| 糖尿病是一种严重危害健康的常见慢性终身疾病，已成为21世纪人类健康的主要威胁之一。据资料统计，目前世界上已有3％的人口患有糖尿病，而其中90％以上的患者为2型糖尿病(即非胰岛素依赖型糖尿病)。据预计到2025年，糖尿病患者将超过3亿。糖尿病是一种严重的内分泌代谢紊乱病症，由于胰岛素代谢不足而引起的代谢性疾病，可导致一系列并发症出现，如糖尿病性心脑血管疾病、眼病、肾病及神经疾病等系列并发症，并由此导致截肢、失明甚至死亡的严重后果。糖尿病已被列为亚洲前十位“杀手”之一，它的流行程度已超过感染性疾病的威胁。国际糖尿病研究所主任PAULAIMMER教授说：“糖尿病的高速进展可能较爱滋病等危害更大。所以，积极预防和治疗糖尿病已迫在眉睫。 高血糖和由于长期高血糖而导致的各种威胁生命的并发症是糖尿病患者具有的最普遍特征。现代流行病研究和临床实验有力的证明了：高血糖是糖尿病患者伴有并发症的主要原因，在糖尿病并发症研究领域的最新进展，认为糖尿病并发症的4种不同致病机理，存在一个由高血糖诱导的共同过程，即线粒体电子传递链超氧化物过量产生，因此，预防和抵抗糖尿病并发症，改善糖尿病患者生活质量的关键是有效地控制血糖。降低血糖将可能降低发生微血管系统并发症的危险，而且最有可能的是减少发生大血管并发症的几率。 咖啡是世界上销量最大的饮料之一，在人们生活中日益渗透，它的主要成分为咖啡因和绿原酸。近年来许多科研工作者对咖啡的药理活性进行了深入的研究。最新研究表明，咖啡中的咖啡因除具有兴奋神经作用外，还可阻碍糖吸收，具有降低脂肪的作用；另外，咖啡中含有的绿原酸是一种与人类健康密切相关的生理活性物质，其具有利胆、抗菌、抗过敏、抗致畸、增高白血球、抗氧化、清除体内DPPH自由基、抗HIV、预防心血管疾病、糖尿病和某些癌症等作用。最近吉罔等人报道，咖啡不仅可以抑制体内脂肪的积蓄，还可以抑制血糖上升。所以咖啡饮料除了可以用来调节人们的紧张生活以外，还有可能用来辅助减肥和治疗糖尿病，但作用的活性成分并不明确，故本实验对咖啡中可能具有抗糖尿病作用的咖啡因和绿原酸有目的的进行分离，并通过体外及体内实验，阐明咖啡具有抗糖尿病的作用，明确咖啡中降糖的有效成分。 实验分离得到两个单体化合物，通过理化鉴定、薄层层析、紫外光谱、红外光谱及高效液相色谱等，确定化合物Ⅰ为咖啡因，化合物Ⅱ为绿原酸。 本实验建立了RP-HPLC法测定咖啡中咖啡因和绿原酸的含量，采用ZORBAXSB-C18柱(150mm×4.6mm，5μm)，以醋酸缓冲液为流动相，流速为0.8mL·min-1，紫外检测波长为254nm，测定咖啡中咖啡因的含量；以柠檬酸缓冲液和甲醇梯度洗脱(80：20→50：50)，流速为0.5mL·min-1，紫外检测波长为325nm，测定咖啡中绿原酸含量。结果咖啡因在0.05～0.80mg·mL-1的浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.99973)，平均回收率(n=6)为99.28％，RSD为0.7％；绿原酸在0.04～0.64mg·mL-1的浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.99903)，平均回收率为99.39％，RSD为0.7％。本方法准确可靠，适合于咖啡中咖啡因和绿原酸的含量测定，从而为咖啡抗肥胖和抗糖尿病的药理研究提供相关数据。 在药理实验中，主要观察咖啡热水提取物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的阻碍作用，以及对于大鼠餐后血糖上升的抑制作用。通过体外实验观察咖啡热水提取物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的阻碍作用。通过体内实验在大鼠糖质负荷后，观察对其血糖上升的抑制作用。咖啡中的主要成分咖啡因对α-葡萄糖苷酶的活性没有抑制作用，而咖啡中的另一主要成分绿原酸和阿卡波糖(拜糖平acarbose)一样，对α-葡萄糖苷酶的活性具有较强的抑制作用，并且在糖质负荷后，也能明显抑制血糖上升。说明咖啡对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用与绿原酸有深刻的关系。 |
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