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一些农技专家或农资企业技术顾问在柑桔种植技术培训中,往往对生理黄化树与黄龙病树的看法不一致,造成不少果农举棋不定,不能及时挖除黄龙病树,加速病原在果园传染。黄龙病防控专家、广西柑桔研究所植保室主任邓明学认为,当前黄龙病防控培训很欠缺,也不够广泛,加之多年来疑似黄龙病树通常被称为“黄化树”,这种叫法误导了果农,严重影响对柑桔黄龙病进行有效遏制。
为此,记者邀请实践经验丰富的柑桔专家,介绍当前柑桔黄龙病的田间诊断和实验室常用检测方法,以供广大果农参考。目前柑桔黄龙病的诊断方法主要有田间症状诊断、嫁接诊断、电子显微镜观察、PCR生物技术检测(即DNA检测)等。
田间辨别：“不熟果”可准确判定
田间症状鉴别是较简便、最直接的一种诊断方法,一旦有柑桔树出现红鼻子果(也叫“不熟果”),即可断定是黄龙病树；而对未出现红鼻子果果园的早期诊断,一般果农较易与生理黄化树相混淆,难以准确判断。
“对于早期诊断,具备丰富经验的农技人员或科研人员,可通过几个重要特征来判断,准确率还是比较高。”广东省农科院果树所高级农艺师李荣介绍,第一,生理黄化多为整株黄化,且通常是老叶片先黄或落叶,黄龙病树一般是新梢新叶先发黄,应先排查是否有机械损伤、脚腐病、施肥不当烧根、断根过度、天牛等可能的为害。第二,黄龙病树的植株春梢黄化均匀,或春梢正常转绿至夏天温度升高后,褪色斑驳花叶。第三,正常管理的果园开始发病时,只有小部分植株出现零星的一两个枝梢发黄(俗称“插金花”),而不会突然整片果园都发生黄化,也可判断感染了黄龙病。
邓明学认为,田间用红鼻子果来识别黄龙病最准确,果农也最易掌握。在12月甚至次年1月果实不转熟,果蒂附近一端呈黄色,而另一端呈绿色,整个果实着色不均匀,并且比正常果显著变小,果形歪斜且种子败育等,都是黄龙病树的症状。而且已有研究表明,红鼻子果与黄龙病的相关性达到100%。 温州蜜桔红鼻子果 在清远卓银技术顾问古威扬看来,事实上很多果园都有黄龙病树,最明显的症状是花斑黄化的秋梢,叶子小且硬脆易折,但管理到位的果园发病率并不高。而且他认为,除了黄龙病,其他会传染造成柑桔大面积黄化的病害很少。 实验室检测：可用于早期诊断实验室检测常用PCR生物技术检测,此法也较为先进。PCR即聚合酶链式反应,是指在DNA聚合酶催化下,以母链DNA为模板,以特定引物为延伸起点,通过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程；再结合相应的软件对所获得的产物DNA片段进行分析与检测。
根据柑桔黄龙病病菌亚洲种16SrDNA基因序列,设计特异引物,可构建柑桔黄龙病病菌的PCR检测体系。因其受污染可能性小、重复性好、灵敏度高、操作简便,可为柑桔黄龙病害的早期诊断,提供准确、灵敏、快速的检验。如2012年12月3日,佛冈县植保植检站送往广东省植物检疫站的18个水田桔园黄化枝叶样本,即采用PCR方法,检测出15个感染黄龙病病原。
据了解,华南农业大学柑桔黄龙病研究室、广东省农科院果树所、广西柑桔研究所、广西农科院园艺研究所等单位均可采用PCR检测黄龙病病原,每个样本费用在100-150元不等。而广东省植物检疫站隶属省农业厅,不对外开放。
广东省植物检疫站科长王琳介绍,症状明显、老熟的叶片材料,可采用肉眼观察、电镜观测、PCR检测等方法,未显症的柑桔苗木则需PCR检测。邓明学表示,目前国内的实验室通常都使用PCR检测方法,但检测结果只做参考,不具法律效应；要获取具备法律效应的检测结果,需要指示植物,通过嫁接到对黄龙病最敏感的椪柑上来观察症状表现与检测,时间长达1.5-2年,平常很少用。
他提醒,若有果农送检,采样的黄枝梢(需带枝梢、多片叶子)最好用保鲜薄膜包好,并放上一点稍微带湿的纸巾或棉花保湿,通过快递两三天能到达实验室,一周内可出结果,一般是批量检测,每批40-50个左右。
记者查询资料发现,电子显微镜检查容易造成漏检与假阴性,多用来观察黄龙病病原的结构等,很少直接用来作病害检测。 |
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