太子参连作障碍及其分子生态学机制研究

• 摘要10-13
• Abstract13-18
• 引言18-19
• 第一章 研究综述19-28
• 1 化感作用与连作障碍19-20
• 1.1 化感作用19
• 1.2 连作障碍19-20
• 2 植物化感作用与连作障碍研究近况20-25
• 2.1 植物化感作用研究近况20-21
• 2.2 连作障碍研究近况21-25
• 2.2.1 中药材连作障碍表现的研究21-22
• 2.2.2 化感作用物质的分离与鉴定22-24
• 2.2.3 根际土壤微生物的调查分析24
• 2.2.4 连作障碍克服的研究24-25
• 3 连作障碍研究存在的问题25-27
• 3.1 连作障碍分子机理研究方面25
• 3.2 自毒物质提取分离方面25-26
• 3.3 连作障碍中土壤微生物调查分析方面26
• 3.4 连作障碍研究的总体思路方面26-27
• 4 本研究的目的与意义27-28
• 第二章 太子参连作的自毒作用研究28-50
• 1 太子参根际土壤生物毒性测试28-38
• 1.1 材料与方法28-30
• 1.1.1 材料28
• 1.1.2 试验方法28-30
• 1.1.2.1 自毒物质（Autotoxins）粗提取28-29
• 1.1.2.2 自毒物质提取与纯化29
• 1.1.2.3 生测29
• 1.1.2.4 太子参盆栽自毒测试29-30
• 1.1.2.5 统计分析30
• 1.2 结果与分析30-34
• 1.2.1 太子参根际土壤粗提物的生测结果与分析30-33
• 1.2.2 太子参根际土壤提取纯化物生测结果与分析33
• 1.2.3 根际土壤提取纯化物对太子参光合作用系统的毒害作用33-34
• 1.3 讨论34-38
• 1.3.1 太子参根际土壤物质的化感作用34-36
• 1.3.2 太子参光合作用参数与化感自毒作用36-38
• 2 连作对太子参光合作用系统、产量与品质的影响38-45
• 2.1 材料与方法38-41
• 2.1.1 试验地确定38
• 2.1.2 试验材料38
• 2.1.3 盆栽模拟连作与光合及荧光动力学参数测定38-39
• 2.1.4 大田试验与产量测定39
• 2.1.5 太子参品质测定39-41
• 2.1.5.1 人参皂苷含量的测定40
• 2.1.5.2 多糖含量测定40-41
• 2.2 结果与分析41-43
• 2.2.1 连作对太子参光合作用系统的影响41
• 2.2.2 连作对太子参产量的影响41
• 2.2.3 连作对太子参品质的影响41-43
• 2.3 讨论43-45
• 2.3.1 光合作用系统与连作障碍43-44
• 2.3.2 连作与产量及品质44-45
• 3 连作对太子参根和叶显微结构的影响45-49
• 3.1 材料与方法45-46
• 3.1.1 材料45
• 3.1.2 方法45-46
• 3.1.2.1 盆栽试验45
• 3.1.2.2 石蜡包埋切片制作步骤45-46
• 3.1.3 显微拍摄46
• 3.2 结果与分析46-48
• 3.2.1 连作对太子参叶的显微结构的影响46-48
• 3.2.2 连作对太子参根的显微结构的影响48
• 3.3 讨论48-49
• 3.3.1 石蜡包埋切片技术的应用与生态学研究48
• 3.3.2 植物营养器官的显微结构与连作障碍48-49
• 4 本章小结49-50
• 第三章 太子参连作障碍的叶片差异蛋白质表达分析50-67
• 1 材料与方法51-54
• 1.1 材料51
• 1.2 方法51-54
• 1.2.1 蛋白质提取51-52
• 1.2.2 蛋白裂解52
• 1.2.3 蛋白质浓度测定52
• 1.2.4 蛋白质双向电泳52-53
• 1.2.4.1 第一向[等电聚焦（IEF）]电泳52
• 1.2.4.2 第二向电泳（SDS-PAGE）52-53
• 1.2.5 银染53
• 1.2.6 蛋白质图谱和差异蛋白质点的确定53
• 1.2.7 差异蛋白质点质谱分析53
• 1.2.8 质谱结果查询和差异蛋白质鉴定53-54
• 2 结果与分析54-62
• 2.1 盆栽模拟水旱轮作与连作太子参叶片蛋白质图谱的构建与差异比较54-55
• 2.2 模拟连作与水旱轮作太子参蛋白质差异表达分析55-62
• 3 讨论62-65
• 3.1 光合相关蛋白与太子参连作障碍62
• 3.2 抗性相关蛋白与太子参连作障碍62-63
• 3.3 植物病害或衰老相关蛋白与太子参连作障碍63-64
• 3.4 植物能量、细胞分裂等代谢相关蛋白与太子参连作障碍64-65
• 4 本章小结65-67
• 第四章 太子参根际土壤物质提取、分离与鉴定67-78
• 1 材料与方法67-68
• 1.1 材料67
• 1.2 土壤物质提取与纯化67-68
• 1.3 GC-MS 分析68
• 2 结果与分析68-69
• 2.1 太子参根际土壤物质成份68
• 2.2 对照土壤物质成份68
• 2.3 太子参根际土壤与对照成份比较68-69
• 3 讨论69-77
• 3.1 化感作用物质及其作用机理69-75
• 3.2 化感作用物质的收集、分离和鉴定75-77
• 4 本章小结77-78
• 第五章 太子参连作根际土壤微生物变化趋势研究78-109
• 1 太子参连作对根际土壤可培养性微生物区系变化趋势的影响78-87
• 1.1 材料与方法78-83
• 1.1.1 材料78
• 1.1.2 试验地点78-79
• 1.1.3 实验步骤79
• 1.1.3.1 根际土壤采集79
• 1.1.3.2 根际土壤悬液的配制79
• 1.1.3.3 烘干土样79
• 1.1.3.4 制备土壤稀释液79
• 1.1.4 微生物的分离计数与培养79-81
• 1.1.4.1 细菌的测定80
• 1.1.4.2 放线菌的测定80
• 1.1.4.3 真菌的测定80-81
• 1.1.5 微生物生理类群数量测定81-82
• 1.1.5.1 微生物计数方法81-82
• 1.1.5.2 阳性判断表82
• 1.1.5.3 测定方法82
• 1.1.6 数据分析82-83
• 1.2 结果与分析83-84
• 1.2.1 太子参连作根际土壤中三类微生物的数量变化83
• 1.2.2 太子参连作根际土壤生理性微生物数量变化83-84
• 1.3 讨论84-87
• 1.3.1 连作与土壤微生物数量变化84-86
• 1.3.2 连作与土壤生理性微生物类群86-87
• 2 应用t-RFLP 技术对太子参根际土壤微生物的调查研究87-108
• 2.1 材料与方法87-90
• 2.1.1 土壤87-88
• 2.1.2 土壤微生物多样性t-RFLP 分析88-90
• 2.1.2.1 土壤微生物总DNA 的提取和纯化88
• 2.1.2.2 细菌 16S rDNA 的 PCR 扩增与酶切88
• 2.1.2.3 真菌ITS 区的扩增和酶切88-89
• 2.1.2.4 t-RFLP 图谱的产生89
• 2.1.2.5 土壤微生物类群的获得89-90
• 2.1.2.6 土壤微生物多样性分析90
• 2.1.2.7 太子参根际土壤细菌种属与土壤毒性关系的主成份分析90
• 2.2 结果与分析90-101
• 2.2.1 土壤总DNA90
• 2.2.2 细菌16S rDNA 的扩增产物和真菌ITS 区的扩增产物90-91
• 2.2.3 细菌和真菌的酶切产物91-94
• 2.2.4 t-RFLP 图谱分析94-100
• 2.2.4.1 大田试验细菌HaeIII 和MspI 的t-RFLP 图谱分析94-95
• 2.2.4.2 盆栽试验细菌HaeIII 和MspI 的t-RFLP 图谱分析95-97
• 2.2.4.3 大田试验土壤真菌HinfⅠ酶切的t-RFLP 图谱分析97-99
• 2.2.4.4 盆栽试验土壤真菌HinfⅠ酶切的t-RFLP 图谱分析99-100
• 2.2.5 引起太子参连作障碍的主要土壤细菌种类100-101
• 2.3 讨论101-108
• 2.3.1 t-RFLP 技术与太子参连作障碍土壤微生物环境研究101-106
• 2.3.2 主成份分析方法与太子参连作障碍研究106-108
• 3 本章小结108-109
• 第六章 太子参根际与对照土壤差异蛋白质分析109-119
• 1 材料与方法109-110
• 1.1 材料109
• 1.1.1 土壤109
• 1.1.2 试剂109
• 1.2 土壤蛋白质提取方法109-110
• 1.3 土壤蛋白质裂解及浓度测定110
• 1.4 土壤蛋白质双向电泳110
• 1.5 银染110
• 1.6 蛋白质图谱和差异蛋白质点的确定110
• 1.7 土壤差异蛋白质点质谱分析110
• 1.8 质谱结果查询和差异蛋白质鉴定110
• 2 结果与分析110-111
• 2.1 太子参根际与对照土壤差异蛋白质图谱构建与差异比较110-111
• 2.2 太子参根际与对照土壤蛋白质差异表达分析111
• 3 讨论111-117
• 3.1 土壤中营养相关蛋白与太子参连作障碍111-116
• 3.2 细胞分裂、蛋白质合成等相关的土壤蛋白与太子参连作障碍116
• 3.3 抗性相关土壤蛋白与太子参种植116-117
• 3.4 其他类土壤蛋白与太子参种植117
• 4 本章小结117-119
• 第七章 结论与展望119-124
• 1 结论119-120
• 2 问题与展望120-122
• 3 本文的创新点122-124
• 参考文献124-138
• 发表与本研究相关的论文138-139
• 致谢139

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