药用菌讲义
发布时间:2009年3月21日 10时32分
吉林省蛟河市食用菌研究所 赵承忠 ----------------------------------药用菌总论 药用菌应用在我国有着悠久的历史,2000多年前我国出版的“神农本草经”就记载了灵芝、茯苓、猪苓、雷丸等多种药用菌,如灵芝有赤芝、黑芝、青芝、白芝、黄芝、紫芝六种,紫芝甘、温、无度,主治耳聋、利关节、保神、益精气、坚筋骨,好颜色,久服轻身不老,延年。茯苓渗湿利尿,健脾安神。雷丸杀三虫,逐毒气……除小儿百病。南北朝时陶弘景所著“名医别录”除记载灵芝、茯苓、猪苓、雷丸外,又增加了马勃、蝉花的药性和功效的内容。以后历代刊印的金匮要略,鬼遗方、医宗必读、汤液本草、本草纲目,本草纲目拾遗,本草丛新、类证本草等各类本草书都有关于药用菌性味功效的描述。记载最为详细,记述药用菌品种最多,并对后代影响最深的是明朝李时珍所著的本草纲目,该书记载的药用菌达30种,详细记述了所记各种药用菌的产地、性、味、功效、服用方法。香蕈(即香菇—编者注)气味咸平,无毒,主治胸胁逆气,舌焦口干,利小便,久服安魂养神,不饥延年,止消咳,好睡,大腹淋沥,隔中痰水,水中淋结,止咳,除湿燥……益胃气,治肾积。木耳功能疗痔,除这些有正式记载的药用菌外,民间还有许多用药用菌治病的偏方。山东省皱县农村常用槐黄(Tremetes.sp)治疗喉炎。云南维西县纳西族农村用珠黄旦(竹红菌)治疗关节酸痛。湖南绥县农村用鬼毛针(安络小皮伞Marasmius androsaceus)治疗跌打损伤。川北和成都地区用老木菌(树舌)治疗腹水和肿瘤。云南昭通苗族人民用裂褶菌(Schizop hyllum commune)墩蛋治好妇女病。山西五合县地区用空柄假牛肝菌、大红菇、白乳菇、桦褶孔菌等多种药用菌做成舒筋散,治疗关节酸痛、风湿痛。福建、浙南地区常用红菇来调养产妇,使其多乳。这些药用菌现都被收在近代出版的药用真菌书籍中。1974年刘波编著的中国药用真菌一书收记的药用菌有78种,1989年中国科学院应建浙编著的中国药用真菌图鉴收记的药用菌有272种,著者统计我国目前的药用菌种类有300多种,我国古代医书记载的这些药用菌的性、味、功效大多和现代的药理、临床试验结果相吻合。 我国古代虽有悠久的药用菌应用历史,但当时还不了解这些药用菌的药理及疗效机制,全凭经验应用,所以这些药用菌的功效没有能得到充分的发挥,许多作用机制还不清楚,真正入药的药用菌只有茯苓、猪苓、雷丸、冬虫夏草、蝉花、马勃等。灵芝、竹黄、树舌、裂褶菌、槐莪、桦褶孔、安络小皮伞等大多数药用菌只在某一地区作为偏方,草药应用,所以,1970年前我国药用菌资源基本上是没有很好开发利用的。 我国药用菌的培养、药理及临床应用研究是60年代开始的。研究的内容包括野生药用菌的驯化培养,发酵工艺,成份分析,药理及临床疗效观察,至今已研究了灵芝、薄盖灵芝、猴头菇、云芝、密环菌、假密环菌、安络小皮伞、竹红菌、竹黄、树舌、银耳、香菇、白耙齿菌、层卧孔菌、茯苓、猪苓、冬虫夏草、裂褶菌等近20种菌。 灵芝研究: 我国第一个用近代药物研究方法进行研究的药用菌。1960年上海市农业科学院食用菌研究所首先开展了灵芝的驯化培养,当年获得成功。1963年又和第二军医大学合作开展灵芝疗效观察。1964年北京医学院药理教研室开展系统的灵芝药理研究。70年代开始中国医学科学院药物所进行灵芝药物化学及药理研究。该二个单位至今还在继续进行灵芝药理、化学研究,已获得了巨大的研究成果。明确灵芝具有:(1)提高红细胞2,3—二磷酸的量,能提高血红蛋白亲和氧的能力,提高动静脉氧差,提高血液供氧能力,特别是对心、脑的氧供应,从而使机体具有较强的抗疲劳、抗衰老能力;(2)提高机体免疫机能,特别是提高T细胞的杀伤病原微生物的功能和单核巨噬细胞吞噬异常细胞、微粒等能力,包括吞噬病原菌、病毒、肿瘤细胞、微小颗粒。(3)调节体液免疫功能,使机体的免疫球蛋白偏低者恢复至正常水平,从而可以治疗自身免疫性疾病,包括气喘、红斑狼疮、肾炎等疾病;(4)解毒,能解除四氯化碳、硫酸乙酯,其他有毒物质对机体的损害,可是有害化学物质造成的白血球、血小板下降恢复至较高水平。(5)提高机体抗放射线的能力。(6)降低血凝。(7)消除体内自由基,抑制自由基对正常细胞的破坏,延长动物寿命。(8)抗炎、抗过敏、抑制急性炎症和慢性肉芽组织增生。(9)促进DNA,RNA合成,延长体外传代细胞分裂代数。(10)镇静、阵痛。(11)镇咳、祛痰、止喘,(12)增强心肌收缩力及治疗慢性肌肉萎缩、肌强直。 灵芝的有效成分,主要有:1、灵芝多糖。北京医科大学李云芷,何云庆教授从赤芝中分离到BN3B,BN3C,并进一步分离得到较纯的多糖,测得了其结构,单糖组成和分子量,药理实验表现,灵芝多糖所表现的活性很可能是有多糖均一体的协同作用所致。2、腺苷甘露醇。3、甾醇类化合物。4、核苷类化合物。5、多肽氨基酸。6、三萜类化合物。 灵芝疗效研究最早开展的是上海市农业科学院食用菌研究所和上海中药制药三厂。1971年上述二个单位接受上海市卫生局委托开展了正式临床应用试验,至1972年共试用数百例,老年慢性支气管炎100多例,有效率75%,神经衰弱100多例,几乎全部有效,冠心病80多例,有效56%,此外对再生障碍性贫血病,白血球低下亦有较好的治疗效果。在作口服试验同时,还进行针剂治疗气喘试验,针剂治疗气喘具有见效快,效果显著的特点,尤其是穴位注射,急性发病时用穴位注射,2~3小时就可以起到缓解效果,但由于当时乡村卫生院也参与试验,自制针剂猪舍,发生了医疗事故,因而也受到了影响,停止了注射治疗气喘病的试验,1972年灵芝药片应用正式通过,同年正式临床应用。用灵芝做成的药品和食品现有珍合灵、灵芪片、灵芝糖浆,增肌注射液等。 猴头菇研究 1960年上海市农业科学院食用菌研究所首先驯化、培养成功猴头菇。并在随后的调查中,了解到猴头菇有补胃之传说。通过探索性试验,初步看到猴头菇对十二指肠溃疡有效。1975年上海市农业科学院食用菌研究所和上海市中药制药三厂,上海医药工业研究院,上海徐汇区中心医院,上海仁济医院等协作,研究药用猴头菇菌丝的固体培养方法,制剂工艺,药理及疗效。研究表明,猴头菇菌丝有提高机体免疫功能,提高机体耐缺氧能力,促进肠系膜微循环,扩大冠动脉流量,升高白血球,抑制肿瘤细胞生长等药理作用。临床上治疗胃、十二指肠溃疡,慢性胃炎和消化道肿瘤有效。并首次提出了用固体培养的菌丝体入药,固体菌丝体培养成本低,设备简单,效果好。1977年完成研究并投产。猴头菇制成的猴头菌片,猴头冲剂等是目前治疗消化道疾病的主要药物。 密环菌研究 70年代初,中国医学科学院药物研究所开始进行密环菌的发酵及疗效研究。结果表明密环菌发酵物具有镇静中枢神经系统,降低血凝,增加大脑和冠状动脉血流量,扩张内耳前庭血管的功效,此外还有降低谷丙转氨酶的效果。临床上治疗眩晕,肢麻,癫痫,高血压有良好的效果。现明确密环菌能治疗心血管疾病的主要有效成分为腺苷。1976年完成研究,同年批准投产。 云芝研究 六十年代末,东北师大,东北制药总厂等单位用深层培养方法培养云芝菌丝体,并进行药理试验,研究表明,云芝菌丝体提取物对治疗白血病有良好的效果。而后东北师大,长春中药厂等单位研究发现云芝提取物具有提高机体免疫功能,升高白血球,减轻四氯化碳等有毒物质对肝脏的损伤,降低放射性射线对机体的损害。临床上可降低肝炎患者的AS2BG、GPT、TTT的量,对急性肝炎,迁延性肝炎,慢性肝炎有良好的效果。1975年由云芝子实体制成的云芝肝泰正式投产。以后四川抗菌素研究所从云芝菌丝体中提取云芝多糖,通过药理及临床研究发现该多糖对肿瘤有较强的抑制作用。重庆第五制药厂利用其成果生产云芝多糖,作为肿瘤治疗药物。以后上海师范大学,南京老山药厂,上海农业科学院相继进行云芝多糖的药效研究和生产。国内生产的云芝多糖其药效和日本的云芝多糖—PSK—基本相同。 这几年中研究的药用菌还有香菇多糖、树舌、竹黄、竹红菌、银耳、假密环菌、白耙齿菌、层卧孔菌、安络小皮伞薄盖灵芝、冬虫夏草、槐莪。这些菌分别治疗肝炎、冠心病、关节酸痛、软化伤疤、气喘、慢性支气管炎、胆囊炎、冠心病、肾炎、各种神经痛、肌肉萎缩等,提高性功能,提高机体活力,抗肿瘤等症。药用菌现在已成为医疗上的重要治疗药物。 药用菌除了作为药物应用之外,现亦被制成多种保健食品,如胃乐舒、猴菇露、太阳神、香菇饮料、银藻口服液、金菇露、一休菇口服液、老年健康茶、灵芝茶等。此外药用菌亦被做成多种化妆品,如银耳珍珠霜、霞飞增白霜、牡丹灵芝膏等。 药用菌的有效成分: 通过近20年的研究,药用菌的一部分有效成分已得到明确,现已明确的有效成分有真菌多糖,腺苷,甾体,皂甙,三萜类,氨基酸,灵芝酸,芥墩果酸等,但还有不少成分还有待研究明确。 真菌多糖 真菌多糖是和植物多糖——淀粉十分相似的物质,其主要区别是:淀粉是a型结构的多糖,其立体结构为线状,或为带状,不具有药理活性。而真菌多糖是一种B—型结构的多糖,有三股单联结成的螺旋状结构物。其一级结构造成位B(1—3)(1—4)结构,或为B—(1—3)(1—6)结构或为B—(1—4)(1—6)结构,具有B—(1—3)(1—6)连结方式的多糖都具有药理活性。其二级构造中得分枝链对其药理活性亦有重大的影响,茯苓多糖是一种B—(1—3)直链葡萄糖聚糖并连接一些B—(1—6)的侧链,这些侧链的存在使其抗肿瘤活性大大下降,将这些侧链用化学方法切除或羧甲基化则可使其具有强烈的抗肿瘤活性。螺旋状的立体构型对其活性的大小亦有重大的影响。所以,真菌多糖的药理活性决定于其1—3级结构的特性,因此,在提取加工时要注意加工工艺,防止其三级结构的破坏,而使其活性下降,甚至失活。 真菌多糖有胞内糖,胞外糖二种,这二种多糖其分子结构,特性略有差异,如云芝的胞内糖大多为:B(1—3)(1—4)为主链,以B(1—4)(1—6)为侧链,并含有30%左右蛋白质,而胞外糖为B(1—3)为主链,以 B(1—3)(1—6)为侧链,不含蛋白质的葡聚糖,子实体中的多糖构造则为B(1—3)为主链,B(1—6)为侧链,这三种多糖都有药理活性。 一种真菌其所含的多糖是一个很复杂的体系,其中包含很多种多糖,其分子量可从数千到百万以上,结构上可有B(1—4)(1—6),B(1—3)(1—6),有的有分枝,有的则为直链状的区别,有的能溶于中性水中,有的的易溶于酸性溶液中,有的易溶于碱性溶液中,这些在分子量、结构、溶性特征上不同的多糖将其单体进行药理试验时会表现出一定的药理活性,但如果将这些多糖配合一起应用时往往会使其药理活性更全面,因此认为一个药用菌的各种多糖相互之间具有协同作用。药用菌对提高机体免疫功能,扩张血管,提高血红蛋白载氧能力,增加机体氧供应,减低机体耗氧水平功能主要是由其所含的多糖所决定的。 腺苷 腺苷是一种分子量较小的有机物,但活性很强,其功能是降低血凝,扩张血管,改善机体血液循环,高血脂病人,血管狭窄常常会使机体血液循环受影响,从而出现头晕、胸闷、记忆力衰退、美尼尔氏症及其他一些眩晕病者,其病因是内耳的前庭血管或别的血管血流受阻,使得平衡器官失灵,造成眩晕,呕吐等症,而少量的腺苷,一个成人只要服几微克就能使前庭血管扩张,血流顺利通过而使眩晕的症状消失,密环菌治疗眩晕症的主要成分即为腺苷。 其他成分的效果 赤芝孢子内酯A具有降胆固醇作用,赤芝孢子酸A具有降转氨酶活性,灵芝碱甲、乙及乙酸化合物有抗炎活性,尿嘧啶及尿嘧啶核苷对肌强直症小鼠血清醛缩酶有活性,腺嘌呤核苷具有镇静,抗缺氧,降血清胆固醇等作用,芥墩果酸具有扩张冠状动脉的功能,竹红菌素具有活血化淤作用,甘露醇具有润肺效果,三萜类具有止痛之效,麦角固醇,皂甙等有改善机体生理功能的效果。 药用真菌无论其子实体或菌丝体均有相似的药效,由于菌丝体生长期短,易于工厂化生产,所以药用菌现大多数用菌丝体进行生产。菌丝体培养亦有固体菌丝体培养和液菌丝体培养二种。 药用菌应用、研究在国际上主要是亚洲地区。最早发现真菌多糖有治病之效的是1935年Kero,但当时未引起重视,正式进行药用菌研究的是日本。日本进行药用菌研究是从本世纪六十年代开始的。首先被研究的是香菇,分析了香菇多糖的结构、组成、药理及临床效果,明确香菇多糖是一种B—(1—3)—D葡聚糖和B—(1—4)(1—6)葡聚糖的混合物,分子量200万左右,是一种线性结构物,具有左手、右手二种三股状螺旋,该多糖对机体具有显著提高正常小鼠溶血素形成,保护肝脏免受化学药物损害,对肝炎有良好治疗效果,能间接抑制肿瘤细胞的生长。1985年被日本厚生省批准投产,现年产值达200亿日元。1971年宫琦志雄等报导了从云芝菌丝热水提取物中得到一种抗肿瘤活性的多糖,对小白鼠肉瘤有抑制作用,进一步研究明确云芝多糖是由葡萄糖、岩藻糖、阿拉伯糖、山梨糖、戊糖组成。该多糖具有提高免疫功能,抑制肿瘤,治疗急慢性肝炎的效果。1976年日本厚生省批准生产,产品名称为PSK。云芝多糖在日本非常畅销,每克多糖价格1000日元,年产值达500亿日元,主销日本、亦销亚洲其他国家,几年来,欧洲、美洲国家也开始试用。近年来日本还研究成功裂褶菌多糖,猪苓多糖。这二种多糖亦已在市场上销售。据报道日本现在研究冬虫夏草、灵芝、茯苓等多种药用振军。亚洲除中国、日本外,研究药用菌的还有南朝鲜,我国的台湾省等地区。 除亚洲地区外,现研究药用菌的国家还有美国、德国、英国等国家。美国已有10多个单位进行香菇多糖的研究,近来报道美国试用灵芝治疗艾滋病(AIDS)(HIV病毒病)发现有较好的效果。 一、灵芝 灵芝是一种传统的药用真菌,我国不少古代药物书籍记载灵芝有延年益寿之效,可治多种疾病,民间将灵芝称为仙草。近年来的医药研究表明,灵芝虽非长生不老的仙草,但其药效确是广泛,效果显著,在抗衰老方面更有其特殊的功能,灵芝的培养及应用已受到现代医药界的重视。 灵芝是一种高等真菌,属担子菌亚门,层菌纲,非褶菌目,多孔菌科,灵芝亚科。灵芝种类很多,真菌词典记载灵芝种有104种,赵继鼎先生编著的“灵芝”一书中记载我国灵芝有72种。不同种的灵芝其形态特征、功效均有差异。本文主要介绍红灵芝的形态特征及培养方法。 二、芝分类 灵芝属分类是根据其孢子形态特征和菌肉构造。 a)子瓜子形……………………灵芝组 菌肉由珊瑚状组织构成,菌肉褐色,分层…………灵芝属 菌肉不由珊瑚状组织构成……………………紫芝属 b)子圆形或近圆形……………………假芝组 菌肉由珊瑚状组织构成,菌肉褐色,分层……………… 菌肉不由珊瑚状组织构成,菌肉不分层……………… 我国的各种灵芝种名:灵芝,海南灵芝,喜热灵芝,黑灵芝,咖啡灵芝,弱光泽灵芝,黄灵芝,无柄灵芝,大园灵芝,松杉灵芝,内蒙灵芝,紫光灵芝,薄树芝,密纹薄芝,弯柄灵芝,鹿角芝,粗皮灵芝,紫芝,硬孔灵芝,闽南灵芝,黄边灵芝,背柄灵芝,拱状灵芝,热带灵芝,黄褐灵芝,伞状灵芝,小孔栗褐芝,狭长孢灵芝,无柄紫芝,朱漆灵芝,树舌(又叫平盖灵芝),黄孔树舌,南方树舌,白皮壳树舌,层迭树舌,胶纹树舌,橡胶树舌,长管树舌,梗皮树舌,褐孔树舌,长柄假芝,福建假芝,黄肉假芝,小孢假芝,黑假芝,黑漆假芝,白肉假芝,假芝,亚假芝,皱盖假芝,光假芝,光粗柄假芝,粗柄假芝等。 三、=灵芝的形态 子实体木栓质,菌盖肾形或半圆形,直径3~20厘米,人工段木培养的可达30厘米,厚1~3厘米,黄褐色,皮壳有光泽,有环状棱纹和辐射状皱纹,边缘薄或平截,菌肉褐色,营口初期灰白色,后期转为褐色,每毫米4~5个,菌柄侧生,色与菌盖同,孢子印褐色,孢子卵形,8.5~11.5×5~6.5微米,孢子壁双层,二层之间有小刺,孢子中央有一个大油滴。 (一)红灵芝的生长条件 灵芝孢子的壁由于双层、壁厚,所以萌发较困难,尤其是后期产生的孢子。故用孢子分离菌种时,一般都取初始释放的孢子。在马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基,小米、葡萄糖、琼脂培养基,麦麸、葡萄糖、琼脂培养基上孢子都能萌发。在上述培养基中加入10~20%的灵芝子实体热水抽提掖,则孢子萌发更快。子实体抽提液的制备是将子实体剪碎,1斤子实体加12斤水,煮沸保持20分钟,然后过滤,取其汁。孢子萌发温度24~30℃,菌丝和子实体适宜生长温度为25~28℃。斜面试管中菌丝紧伏培养基,初白色,菌丝老化后转浅黄色至黄色,并纤维化。在木屑麦麸培养基上20天左右可形成菌蕾。子实体适宜生长条件为:温度26~28℃,较充足的散射光。95%左右的空气湿度和良好的空气(二氧化碳含量不超过0.1%)。温度长期低于20℃,菌蕾表面会变黄,僵化,严重影响生长;湿度过高,子实体表面积留水份,会产生霉菌。空气好(二氧化碳含量低),子实体易开片,柄短,盖厚,园整,空气差(二氧化碳含量高)会影响菌盖分化,柄长,呈鹿角状。 (二)灵芝的培养 1菌种制备 (1)菌种纯化: 想获得理想的产、质量,就要有良好的菌种。优良菌种的标志之一就是没有杂菌、病毒的浸染,使灵芝菌丝体能够得以良好的生长。 真菌性感染,其感染的孢子数量较多时,很易萌发,鉴别。但当感染的数量很少,呈潜伏状态时,就不易检出。细菌、酵母菌、病毒的感染更不易识别,病毒、细菌、酵母菌感染造成的减产往往也不易被察觉。 然而生产上细菌、酵母菌及病毒的感染很为普遍。笔者在检查几家出售的金针菇、蘑菇栽培种时,其中一家细菌性和酵母菌的感染竟是100%,另几家也有感染。真菌性感染比例也很高。 真菌、细菌的感染只要取用适当的培养基和接种量很小的情况下,较容易检出,病毒性感染则必须通过特定条件的培养方能检出。 菌种不纯,大多和检种不严、培养料灭菌不彻底、棉花塞含有杂菌有关。因此生产上应十分注意母种、原种的检查,原种用的麦麸,米糠等饲料要新鲜,不霉变,培养料原料要松散不结块,灭菌彻底,棉花塞干燥无杂菌感染,凡可能有杂菌感染的菌种应做纯度检定和纯化处理。 细菌性感染的检查 培养基: 营养琼脂培养基: 葡萄糖2.5克,蛋白胨5克,牛肉浸膏3.0克,琼脂15克,水1000毫升。 营养肉汤培养基: 营养肉汤8.0克,酵母浸膏2.0克,K2HP4 2.0克,KH2PO4 0.5克,琼脂5克,葡萄糖5克,MgSO4 0.1克,水1000毫升。 检查方法: 将培养基溶解,倒于培养皿中,做成平板。如果没有培养皿,也可直接接种于斜面试管中检测。 挑取待检原种或栽培种一块,置于无菌水中,搅碎。制成悬浮液。 用无菌吸管吸取1毫升悬浮液滴于平板上或斜面试管中,轻轻摇动,使之均匀分布于整个平面上。 将上述接种后的平面培养机置于28℃温箱中。三天后观察,若培养基表面有透明状的,表面光滑的珠状物即示有细菌感染的表示。 霉菌感染的检查 培养基: 葡萄糖20克,马铃薯200克,磷酸二氢钾0.5克,硫酸镁0.2克,琼脂20克,水1000毫升。 配制方法见菌种制种部分讲义。 检查方法同细菌感染的检查。 酵母菌感染检查: 培养基: 1蛋白胨0.5克,麦芽糖5克,磷酸二氢钾0.3克,硫酸镁0.2克,水1000毫升,PH3.5~4。 2蔗糖60克,氯化铵1.5克,磷酸二氢钾0.3克,氯化钾0.1克,硫酸镁0.2克,蒸馏水1000毫升,PH3.5~4。 检查方法:将培养基溶解,用柠檬酸(灭过菌)调节PH至3.5~4,再倒于培养皿中。挑原种或栽培种一块,置于无菌水中,搅碎,呈悬浮液,吸悬浮液2~3滴于培养皿中,25~28℃培养三天后观察,若培养皿中有透明状,半球形菌落,很可能是酵母菌,置于显微镜下观察,菌体生长呈芽殖状的即酵母菌。 病毒感染的检查: 病毒症状 灵芝菌丝感染病毒后,其生长的斜面菌丝上或菌种瓶壁上(原种或栽培种),其前端菌丝往往生长显著不整齐,呈缺刻状,在菌丝中间部分往往出现空斑状,空斑内菌丝稀、细,空斑边缘整齐呈规则状。如果挑取空斑部分的菌丝繁殖,其繁殖的斜面或菌种瓶内,其空斑现象和生长前端菌丝缺刻状现象会更严重。 菌丝感染病毒后,如菌丝幼嫩,生长条件良好,生长旺盛时,症状往往不能立即表现出来。在菌丝衰老,生长条件不良,如高温、培养基含水量过低,营养条件很差的情况下,病毒症状才容易表现出来。因此检查病毒时应创造一种较为不良的生长条件。菌种瓶比斜面培养基容易检出。 检查方法: 培养基 原种培养基:木屑89%,麸皮10%,石膏粉1%,含水量50%。 斜面培养基:马铃薯100克(去皮),葡萄糖10克,琼脂22克,水1000毫升。 灭菌、接种同常规。培养温度先25~28℃,5天后转30~32℃。 (2)菌种纯化方法: 菌种纯化就是用反复分离,挑取无杂菌部位的菌丝接种的方法,使菌种逐步纯化,最后达到无杂菌,病毒感染。 培养基: 葡萄糖20克,马铃薯200克(去皮),磷酸二氢钾0.5克,硫酸镁0.2克,蛋白胨5克,酵母膏2克,琼脂18克,水1000毫升。常规配制和灭菌。接种时制成平板。 接种:挑取待纯化菌种的前端菌丝,置于平板培养基中间,挑取的菌丝块要小,以能够长出菌丝即可,等菌落长至6公分左右时,选菌丝生长正常的前端菌丝,挑于新的平板培养基上,继续纯化培养,在前后二次平板培养基上都不出现有杂菌时,可视为已纯化。 (3)杂菌的预防 纯化的菌种制种时还必须注意杂菌感染,否则纯化的菌种又会感染杂菌和病毒。 防止杂菌感染:A、原种菌龄要短,菌丝长到瓶底过4~5天就用。B、培养基灭菌要彻底。C、米糠、棉籽壳、麸皮、玉米粉等含蛋白质丰富的饲料要新鲜,不可霉变。D、棉花塞不得染有杂菌,放置场所要清洁,干燥,灭菌时防止受潮。 (4)菌种退化 真菌是一种低等生物,细胞中的细胞核,各种细胞器如线粒体,高而基体等,以及其他有活性的内含物的含量很容易发生变化,细胞大小也有差异。细胞核、细胞器内含物含量的变化就会造成性状的差异。因此在同一品种,同一菇床上采的种菇,甚至同一种菇上落下的孢子,在进行组织分离或孢子分离获得菌种时,不同的菌株其产、质量性状往往会有不同,有些可达极显著的的程度。如若做定向的系统的选育,在不长的时间中就会产生二个不同的品系。这种菌种性状变化是不定向的,也可能对人有利,也可能不利。对人不利的变化,如产、质量下降,抗病力降低,我们称之谓退化。菌种性状退化现象在不良的生长条件、不良的菌种保藏方法或机械、化学伤害下最容易发生,受到损伤的菌丝细胞在正常生长条件下会自动修复,在修复过程中往往会丢失某细胞成分造成退化或变异。长期分离,繁殖培养而又不进行菌种选择时,也会产生退化。 (5)防止菌种退化方法 A、接种时避免机械伤和烫伤,接种针、镊子、必须充分冷却后才可接种。菌种菌龄要短,纤维化程度低,俗称菌丝要嫩。接种铲口锋利,避免接种时反复拉撕而伤害菌丝。 B、创造良好的生长条件,培养基营养充分,含水量、PH适中,选择适宜的温度培养。 C、菌种保藏最好选用木屑、麸皮培养料或粪草培养料的瓶装菌种保藏,短期保藏时,温度4℃左右,木屑、麸皮培养料或粪草等培养料是一种迟效性培养料,营养成分不会很快消耗尽,不会造成营养饥饿。 灵芝菌种种性的好坏对子实体形成迟早,产、质量高低有很大的关系,好的菌种接种半个月就形成子实体,每瓶(750毫升)中可收15克左右;差的种,要30天左右才能形成子实体,每只子实体只重7~8克,因此,生产上必须注意选择优良菌种。 (6)菌种的分离和培养 培养极为PDA培养基。制作方法见制种部分。 组织分离:取菌蕾大,色白,未开片或刚开片的小子实体,于无菌箱中,用预先浸于75%乙醇中的药棉,挤干后擦拭菌蕾表面,进行表面消毒,然后用锋利的解剖刀割取心部组织一块,大小半厘米左右,置于PDA培养基上,25~28℃培养,随时检去杂菌。灵芝菌丝幼时白色,长满斜面,菌丝老化后就夹杂淡黄色,纤维化,菌丝紧贴培养基。菌种分离扩大要在菌丝未长满斜面,菌丝幼嫩时进行。 试管菌种、原种的具体制备方法同香菇、木耳。 2、灵芝栽培 灵芝栽培有代料栽培和段木栽培两种。代料栽培完全在人工条件下进行,生长条件适宜、营养丰富,子实体生长快。段木栽培,菌丝、子实体生长慢,但所长子实体坚、子实体大。目前,段木栽培的灵芝子实体价格高于代料栽培的子实体。 1)代料栽培 代料栽培就是用人工配制的培养料栽培灵芝。可以栽培灵芝的培养料非常多,凡含有纤维素、木质素的木屑、棉籽壳、秸秆类材料,再配以蛋白质含量较高的麸皮、米糠、玉米粉等原料都可培养灵芝。常用的代料配方有: A、木屑、麸皮培养料 木屑73%、麸皮25%、蔗糖1%、石膏粉1%,含水量(红灵芝栽培下同)58%左右。 B、棉籽壳、玉米粉培养料 棉籽壳74%、玉米粉24%、蔗糖1%、石膏粉(或碳酸钙)1%,含水量60%。 培养基配制好后应马上装瓶灭菌,尤其是夏天,温度高,有水分的培养料很容易发酵、变质。 培植培养基用的木屑要沉,最好经过半年以上时间的堆积,麸皮、米糠、玉米粉、棉籽壳要新鲜,不能霉变。棉籽壳最好在配料前先暴晒2~3天。 代料栽培有瓶栽和代栽两种,瓶栽是将代料装于菌种瓶中,子实体从瓶口长出。代栽是将料装于塑料袋中,让子实体从袋口或开口处长出。 1)瓶栽: 瓶子规格:瓶口直径3.2厘米,容积750毫升的菌种瓶。 瓶口直径3.8公分,容积850毫升的菌种瓶。 瓶口直径4.5公分,容积1000毫升的菌种瓶。 瓶口、容积小的瓶子,子实体也小;瓶口、容积大的瓶子,子实体也大。但瓶口过大,表面培养料水分容易蒸发,干涸,影响子实体生长。瓶口大的瓶子,接种后在瓶口上应用有孔的塑料薄膜包好,以避免水分的蒸发。 装料要求:装料要注意松紧度,750毫升的瓶子应装干培养料200克左右,装到瓶肩为止。培养料离瓶口不宜距离太多、太少。距离太多,形成的子实体菌柄长,商品价值低;距离太少,培养料水分容易蒸发,菌蕾一形成就接触棉塞,妨碍其生长。 培养料的灭菌、接种、培养同常规(参见制种部分) 栽培管理 栽培室要求:有较好光线,瓶子排放后能达到500勒克斯左右的光强,光线均匀,能通风换气,并能保持空气的湿度,一般栽培室要求深不超过8米,二端有较多的玻璃窗,如果是平房,屋面最好开1~2扇天窗,对着瓶架走道的墙上,上、下方各开1.5平方市尺的窗,地面要铺水泥。 当培养瓶中的菌雷将要接触棉塞时,拔去棉塞,移入栽培室培养。 培养灵芝瓶子可放在地上或架上,横卧或直放。横卧可不用架子,一般可叠12~13层瓶子,采收也方便。室内栽培灵芝应控制好温、湿、气、光四个条件。 温度:在菌蕾期,温度要控制在25~28℃范围内,不能长期低于20℃或高于32℃,否则,子实体和菌丝表面会萎黄,子实体僵化。菌丝和子实体生长时会放出热量,使室温升高,所以当气温高于28℃时,室内栽培瓶的密度不能过大,横放的栽培瓶、每隔3~4层应放空瓶一层,以利散热。气温低于20℃时,栽培瓶的密度应增加,以使室温提高,温度过低时,可在瓶上盖塑料薄膜,以提高小气候温度或者加温。 湿度:子实体生长所需要的水分主要来自培养料,当空气湿度达到足够湿度时,可以不必在子实体上喷水,空气相对湿度要到到90~95。空气湿度低,幼嫩的子实体会失水,使子实体生长迟缓或僵化。因此,整个栽培时间栽培室地面要始终保持湿润,空中每天喷雾2~3次。 空气:灵芝子实体对空气中二氧化碳非常敏感,空气不良,子实体不易开片,成长的 子实体片小,这样的子实体商品质量低,但产量较高,内在多糖含量比开片好的子实体高,以提取多糖为目的时,宜在稍高二氧化碳含量条件下培养。但以商品子实体为目的来培养时,宜在二氧化碳较低的条件下进行。一般培养室每天应通风2~3小时,若开片迟缓,说明通风不良,应加大通风量。 光线:室内光线保持在100~500勒克斯之间,并要求四面光线均匀,否则子实体会向光源的方向生长而造成畸形。 2)袋栽: 塑料袋规格:17×33公分或15×55公分二种。 制袋方法: 17×33公分塑料袋制种,用手工方法或装袋机将培养料装入袋中,然后用3.2公分直径的颈套套于袋口外,将突出颈套的塑料袋口倒翻,用线或橡皮筋扎住袋口,塞好棉塞,灭菌。 15×55公分大袋制袋,用装袋机或手工装料,装好后将袋口扎紧,在袋上用锥形铁棒戳一个2公分直径的洞,贴上医用橡皮胶,然后灭菌。 塑料袋培养料灭菌 塑料袋培养料可以用高压灭菌锅灭菌,也可用常压土锅灭菌,土锅灭菌塑料老化程度低,袋子不会损坏,因袋破而引起感染的机会少。 塑料袋培养料的高压灭菌: 塑料袋装锅时,袋与袋之间应留有空隙,以利热空气进入。灭菌时,起温降温要求缓慢,开始加温时放气阀门要打开,等温度达到105℃侯(压力0.5公斤/平方厘米),再关闭阀门。再缓慢起温,二小时后,达到1.5公斤/平方厘米,维持二小时,再让其自然降温,待压力降至零点后,打开锅门,将塑料袋拉进接种室。 常压土锅灭菌:灭菌锅内应有多层的塑料袋架,层距可平放二个塑料袋,塑料袋之间应留有空隙,以利热气进入,灭菌要求100℃、10小时,灭菌结束后打开锅门,等温度降至50~60℃时,将塑料袋运到冷却室冷却,再接种。 塑 料袋的搬运:应捧住袋身搬运,动作要轻,不可放在有刺、棱角的盛器内以免塑料袋破裂,刺破。有条件的单位,可以特制专用的周转箱,培养料装好后就直接装于周转箱中。放于周转箱中,灭菌、接种、直接放上培养架时才将装料塑料袋取出周转箱。 接种:培养料灭菌冷却后应马上接种,气温较低时,应在培养料尚有余温时(35℃左右)接种,气温较高时,在袋温降至室温后马上接种,推迟接种会增加杂菌感染机会。17×37公分塑料袋接种,菌种从颈套口放入。15×50公分塑料袋,边在袋身上打孔,即用1.2公分直径的锥形铁棒在袋身上戳一个空,每袋戳4~5个孔,然后将菌种从孔中接入,再在孔上贴3公分左右见方的橡皮胶,封住袋口不使杂菌侵入,接种后放入培养室培养。培养条件和瓶装菌种相同。 栽培:17×37公分塑料袋的栽培方法和瓶装菌种相同。15×50公分塑料袋的栽培是在菌丝长好后,将贴在接种孔上的橡皮胶拉起,并移入栽培室。栽培室要求与瓶栽相同。移入栽培室后,保持95%左右的空气湿度,少通风,保持稳定的条件,促使长出菌蕾。菌蕾长出后的栽培方法同瓶栽。 2段木栽培 段木栽培灵芝有普通段木栽培和熟料段木栽培两种。 A、普通段木栽培用1米左右长的段木,钻穴,接上菌种,以及发菌管理,使段木上长出灵芝。栽培过程分制种、段木准备、接种发菌、埋菌棒和管理等几个过程。 制种:段木接种用的菌种可以用普通木屑、麸皮菌种(制种方法同原种),最好用木块菌种,在水份、湿度、温度变化较大的情况下,木块菌种能比木屑菌种表现出更大的抗逆性,菌种不易衰老、死亡。制菌种用的木块,要求质地坚硬,树皮较薄,常用的有桑、槐、悬铃木等。用其枝条剪成长1.5厘米,直径1.2厘米的小圆木块,平时晒干贮藏,制种时将其放入营养液中(100毫升水中加蔗糖2克,麸皮或米糠5克)煮沸,到木块心部有水痕时捞起,按4:1的比例将木块与常规制种用的木屑、麸皮培养料混合。装入瓶中,并用常规料覆盖于培养料的表面,压平,灭菌,接种。培养同常规制种。菌丝长到瓶底后再过10天左右菌丝可长入到木块心部,就可用于接种。 段木准备:一般阔叶树段木均能栽培灵芝,但以木质较坚硬的桦树、栎树、野樱桃,悬铃木、枫香等树种比较理想。段木直径要求8~15厘米,长一米左右,一般在2~3月份伐树,然后截去树枝,放于阴凉处,使水份慢慢蒸发,接种时,段木含水量以37%~40%为宜,断面处应有细的裂纹。如树皮颜色较浅,含水量过低,接种前应将段木放于水中浸1~2天,含水量高,手拿觉得较重,可将段木放在太阳下晒1~2天。接种时的段木要求完全枯死,段木若在发菌期或埋土后返青发芽,已生长的菌丝会死亡。 接种:南方地区以4月上、中旬为宜,东北地区则以2月下旬—3月上旬之间接种为宜。接种过早,气温低,菌丝长不好并会僵化;接种过迟,首批长的灵芝会遇到盛夏高温,子实体长不好,甚至死亡。接种时,工具、盛器要用高锰酸钾溶液消毒,环境清洁,菌种瓶口用酒精擦过。挖出来的菌种要及时接种掉,不可让其干萎影响其生活力,钻好接种穴的段木也要及时接好种,上堆,用塑料薄膜盖好,不可让种穴干燥,影响菌丝定植,挖出来的菌种和打好接种穴的段木未能及时接种掉就应用塑料薄膜把其罩住,防止水份散失。接种穴用电钻或皮带冲钻穴,穴略小于菌块,使接种块能塞紧接种穴。穴距8~10厘米,行距6~8厘米。接种方法是:从瓶中挖出菌种,剥去表面菌膜,先用少量的木屑填入穴内,然后再塞上菌种块,用榔头敲紧,,边钻穴,边接种,接种后立即堆制,用塑料薄膜盖好。 堆制发菌,段木接种之后随即堆制,堆法是:一层段木横放,一层直放,堆高为3~4市尺,宽度为一根段木的长度,堆长不限,堆周围用塑料薄膜覆盖,底部用砖木压紧,密封,阳光强烈是塑料薄膜外覆盖草帘,减少阳光,堆温保持25~28℃,晚上盖好草帘保温。7天后翻堆,将上下、里外的段木相互调换位置,使得每根菌棒接受到相同条件,发菌均匀。第一次翻堆后低部塑料薄膜仍密封,7天后再如上法翻堆,但底部塑料薄膜不必着地,稍留空隙,增加空气进入,以后的翻堆每隔3~4天翻一次,见段木树皮成浅白色,变干,翻堆时要适当喷水,待树皮上无水迹时再覆盖薄膜。如见有杂菌,可将薄膜揭起,吹风降湿度,,一次揭起1~2小时,抑制杂菌生长。如有个别段木杂菌严重,可将其捡出另外放置。一个月后,菌丝已深入木质部,即可埋菌棒。 埋菌棒:埋菌棒就是将菌丝已经定植的段木埋入畦土之中,开好排水沟,上面搭好遮雨、遮阳光的荫棚,保持土壤湿润,使子实体从土中长出。具体要求是:畦宽1.5米左右,挖去畦表土3寸左右,底土上洒杀虫剂六六六粉或浓氨水,或其他农药,撒上一薄层土将农药盖没,然后排放一层菌棒,菌棒间隔1指宽,中间用细土填实,不留空隙,否则菌棒易上杂菌,然后表面再盖3~4公分后的细土,二畦之间要开好排水沟,沟底要低于菌棒底部。 埋菌棒的季节要在气温达25℃左右时才可,南方地区要求4月底至5月初。东北地区要在5月中下旬为宜。 搭荫棚,荫棚可高,可低,只要能防雨,遮阳即可。这里讲的是一种低荫棚,成本低,方法是在畦四角竖1尺左右长的竹竿,相互之间用横竹竿连结,然后顶上铺一层塑料薄膜,再盖草帘即可。 水份管理:表层土壤湿度要求保持在18~20%的含水量,即用手捏得扁,不粘手,一般晴天一天盆1~2次水,喷雾要细,不可拨浇,防止水流到下面菌棒上,菌棒太湿,菌丝容易衰老死亡,段木变黑。畦面有杂草应随时拔去。冬天,土壤保持湿润,不发白即可(含水量14%左右),为防止水分过干,可在畦上盖一层稻草。第二年气温20℃以上,子实体可生长时,去掉覆盖稻草,土壤喷水,保持子实体要求的水份,让子实体生长。段木栽培灵芝南方可连长2~3年。东北则是只长当年。 B、短段木熟料栽培: 段木种类同普通段木栽培,粗细10~15公分,长15公分左右,含水量37~40%。 装箱灭菌:用木条钉制成长60公分、宽40公分、高15公分的木箱,或用耐高温的塑料制成相同于木条箱大小的塑料周转箱,于箱中先放一只和箱大小相同的塑料袋,将短段木立放于箱中,段木之间用85%木屑,15%麦麸,含水量50%的培养料充实,袋口褶盖于段木表面,置灭菌锅中,先60℃2小时,再100℃12小时,然后取出灭菌锅,冷却。于接种室中揭开塑料袋口,将木屑、麸皮培养料菌种撒放段木表面,再将袋口依旧褶盖好段木,25~28℃培养。菌丝长好后立埋于土中栽培,复土厚度,土壤含水量及管理与普通段木栽培相同。 (2)灵芝的采收、烘干 菌盖边缘浅黄色带即将消失时可采收。过早采收子实体重量轻,子实体过熟,多糖含量低,质量下降,但目前商品收购上多不用多糖含量多少来衡量而是以子实体的厚度、大小来分级。老熟的子实体因木栓化程度高,烘干后收缩量小,结果老熟后采收的子实体比近成熟时采收的子实体外观质量为优。 子实体采收后可放在阳光下晒干,也可用烘箱烘干,烘温要求40℃2小时,再52℃2小时,在62℃烘干。 烘干后的子实体用塑料袋包装,防止受潮。灵芝子实体很容易长各种蛀虫,可把灵芝蛀空,长期保存灵芝可用粮食熏蒸用的磷化铝药剂熏蒸,熏蒸方法是:每立方米用量3~6克,温度20℃以上需密闭3~4天,16~20℃需4~5天,低于16℃需7天,熏蒸完毕通风5~7天,因是剧毒剂,所以熏蒸必须完全密封,人畜隔离,然后再密闭保存,一年后仍没有处理,则应继续用磷化铝熏蒸杀虫一次。 三、猴头菇 猴头菇(Hericium erinacius (Bull) Pers·),属多孔菌目,齿菌科,猴头属,猴头菇是一种著名的食用菌,又是疗效价值极高的药用菌,具有提高机体免疫功能,提高小鼠耐缺氧能力,加速肠系膜微循环,抑制肿瘤细胞生长,扩大冠状动脉流量等多种药理活性,临床上治疗消化道溃疡、胃窦炎、慢性胃炎、胃闷胀、胃痛等病,有效率达85.2%,治疗消化道肿瘤有效率69.3%。猴头菇的产品有干猴头菇、猴头罐头、猴头菇药品(猴菇菌片等),猴头菇保健食品(胃乐舒、太阳神、猴头露等)。全国大多数省均产猴头菇,著名的有常山县微生物厂、山西寺头菌种厂等,全国年产猴头数千吨。 (一)生物学特性 1、形态特征: 子实体块状,直径5~10厘米,不分枝,肉质软和,鲜时白色,干燥时变黄色至褐色,菌刺覆盖整个子实体表面。刺的长短与生长有关,一般长1—5厘米,呈圆柱形,尖端尖锐或略带弯曲,刺粗1—2毫米,子实层生于刺的表面,孢子白色,球形至近球形,直径5—6微米,表面平滑,内含一个油滴。 猴头菇属常见种有猴头菇、假猴头菇、珊瑚状猴头菇三个种。它们的主要区别是:猴头菇子实体块状、不分枝。假猴头菇子实体分枝,均匀悬于小树枝等下侧,珊瑚状猴头菇子实体分枝,成丛生状。 猴头菇菌丝在马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基上,菌丝匍匐,线粒状,白色,基内菌丝发达。猴头菇菌丝壁薄,嫩、有横隔,有锁状联合。但猴头菇菌丝在不同培养基培养时,常表现出多态性,例如在通风良好,含氮量较高的培养基上培养时菌丝就表现为细、密、稍有气生菌丝。 培养菌丝在干燥、高温等不良条件或菌龄长时,细胞中的养份会集中转移到一个细胞中,结果这个细胞就特别巨大,贮藏的养份特别多,壁厚,呈休眠状,所以能抵抗高温,干燥的不良条件,此种细胞名叫厚垣孢子。厚垣孢子的二端营养细胞全部收缩,死亡。在适宜的条件下,厚垣孢子又会萌发出菌丝,继续进行其生长繁殖。 在自然界中,猴头菇大多长在柞树、栎树、胡桃等树的枯死处。一般都长在树干的中上部,有时亦长在倒木上。猴头菇多长于森林不太稠密,空气较为流通,湿度较高的环境中,一般都在8~9月份,气温16~18℃时生长。 2、 菇生长条件: 营养条件:猴头菇是一种木材腐生菌,可以生长在含有蛋白质的木质素、纤维素、半纤维素的植物残体上,如段木、倒木上,或生长在含有一定数量的麸皮(或米糠、玉米粉)的作物秸秆、甘蔗渣、酒糟、中药渣、玉米芯的培养料上。对尿素硫酸铵利用能力较差,不能利用硝态氮。在有机氮含量丰富的培养基上,菌丝密、线。 温度:猴头菇是中温性真菌。菌丝生长温度6~30℃,25℃左右菌丝生长最为适宜,子实体生长温度为18℃左右,20℃以上子实体形成受明显影响。25℃以上子实体基本不能形成,低于6℃时子实体停止生长。温度高,球块小,松;温度低,刺短,球块件事,低于12℃时,子实体往往呈橘红色。 水份:水份是一切生物赖以生存的必要条件之一,猴头菇分泌的胞外酶的活动,营养物质的吸收、运输,一切生命活动都必须在含一定比例的水份条件下进行。但水分含量不能过多,过多的水份会影响营养基的通气,影响菌丝呼吸,水份过多,菌丝的抗逆能力下降,也容易自溶。 猴头菇的适宜含水量和培养基的松紧度有密切的关系,培养基坚实的含水量应低,培养基疏松的,含水量应高。木屑、米糠培养基含水量要求58%左右,甘蔗渣、麸皮培养基含水量要求72%,含水量低,菌丝细,生长缓慢,但菌丝不易衰老。含水量高,菌丝容易衰老,生命力差。用葡萄糖等分子量低,水溶性物质作培养基时,其浓度不可过高,浓度太高,会使渗透压上升,造成细胞脱水而死亡或不能生长。PDA培养基葡萄糖含量不要超过6%。木质素、半纤维素、纤维素等非水溶性的高分子物质,因为不溶于水,所以不会提高渗透压。培养基中纤维素等含量较多时,也不会影响菌丝的生长。 猴头菇子实体很鲜嫩,表面没有角质、革质或腊质的保护组织,为裸露状,本身含水量又高,所以很容易蒸发水份,因此,对空气湿度很敏感。当空气湿度低于70%时,自是体表面很易失水,表面干萎,刺生长也受抑制,产量低,空气湿度高于95%时,子实体易畸形,刺粗,球块状,严重时产生分枝,最适宜的空气湿度是90%~95%。 空气,猴头菇子实体生长对空气中二氧化碳很敏感,二氧化碳含量低,在0.03~0.1%之间,子实体坚、白、球大;空气二氧化碳含量超过0.1%,子实体松,单个重量明显轻。采收后,再生能力也差。高二氧化碳对猴头菇子实体的影响往往不易被察觉,但如果二种二氧化碳含量对比试验时,就很容易发现产量的高低。 光线:猴头菇菌丝在黑暗和有光的条件下均能生长,在黑暗条件下生长更快,子实体生长要求有一定的散光,50~200勒克斯为好,光线过强,生长反为不良。 酸碱度:猴头菇菌丝再PH5.5左右,生长最好,PH7以上,PH4以下生长不良,PH2以下,PH9以上时,菌丝完全不能生长。 猴头菇菌丝在生长过程中会分泌有机酸。所以在生长过程中随着时间的延长,培养基会逐渐酸化,所以培养基中要求添加CaCo5,以缓冲酸度的下降。 1、 猴头菇的培养: 培养基:木屑、棉籽壳、甘蔗渣、山上长的野草、作物秸秆、中药渣、酒糟均可作为木材代用品栽培猴头菇,各地菇农可根据当地条件因地制宜采用。 下面几种配方是目前生产上使用较多的培养基: 棉籽壳40%,木屑35%,麸皮13%,米糠10%,碳酸钙1%,蔗糖1%,含水量60%。 甘蔗渣78%,麸皮20%,蔗糖1%,石膏粉1%,含水量60%/。 锯木屑78%,麸皮20%,蔗糖1%,石膏粉1%,含水量60%。 锯木屑70%,米糠28%,蔗糖1%,石膏粉1%,含水量60%。 豆杆粉78%,麸皮20%,蔗糖1%,石膏粉1%,含水量60%。 装瓶(袋)灭菌:培养基配制后当天装瓶(袋),当天灭菌。750毫升的瓶子应装400~420克鲜料,17×37公分的袋应装鲜料2斤,装到瓶肩为止,装好后表面压平,再用1.2公分直径的锥形棒戳一个洞,瓶口用4层报纸或一层牛皮纸加二层报纸封扎,塑料袋用颈套,塞棉塞,1.5公斤/平方厘米蒸汽压×2小时灭菌。灭菌后的冷却,接种,培养方法同灵芝。培养温度25℃左右。菌丝长到大半瓶,表面开始形成子实体后,可将形成菌蕾的瓶子移到栽培室培养。 栽培室:栽培室大小、窗户的设置要求同灵芝栽培,和灵芝栽培室不同的方面:光线科较暗,能看得清物即可。保湿条件比灵芝要好,要能经常保持90~95%的湿度,空气要求新鲜,通风要求,不宜直接吹风,所以窗宜多一些。 管理:形成菌蕾的瓶子或塑料袋移入栽培室后应随即去掉包扎的封口纸或棉塞,不是封口纸或棉塞接触菌蕾。 瓶子或塑料袋移入栽培室时应以一定的规则排放,使生长的子实体能获得良好的空气和散光。 排放要求:每行宽为二瓶(二袋),底和底相靠,口向外,长不限,高为12~13瓶获9~10袋,每二行留一条走道,走道宽70公分,走道应与窗口对准以利通风。 空气湿度:栽培种刚脱去封口纸时菌蕾还幼嫩,不耐干燥,故要求空气湿度达95%左右,当子实体长出刺后,空气湿度应保持在85~90%。空气湿度稍低,可是菌刺生长受抑制,能提高猴头菇质量。保持湿度的方法是人工喷雾活用定时器控制的空压机喷雾,1天喷3~4次。雾要向空中喷,不宜直喷于子实体上。 温度:要求保持在16~18℃,不宜超过22℃,当气温较高时,白天应关门,喷雾,晚上开足门窗。控制温度的主要措施是安排好栽培季节。上海地区适宜的制种季节为10月上旬,出子实体的季节为11月上旬至次年的3月。 通气:空气二氧化碳含量对子实体的生长有决定性的影响。空气良好,球白、坚、产量高,空气不良,球色暗,松、产量低,每天应开窗2~3次,每次2~3小时。 4、采收:子实体球块已基本长大,菌刺长约1公分时及时用钩刀从袋口或瓶口中钩出,随即清除培养基表面残老菌丝,以防生霉,生虫,栽培种仍放于原处培养再次生长子实体,每瓶(袋)可收4~5次。
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