗生素。如青霉素基因就是抗生素基因，细胞中如果有该基因并能表达，则能产生青霉素。青霉素就是一种抗生素。 2、抗生素抗性基因： 抗生素抗性基因表达成功的细胞，对相应抗生素有抗性。如有的细胞有抗青霉素基因，则该基因在细胞表达成功后，该细胞不会被青霉素杀死，也就是对青霉素有抗性。抗青霉素基因就是一种抗生素抗性基因。 五、载体的作用和条件 1、作用： 将目的基因导入受体细胞，在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达并发挥作用。 2、条件： （1）有限制酶切点，供外源基因插入其中。 （2）带上目的基因进入受体细胞后，在细胞中进行自我复制，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行同步复制。 （3）有特殊标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 六、获取目的基因的方法 1、从基因文库中获取。 2、人工合成。 3、用PCR技术进行扩增。
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