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李泽泳 张智 李亚红 张珍 李楠 邱厚匡（广东省第二人民医院实验中心 广东广州 510317） 【中图分类号】R593.2 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）42-0052-02 【摘要】 目的 探讨ANA、ds-DNA、DNP、ENA抗体联合检测在自身免疫性疾病诊断中的临床意义。方法 ANA、ds-DNA采用间接免疫荧光法法；DNP抗体采用胶乳凝集法；ENA多肽抗体谱采用酶免斑点（条带）法。结果 96例系统性红班狼疮患者中，ANA、ds-DNA、DNP、Sm、RNP、SS-A、SS-B和Scl-70阳性率分别为83.33%、62.50%、48.95%、36.45%、42.78%、53.12%、35.41%和4.16%；60例类风湿性关节炎患者中，ANA和DNP的阳性率分别为18.33%和8.33%；20例混合性结缔组织病患者中，ANA和RNP的阳性率分别为10%和100%；12例PSS患者中，ANA、RNP和Scl-70的阳性率分别8.33%、8.33%和58.33%；19例SS患者中，ANA、RNP、SS-A和SS-B阳性率分别为15.78%、15.78%、68.42%和36.84%；4例PM/DM患者中Jo-1阳性率为25.00%。45例健康体验人群多种抗体检测均为阴性。结论 ANA、ds-DNA、DNP、ENA抗体联合检测对自身免疫性疾病的诊断、鉴别诊断、治疗和预后均有重要的临床意义。 【关键词】自身免疫性疾病 自身抗体 临床意义 多数自身免疫性疾病患者血清中都会出现自身抗体，这些自身抗体在自身免疫性疾病的诊断和疗效评价方面具有重要意义[1]。一种自身免疫性疾病可检出多种自身抗体，检出一种自身抗体可涉及多种相关自身免疫性疾病，有些抗体对某种自身免疫性疾病是特异的，有些是非特异的，因此临床往往参考多种免疫指标做出诊断[2]。本文对211例自身免疫性疾病患者和45例健康体检人群进行了多种自身抗体联合检测，结果如下： 1 资料与方法 1.1 一般资料 收集2011年6月至2012年6月我院门诊及住院的自身免疫性疾病患者211例，其中男27例、女194例，年龄12-83岁。系统性红班狼疮（SLE）96例、类风湿性关节炎（RA）60例、混合性结缔组织病（MCTD）20例、全身性进行性硬化症（PSS）12例、干燥综合症(SS)19例、多发性肌炎/皮肌炎（PM/DM）4例，全部患者均符合相关诊断标准。选本院职工45例健康体检人群作为正常对照组（男10例、女35例）。均早晨空腹抽血3ML后分离血清于冰箱保存，3天内完成检测。 1.2 方法 1.2.1 ANA测定采用间接免疫荧光法（IIF）测定。待测血清用稀释液1:100稀释，血清稀释≥1:100为有临床意义。阴、阳对照不稀释，每次试验均作阴、阳对照，操作严格按说明书进行。试剂盒均购自德国欧蒙公司。 1.2.2 ENA测定 采用欧蒙印迹法（EL）检测ENA自身抗体谱，包括抗Sm抗体、抗SSA、抗SSB、抗nRNP、抗Scl-70、抗Jo-1、抗rRNP等7种不同抗原lgG类抗体。试剂盒购自德国欧蒙公司。严格按照说明书操作。 1.2.3 ds-DNA测定 采用间接免疫荧光法（IIF），试剂盒购自德国欧蒙公司。严格按照说明书操作。 2 结果 211例自身免疫性疾病患者和450例健康体检人群ANA、ds-DNA、DNP、ENA抗体谱联合检测结果见表1。 表1 ANA、ds-DNA、DNP、ENA抗体谱联合检测结果【阳性例数（%）】   3 讨论 SLE是一种慢性多系统的疾病，因伴有多种血清自身抗体，被认为是一种典型的自身免疫性疾病。ANA泛指各种核成分的抗体，是一种广泛存在的自身抗体，无器官特异性和种属特异性[3]。ANA对SLE的敏感性较高，本文阳性率为83.33%，但其特异性较低。其他自身免疫性疾病如RA、MCTD、PSS、SS阳性率分别为18.33%、10.00%、8.33%、15.78%。未经治疗的SLE患者，ANA滴度多呈显著性升高，并且随病情的活动而上升，亦随病情稳定而下降至正常。因此，ANA滴度可作为病情判断的参考指标。 ds-DNA抗体见于活动性狼疮或有广泛皮肤损害的红斑狼疮，是SLE特异性的标志抗体之一，其他疾病少见阳性。本文阳性率为62.50%，其效价的高低也代表疾病的活动性，活动期增高，缓解期降低，对疾病活动期的判断和药物疗效观察很有帮助[4]。 DNP抗体又称抗核蛋白抗体（狼疮因子），有可溶性和不可溶性两部分，可分别产生相应的抗体。不溶性抗DNP抗体通常不完全被DNA和组蛋白所吸收，它是形成狼疮细胞的因子。可溶性DNP抗原存在于各种关节炎病人的滑膜液中，其相应的抗体也可出现于RA病人的滑膜液中。本文DNP抗体与SLE病情活动呈正相关系，经治疗症状缓解后DNP抗体可转阴。DNP抗体检测弥补了传统LEC法实验影响因素繁多，阳性率低，易造成假阴性或假阳性的不足，是SLE另一标志抗体。 ENA抗体是针对核内可提取性核抗原（ENA）的一种自身抗体，ENA把不同的抗原吸附在硝酸纤维膜上，能显著提高自身抗体的灵活性和特异性。可一次检出Sm、RNP、SS-A、SS-B和Scl-70、Jo-1等六种自身抗体，对自身免疫性疾病的诊断具有重要意义。 本文Sm抗体仅见于SLE，阳性率为36.45%，是SLE又一血清学标志抗体，对SLE诊断有高度特异性。对于早期不典型的SLE患者，Sm抗体阳性则可SLE的诊断。由于Sm抗体与SLE病情活动与否无关，治疗后Sm抗体仍持续阳性，故可作为回顾性诊断指标。RNP抗体是MCTD的特异性血清学指标，本文20例MCTD患者RNP均为阳性，阳性率为100%。SLE患者中RNP阳性率为42.78%，可能与雷诺现象有关。RNP阳性率在PSS和SS患者中分别为8.33%和5.78%。SS-A和SS-B抗体在SS患者中阳性率分别为68.42%和36.84%，SS-B常伴随SS-A抗体同时出现，对SS诊断具有相对特异性。SS-A和SS-B抗体在SLE中阳性率分别为53.12%和35.41%，其他结缔组织病极少阳性。Scl-70抗体是PSS的特异性标志抗体，本文12例PSS患者中Scl-70阳性7例，阳性率为58.33%，与文献报道基本相符。本文显示少数SLE患者（4.16%）Scl-70抗体也呈阳性。Jo-1抗体是PM/DM的标志抗体，本文阳性率25.00%，敏感性低，但其特异性高，其他疾病均未能检出阳性。 由本文的实验结果可见，自身免疫性疾病存在一些对疾病诊断具有高度特异性的抗体。一种自身免疫性疾病可产生多种自身抗体或一种自身抗体与多种自身免疫性疾病相关。因此，ANA、ds-DNA、DNP、ENA抗体联合检测对自身免疫性疾病的诊断、鉴别诊断、评价疗效等方面均有着重要的临床意义，避免了因单项检测结果而给临床带来漏诊、延诊、误诊等。 |
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