一种利用益生菌进行松花粉发酵的新工艺的制作方法

专利名称一种利用益生菌进行松花粉发酵的新工艺的制作方法
技术领域本发明涉及微生物发酵领域，具体涉及一种利用益生菌进行松花粉发酵的新工艺。
背景技术松花粉是一种天然高级营养食品，但是没经过处理的花粉往往附有一些杂菌，直接食用可能会使人致病。另外，松花粉带有一种令人不太喜欢的味道。作为食品在满足营养的同时，必须具有色、香、味具佳的条件，才乐于被人接受。松花粉能使某些敏感体质的人群产生过敏反应，花粉粒有一层较厚的外壁，这层外壁对酸碱等理化因素都比较稳定，不利于营养物质的吸收利用。益生菌在人体肠道中具有抗诱变、抗癌、改善乳糖代谢率、降低血清胆固醇、刺激免疫系统的功能。另外，产生的细菌素能够抑制产毒大肠杆菌在食物和人体中的生长，从而减少或降低某些食物中毒的风险，此外也有抑制贾第虫病(Giardia)和幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori)的作用。植物乳杆菌和副干酪乳杆菌是重要的益生菌，利用其对松花粉进行发酵，既可灭菌，又可破壁；既可脱敏，又不破坏其营养成分的方法，还可改变食品风味及营养结构。发酵后的松花粉具有浓郁的乳酸风味，能克服天然松花粉口感和风味差的缺陷，并且富含活性乳酸菌，而且产品较好地保存了各种活性酶和维生素等热敏性物质。通过发酵使松花粉成为一种高蛋白低脂肪的营养食品，同时兼有益生菌保健功能的优质营养强化剂。目前已知的松花粉发酵大多采用嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、酵母菌(Saccharomycetes)双歧杆菌(Bifidobacterium)等，尚未见到利用植物乳杆菌及副干酪乳杆菌进行松花粉发酵的报道。
发明内容
本发明的目的正是为了克服上述技术的不足，而提供一种利用益生菌进行松花粉发酵的新工艺，涉及植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Lp-115和副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)Lpc-37及其在松花粉发酵中的应用。本发明的目的是通过如下技术方案来完成的。这种利用益生菌进行松花粉发酵的新工艺，该工艺的步骤如下:I)、松花粉采集后及时晾晒、过筛除杂、烘干处理；2)、采用6tlCo Y辐射灭菌法对松花粉进行灭菌处理；3)、采用植物乳杆菌Lp-115和副干酪乳杆菌Lpc-37为松花粉发酵菌种进行发酵；4)、发酵结束后，发酵产物于40 50°C干燥箱烘干或减压蒸发至水分5% 7%。所述松花粉采集的预处理方法步骤如下:I)、马尾松花粉成熟时，从基部将花穗剪下，立即于避风向阳、干燥平整处暴晒I 2d ;
2)、暴晒后，用米筛进行粗筛，然后过80目筛除杂；3)、利用除湿机进行干燥处理，使松花粉含水量降至10%。所述的松花粉的6tlCo Y辐射灭菌方法步骤如下:I)、将松花粉按需要量进行密封包装；2)、将样品放入辐射场中，样品离地面20cm，以辐射源为中心均匀放置，辐射剂量6 12kGy ；3)、灭菌结束后于4°C条件下贮存。所述的松花粉进行固体发酵:I )、用无菌水调节松花粉含水量为20% 40%，初始pH调整为5 8 ;2)、按接种量6% 12%，菌种植物乳杆菌:副干酪乳杆菌的比例为2:1进行接种，于温度28 32 °C条件下发酵3 5d。所述的松花粉进行液体发酵:I )、用无菌水调节松花粉含水量为50% 70%，初始pH调整为5 8 ;2)、按接种量6% 12%，菌种植物乳杆菌:副干酪乳杆菌的比例为2:1进行接种，于温度28 32°C，100 150r/min条件下发酵3 5d。本发明的有益效果为:本发明公开了 一种利用植物乳杆菌(LactobaciIIusplantarum)Lp-115 和副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)Lpc-37 进行松花粉发酵的新工艺，可显著改善松花粉溶解性、口感、风味，以及提高松花粉营养价值，发酵后松花粉的粗蛋白含量提高16.89%以上。而且发酵后松花粉中的活性益生菌数可达9.21 X IO9Cfu/g，使其兼具花粉及益生菌功效，可作为保健产品的理想配料。
具体实施例方式下面通过具体实施方式
对本发明作进一步阐述，实施例将帮助更好地理解本发明，但本发明并不仅仅局限于下述实施例。本发明克服了松花粉在食品及保健品应用中的一些缺点，如特殊气味、花粉壁对营养吸收的阻碍、致敏性、杂菌污染等，同时使益生菌的生理功能与松花粉保健功效实现完美结合。本发明公开了一种利用乳酸菌进行松花粉发酵的新工艺。本发明所用的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)LP-1l5 和副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)Lpc-37为丹尼斯克(中国)有限公司生产并已经进行商业销售的菌种，具有可靠的安全性、较强的乳酸产生能力及定植能力；所用优质马尾松花粉产自于千岛湖林场，纯天然、无污染。这种利用益生菌进行松花粉发酵的新工艺，该工艺的步骤如下:I)、松花粉采集后及时晾晒、过筛除杂、烘干处理；2)、采用6tlCo Y辐射灭菌法对松花粉进行灭菌处理；3)、采用植物乳杆菌Lp-115和副干酪乳杆菌Lpc-37为松花粉发酵菌种进行发酵；通过单因素试验筛选确定植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Lp-115和副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)Lpc-37 为松花粉发酵最佳菌种；利用 Plackett-Burman 试验和响应面方法对其进行条件优化，确定了显著性影响因素接种量、菌种比例、温度、初始pH ；利用响应面方法对其进行条件优化，建立回归模型。
4)、发酵结束后，发酵产物于40 50°C干燥箱烘干或减压蒸发至水分5% 7%。一、松花粉采集预处理方法(I)、清明前后马尾松花粉成熟时，从基部将花穗剪下，立即于避风向阳、干燥平整处暴晒I 2d ;(2)、暴晒后，用米筛进行粗筛，然后过80目筛除杂；(3)、利用除湿机进行干燥处理，使松花粉含水量降至10%左右，以利于长期贮存。二、松花粉的6°Co Y辐射灭菌方法(I)、将松花粉按需要量进行密封包装；(2)、将样品放入辐射场中，样品离地面20cm，以辐射源为中心均匀放置，辐射剂量6 12kGy ；(3)、灭菌结束后于4°C条件下贮存，此法灭菌效果显著，花粉不结块、无霉变、颜色正常、对营养物质影响较小。三、分析方法(I)、花粉活菌计数方法:对松花粉进行梯度稀释并以倾注法倒平板，采用厌氧法或双层平板法培养，菌落计数并计算发酵花粉中的活菌数；(2)、pH测定方法:称取5g松花粉样品加15mL蒸馏水振荡研磨制成均匀稀释液，然后用PH计测定(液体发酵可直接测定)；

(3)、粗蛋白测定方法:按照食品安全国家标准——食品中蛋白质的测定方法进行。四、松花粉固体发酵(I)、采用6tlCo Y辐射法对松花粉进行灭菌处理；(2)、用无菌水调节松花粉含水量为20% 40%，初始pH调整为5 8 ;(3)、按接种量6% 12%，菌种比例(植物乳杆菌:副干酪乳杆菌)2:1进行接种，于温度28 32°C条件(或含水量50% 70%，转速100 150r/min)下发酵3 5d ;(4)、发酵产物于40 50°C干燥箱烘干至水分5% 7%。五、松花粉液体发酵(I)、采用6tlCo Y辐射法对松花粉进行灭菌处理；(2)、用无菌水调节松花粉含水量为50% 70%，初始pH调整为5 8 ;(3)、按接种量6% 12%，菌种比例(植物乳杆菌:副干酪乳杆菌)2:1进行接种，于温度28 32°C，100 150r/min条件下发酵3 5d ;(4)、发酵产物减压蒸发至水分5% 7%。本发明提供了一种利用植物乳杆菌(Lactobacillus 口13]^3；101111)14)-115和副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei) Lpc_37进行松花粉发酵的新工艺。该发明有益效果主要体现在:利用这两种菌种对松花粉进行发酵，既可抑制有害菌，又可破壁；既可脱敏，又不破坏其营养成分，还可改变食品风味及营养结构。发酵后的松花粉具有浓郁的乳酸风味，以其为主要原料开发的保健类食品口味酸甜，能克服天然松花粉口感和风味差的缺陷，使产品富含乳酸活性菌，而且产品较好地保存了各种活性酶和维生素等热敏性物质。通过发酵使松花粉成为一种高蛋白低脂肪的营养食品，同时兼有益生菌保健功能的优质营养强化齐U。发酵后花粉中的活菌数为9.21X109cfu/g，粗蛋白含量提高16.89%以上。
最后，应当指出，以上实例仅是本发明较有代表性的例子。显然，本发明的技术方案并不限于上述实例，还可以有许多变形，本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。
权利要求
1.一种利用益生菌进行松花粉发酵的新工艺，其特征在于:该工艺的步骤如下: 1)、松花粉采集后及时晾晒、过筛除杂、烘干处理； 2)、采用6tlCoy辐射灭菌法对松花粉进行灭菌处理； 3)、采用植物乳杆菌Lp-115和副干酪乳杆菌Lpc-37为松花粉发酵菌种进行发酵； 4)、发酵结束后，发酵产物于40 50°C干燥箱烘干或减压蒸发至水分5% 7%。
2.根据权利要求1所述的利用益生菌进行松花粉发酵的新工艺，其特征在于:所述松花粉采集的预处理方法步骤如下:1)、马尾松花粉成熟时，从基部将花穗剪下，立即于避风向阳、干燥平整处暴晒I 2d; 2)、暴晒后，用米筛进行粗筛，然后过80目筛除杂； 3)、利用除湿机进行干燥处理，使松花粉含水量降至10%。
3.根据权利要求1所述的利用益生菌进行松花粉发酵的新工艺，其特征在于:所述的松花粉的6tlCo Y辐射灭菌方法步骤如下: 1)、将松花粉按需要量进行密封包装； 2)、将样品放入辐射场中，样品离地面20cm，以辐射源为中心均匀放置，辐射剂量6 12kGy ； 3)、灭菌结束后于4°C条件下贮存。
4.根据权利要求1所述的利用益生菌进行松花粉发酵的新工艺，其特征在于:所述的松花粉进行固体发酵: 1)、用无菌水调节松花粉含水量为20% 40%，初始pH调整为5 8; 2)、按接种量6% 12%，菌种植物乳杆菌:副干酪乳杆菌的比例为2:1进行接种，于温度28 32°C条件下发酵3 5d。
5.根据权利要求1所述的利用益生菌进行松花粉发酵的新工艺，其特征在于:所述的松花粉进行液体发酵: 1)、用无菌水调节松花粉含水量为50% 70%，初始pH调整为5 8; 2)、按接种量6% 12%，菌种植物乳杆菌:副干酪乳杆菌的比例为2:1进行接种，于温度28 32°C，100 150r/min条件下发酵3 5d。