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众所周知，人类细胞可产生成千上万个不同的microRNA(miRNAs)，其中miRNAs是些小片段遗传物质，有助于确定特定时间打开或关闭哪一个基因。miRNAs是正常细胞功能的一个重要部分，但能促发人类疾病，如：特定肿瘤内的一些miRNAs被升高，则会促进细胞存活。为了更好地了解miRNAs如何影响健康与疾病，研究人员首先必须知道哪一个miRNAs作用于哪一个基因，考虑到miRNAs绝对数量与单个miRNA调控成百上千个基因的事实，这是一个很大的挑战。现在，有一种名为miR-TRAP的新方法问世，它使用方便，可直接鉴定细胞内miRNA靶标。 与现有鉴定miRNA靶标的方法相比，miR-TRAP更简单、更精确，主要理由有3个，分别是：首先，miR-TRAP可直接鉴定正常或疾病情况下活体细胞内的miRNA靶标；其次，不仅能识别出被miRNAs减少的mRNA靶标，也能识别翻译被抑制的蛋白质靶标，这一靶标通常不能被其他技术检测出来，如荧光定量PCR或芯片分析；第三，不依赖于抗体，因为抗体能导致非特异性背景信号和复杂数据解释。通过对2个重要miRNAs的13个预测靶标的分析，这项技术不但确认了已知的基因靶标，还揭示了2个新靶标。（生物谷bioon.com） miR-TRAP: A Benchtop Chemical Biology Strategy to Identify microRNA Targets Huricha Baigude, Ahsanullah, Zhonghan Li, Ying Zhou, Tariq M. Rana It′s a TRAP! microRNAs (miRNAs) are noncoding small RNAs that consist of approximately 21 nucleotides and are assembled into an RNA-induced silencing complex (RISC), which suppresses target mRNA expression. An easy-to-use method called miRNA target RNA affinity purification (miR-TRAP) directly identifies miRNA targets in vivo. This method could be widely used to discover miRNA targets in various disease models under physiological conditions. |
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