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玉米粉120克、黄豆粉20克、蔗糖（白糖）20克、1000毫升。 二：蜜环菌母种制作 1.培养基的煮制 先将称量好的玉米粉、黄豆粉用适量水调匀，再添足水，于加热设备上煮制，煮沸至35分钟即可，注意在加热过程中需不时搅拌，以免粘锅煮糊，另还需注意添水，以补充加热过程中损失的水分。 2.分装 培养基煮好后，勿要过滤，直接采用注射筒或其他分装装置分装，分装量需因试管型号而定，一般装至试管1/2长为宜。在分装过程中千万不要将培养基滴在试管口内外壁，若试管口内外壁粘有培养基，一定将其擦洗干净。分装后塞好棉塞，将试管竖直放置，以免试管内壁过长地粘着培养基。 3.灭菌 由于该培养基营养相当丰富，再加上玉米粉彻底灭菌相对较难，因此灭菌时间应比常规培养基稍长一点，一般将其控制在高压（1.5压力）30—35分钟、常压1小时即可。灭菌完成后，待冷至试管不烫手时，将其取出，竖直放置（蜜环菌母种培养基一般做成柱式），培养基将随着温度的下降而逐渐“凝固”，待完全冷却后，培养基在试管内就彻底固型了。 4.接种 在无菌条件下，每支试管接入一豌豆粒大小的块菌种，所接菌种必须保证具有生活力，培养基褐化、蜜环菌严重角质化的菌种最好勿用，但在实在没有好菌种的情况下，该培养基也能对退化菌种起到复壮作用。 5.培养与保藏 培养基接种好后，在25摄氏度左右避光培养，一般在7—10天内即可满管。满管后将菌种放于冰箱中冷藏，一般可保存半年至一年，若需长时间保藏，最好试管采用蜡封。 三.该方法制作母种的优点 1.制种原料简单、易找，制种技术简便、易操作，适用于广大菌种生产者，尤其是偏远地区的天麻种植者。 2.制作成本低廉，比常规琼脂培养基制作划算得多。 3.由于培养基改善了水分的供给状况，且营养相当丰富，再加上玉米粉、黄豆粉中含有多种生长因子，因此所制母种不易褐化、角质化，具有相当强的抗衰老、抗退化能力，对严重衰老、退化的菌种也具有相当强的复壮能力（笔者就通过该方法“拯救”了不少优秀的蜜环菌菌种）。另外，该方法制作的母种还可大大地延长保藏时间，减少了保存过程中的转代次数，对抑制菌种退化可起到很大作用。 4.该方法制作的母种生活力旺盛，转接到母种、原种或栽培种培养基上的菌种块萌发快，生长速度明显快于常规方法所制作的母种。 另外，试验过程中发现了一种简单的可生产出蜜环菌子实体的方法，其培养基配方为：玉米粉40克、大米粉40克、黄豆粉20克、蔗糖20克、水1000毫升，栽培、管理方法略。 |
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