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观察类实验复习初探

 精彩教师之家 2012-04-12

观察和实验是研究生物学的重要方法。观察是指凭借人的感官直接对客观事物进行感知和描述,或者利用科学仪器和其他技术手段对客观事物进行考察。后者在观察过程中由于使用了显微镜等仪器和测量工具大大扩展了观察的范围,提高了对细小事物的分辨能力。在实验中,人们通过观察实验对象是什么,或在一定条件下发生了怎么样的变化,来感知生物体的成分和结构的存在,揭示生物体生命活动的规律。因此,观察类实验是生物研究中必不可少的重要手段,是学生必须掌握的一类重要的实验。

观察类实验要求选择适当的生物材料,确定合适的观察对象,采用恰当的观察手段和观察程序进行观察,最后明确观察结果。观察时从方位上看,一般采取先整体后局部,从外到内,由表及里,从左到右,从上到下的顺序进行观察;从方式上看,一般先用肉眼,再用放大镜,最后用显微镜。

高中教材中观察实验包括以下4个实验,具体内容如下表:

实验名称

观察手段

生物材料

观察对象

染色剂

观察结果

用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动

 

显微镜(装片)观察

藓叶

黑藻

叶绿体

叶片细胞中绿色、扁平的椭球形或球形的叶绿体且围绕液泡进行流动

观察植物细胞的质壁分离和复原

显微镜(装片)观察

洋葱鳞片叶表皮

紫色液泡

液泡体积缩小,颜色加深(质壁分离);液泡体积增大,颜色变浅(质壁分离复原);

观察植物细胞的有丝分裂

 

 

显微镜(压片)观察

洋葱根尖

染色体

碱性染料(龙胆紫和洋红)

染色体形态和位置

生物组织中油脂鉴定

显微镜(切片)观察

花生种子

脂肪滴

苏丹Ⅲ或Ⅳ

细胞中染成橘黄色或红色圆形小颗粒

在观察类实验中常综合运用显微镜观察技术、玻片标本制作技术和染色技术等。显微镜是生物学实验中经常使用的一种工具,适用于观察生物的微观结构。下面就显微镜观察技术作一总结性整理:

1、显微镜的构造

中学生物实验使用的是普通光学显微镜,其构造由光学系统和机械系统两大部分组成(如图所示)。光学系统包括物镜、目镜、反光镜(照明装置);机械系统包括镜座、镜柱、镜臂、载物台、压片夹、遮光器(聚光器)、镜筒、物镜转换器和调焦装置(粗准焦螺旋和细准焦螺旋)等。机械系统主要是保证光学系统的准确配置和灵活调控。

2、显微镜的成像原理及主要性能

1)成像原理

光源(天然光或人工光源)→反光镜→光圈→物体→物镜(凸透镜)→在镜筒内形成一个倒立放大的实像→目镜→把经物镜形成的实像进一步放大形成一个虚像。所以眼睛看到的是经2次放大的一个倒立的虚像。

2)分辨率

分辨率是指分辨被检物体细微结构的能力。通常用能分辨的两个物点间的最小距离来表示(分辨距离=0.61/N.A,入:光波长,N.A:物镜镜口率)。辨距离越小,分辨率越高,物象越清晰;分辨距离越大,分辨率越小,物象越模糊。对任何显微镜来说最重要的是他的分辨率,而不是放大倍数。

3)放大倍数

亦称放大率。物象的大小对物体大小的比例叫做显微镜的放大倍数。显微镜的总的倍数=目镜的放大倍数×物镜的放大倍数。该放大倍数指的是长度或宽度,而不是面积和体积。

4)视野及镜像亮度

视野是指一次所能观察到的被检标本的范围。视野的大小与放大倍数成反比,即放大倍数越大视野越小,看到的标本范围就越小;反之就越大。镜像亮度是指视野里所看到的像的亮暗程度。他与放大倍数成反比,即在光源一定的情况下,放大倍数越大,视野越暗。所以,在用高倍镜后用油镜观察标本时,必须移动标本才能看清楚其他部位,并使用凹面镜、大光圈或增强光源,,以改善视野亮度,而使物象明亮清晰。

3、显微镜的使用方法

取镜和安放:取镜时,一手握镜臂,一手托住镜座,将其轻轻地放在实验台的前方稍偏左的位置上。

对光:适的目镜和物镜。转动物镜转换器,使低倍镜对准载物台中央的通光孔。左眼从目镜中观察,同时调节反光镜直至视野明亮,均匀为止。

低倍镜观察:把所要观察的玻片标本放在载物台上(盖玻片一侧朝上),用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心,转动粗准焦螺旋,下降镜筒(或是升高载物台),从侧面观察,使物镜接近标本(但不能碰到玻片);左眼看目镜内,同时反向缓缓转动粗准焦螺旋,使镜筒上升(或是下降载物台),直到看到物象为止,再调节细准焦螺旋,至物象清晰。任何需要观察的标本都要先用低倍镜观察,原因是:a低倍镜视野相对大,便于找到目标不;b易调节,防止镜头与装片相碰。

高倍镜观察:在低倍镜下找到需高倍镜观察的部位并移到视野中央(因为低倍镜下看到的物象放大倍数小,但看到的标本的实际面积大,容易找到目标;与低倍镜相比,高倍镜下看到的物象大,同样的视野面积看到的标本的实际面积小,在玻片不动的情况下,高倍镜看到的只是低倍镜视野的中心部分)。移动装片时向预示相反方向移动;转动物镜转换器,移走低倍镜,换上高倍镜,稍微调节细准焦螺旋使物象清晰,调节光圈和反光镜,使视野亮度适宜。

观察后处理:用绸布或擦镜纸清洁显微镜上的污物。擦完后使物镜转离光轴,把反光镜转到载物台垂直的方向,罩上镜套,小心地放回镜箱内。

4、低倍镜和高倍镜的主要差异(见下表)

 

比较项目

目镜镜头长度

物镜镜头长度

物象大小

视野大小

观察细胞数目多少

视野亮度

物象清晰度

高倍镜

模糊

低倍镜

清晰

 

 

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