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Tris是什么?有什么作用?Tris

 志比鸿鹄001 2012-04-06
Tris:三羟甲基氨基甲烷

三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般简称Tris)是一种有机化合物,其分子式为(HOCH2)3CNH2。Tris被广泛应用于生物化学分子生物学实验中的缓冲液的制备。例如,在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。由于它含有氨基因此可以与发生缩合反应
     Tris为弱碱,在室温(25下,它的pKa为8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。
Tris碱的水溶液pH在10.5左右,一般加入盐酸以调节pH值至所需值,即可获得该pH值的缓冲液。但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。

      由于Tris缓冲液为弱碱性溶液,DNA在这样的溶液中会被去质子化,从而提高其溶解性。人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸,则获得“TAE缓冲液”(Tris/Acetate/EDTA),而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”(Tris/Borate/EDTA)。这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。

【性能参数】
  
                                                                     
Cas号 【77-86-1】

MDL:

--MFCD00004679
Beilstein 741883

EINECS:

--201-064-4
分子式 C4H11NO3; NH2C(CH2OH)3
分子量 121.14
别名 缓血酸铵,三(羟甲基)氨基甲烷,2-氨基-2-(羟甲基)-1,3-丙二醇,氨丁三醇,三甲醇氨基甲烷,氨基丁三醇
2-Amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol
THAM
Tris base
Tris(hydroxymethyl)aminomethane
Trometamol                    
分子结构式

  性质:该品为
白色结晶或结晶性粉末。水溶液在空气中不吸收二氧化碳(阿拉丁网站所述),0.1mol/L水溶液pH10.4。对铜、铝有腐蚀作用。溶解度(:550 g/L水 (25°C),79.1MG/ML 乙二醇,26MG/ML 甲醇 (25°C),22.0MG/ML 95% 乙醇- 14MG/ML DMF (25°C),2.0MG/ML 丙酮,0.5MG/ML 乙酸乙酯(25°C),0.05MG/ML 氯仿,<0.05MG/ML CCL4 (25°C)。
熔点:170℃
沸点:219-220℃(10 mmHg)
  用途:有机合成中间体。在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的PH值。在凝胶中也起到稳定PH的作用,只不过是Tris-HCl缓冲体系。

      Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans核纤层蛋白lamin)的中间纤维的形成。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外,Tris还是制备表面活性剂硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。


常用Tris-HCl缓冲液配制:   
Tris-HCl(0.05mol/L,25℃)
  50ml 0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与x ml 0.1mol/L 盐酸混匀后,加水稀释至100ml
  pH           x/ml                     pH                      x/ml
  7.10          45.7                  8.10                   26.2
  7.20          44.7                  8.20                   22.9
  7.30          43.4                  8.30                   19.9
  7.40          42.0                  8.40                   17.2
  7.50          40.3                  8.50                   14.7
  7.60          38.5                  8.60                   12.4
  7.70          36.6                  8.70                   10.3
  7.80          34.5                  8.80                     8.5
  7.90          32.0                  8.90                     7.0


Tris分子量=121.14 ;0.1 mol/L溶液为12.114 g/L。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳(百度及其他网站所述),使用时注意将瓶盖严。配置不同浓度和不同PH值Tris-HCl缓冲液时,可以先配成一定PH值的0.05mol/L缓冲液,再稀释到所需浓度。

其他Tris-HCl配制

1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)
组份浓度  1 M Tris-HCl
配制量    1L
配制方法  1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。
            2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
            3.按下表加入浓HCl量调节所需要的pH值。
pH值        浓HCl
7.4        约70 ml
7.6        约60 ml
8.0        约42ml
4.将溶液定容至1 L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

1.5 M Tris-HCl (pH8.8)         
   组份浓度  1.5 MTris-HCl
配制量    1 L
配制方法  1.称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
            2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
            3.用浓HCl调节pH值至8.8。
            4.将溶液定容至1 L。
            5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

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