| HPLC故障排除 |
| 症状类型 | 可能的原因 | 解决方案 |
| 基线噪声大 | 随机性－ 污染物积聚冲 | 冲洗柱；净化样品；使用HPLC 级溶剂 |
| 连续性－ 检测器灯故障 | 更换紫外灯（寿命为1000 小时） |
| 偶然性－ 外部电气干扰 | 使用LC 系统专用稳压器 |
| 样品量过大 | 进样量应为流动相进样量的1/6 |
| 双峰 | 样品量过大 | 进样量应为流动相进样量的1/6 |
| 进样溶剂过强 | 使用较弱的进样溶剂或流动相 |
| 滤芯堵塞 | 更换并使用0.5 μm 孔隙率的在线过滤器 |
| 柱有空隙或气沟 | 用玻璃珠或填料填充空隙；重填柱 |
| 进样器流路不通畅 | 更换进样器转子 |
| 柱头有空隙 | 使用填料或玻璃珠填充柱顶部 |
| 柱上样品超载 | 使用更高负载量的固定相 增加色谱柱内径 减少样品量 |
| 单峰－ 存在干扰性组分 | 净化样品；预分离 |
| 拖尾峰 | 开始出双峰 | 请参见双峰 |
| 存在未扫的死体积 | 减少接头的数量 确保进样器密封垫紧密 确保接头正确固定 |
| 碱性化合物－ 硅醇相互作用 | 换成聚合物固定相 |
| 碱性物质－ 硅醇相互作用 | 使用更强的流动相或添加竞争碱（例如，三甲胺 |
| 硅胶基－ 柱降解 | 使用特种色谱柱；聚合物柱或空间位阻 |
| 峰展宽 | 进样量过大 | 降低进样溶剂的强度以集中溶质 |
| 进样阀中的峰扩散 | 在进样前/后引入气泡以减少扩散 |
| 数据系统的采样速率过低 | 增大采样 |
| 检测器时间常数低 | 调节时间常数使之与峰宽匹配 |
| 流动相粘度过高 | 提高柱温 |
| 检测器池容积过大 | 使用尽可能小的池容积（系统中无热交换器） |
| 注射器体积过大 | 减少进样量 |
| 保留时间长 | 使用梯度洗脱或较强的流动相 |
| 压力波动 | 单向阀泄漏 | 更换单向 |
| 泵密封垫泄漏 | 更换泵密封 |
| 微粒积聚 | 过滤样品；在线过滤器；过滤流动相 |
| 压力渐增 | 微粒积聚 | 过滤样品；在线过滤器；过滤流动相 |
| 水/有机系统－ 缓冲液沉淀 | 测试缓冲液-有机混合物；确保兼容性 |
| 保留超出总渗透体积 | 体积排阻－ 特异性相互作用 | 添加流动相改性剂或更改溶剂 |
| 保留时间不断变动 | 柱温不断变化 | 使柱恒温；绝缘；保证实验室温度恒定 |
| 平衡时间不足以适应梯度洗脱要求，或等度洗脱流动相起变化 | 确信在溶剂改变或梯度结束后至少10 个柱容积通过色谱柱 |
| 流动相组分选择性蒸发 | 减少氦气的剧烈脱气；保持溶剂贮器盖好；制备新的流动相 |
| 缓冲能力不足 | 用>20 mM 浓度的缓冲液 |
| 在线流动相混合不一致 | 保证梯度系统输送恒定组成；与手动制备流动相核对 |
| 污染积聚 | 冲洗色谱柱以去除污染物 |
| 最初几次进样— 吸附在活性部位 | 用浓样品进样冲洗柱，使其处于正常状态 |
| 保留时间逐渐缩短 | 流速在增加 | 检查泵以确保正确；否则需重调 |
| 柱上进样超载 | 减少样品 |
| 键合固定相的流失 | 保持流动相pH 值在2-8.5 间 |
| 保留时间逐渐增加 | 流速在减慢 | 解决液流中的漏液现象，更换泵密封垫，检查泵的涡流和气泡 |
| 硅胶填料的活化点 | 使用流动相改性剂 |
| 键合固定相的流失 | 保持流动相pH 值在2-8.5 间 |
| 流动相组成在变化 | 确保流动相容器盖好 |
| 硅胶填料的活化点 | 流动相中加竞争碱 |
| 硅胶填料的活化点 | 固定相用更高覆盖度的填充料 |
| 灵敏度问题 | 峰位于检测器线性范围之外 | 稀释或浓缩使之处于线性区内 |
| 最初几次进样—样品在样品池或柱中被吸附自动进样器 流路阻塞 | 用浓样品处理样品池/柱 |
| 自动进样器流路阻塞 | 检查流量情况，确保无阻塞现象 |
| 进样器样品定量管未充满 | 确保样品池中已充满样品 |
| 在样品制品时有关的样品流失 | 用内标法在制备样品，优化样品制备方法 |
| 柱平衡时间减慢（离子对现象） | 长链离子对试剂平衡时间慢 | 使用较短的烷链试剂 |
