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专利名称枯草芽孢杆菌菌剂、制法及其使用方法 技术领域本发明枯草芽孢杆菌菌剂、制法及其使用方法，属于微生物发酵及植物病害生物防治领域，专用于植物病害的生物防治。 随着化学农药的弊端(毒害人畜、破坏生态平衡等)逐渐被人们所认识，生物防治日益受到重视。在植物病虫害生物防治中，以害虫生防尤其是Bt生物农药防治鳞翅目害虫最为成功，病害生防相对较为落后，利用的主要防病微生物有芽孢杆菌、木霉、放线菌等，其中以芽孢杆菌的研究开发最为活跃，国外己成功地用于水果防腐保鲜等，国内进行过防治小麦赤霉病、水稻白叶枯病生防菌剂的研究，但多限于室内平皿筛选，极少走向大田，尚未大面积田间试验和工业化生产。 本发明的目的是提供一种枯草芽孢杆菌菌剂、制法及其使用方法，用于植物病害的生物防治，具有防病增产效果，适合工业化生产，产品使用简单，无污染、无副作用，具有生物农药对人畜安全的特点。 本发明所提供的枯草芽孢杆菌菌剂含有菜丰宁B1菌株、菜丰宁B2菌株、麦丰宁B3菌株总量为5亿/克以上。 枯草芽孢杆菌菌剂制法包括1发酵(1)菌种活化(2)种子罐培养发酵培养基配方为豆饼粉1-3％，麸皮1-3％,CaCO30.1％,MgSO40.03％,(NH4)2SO40.03％,Na2HPO40.2％。 活化后的菌种扩大培养后，接入1吨种子罐，接种菌浓度为109-1011CFU/ml，接种体积为100-200毫升。种子罐培养温度为30℃-32℃，通气量为1∶1，搅拌速度为300转/分。种子罐培养时间为25-40小时。培养期间进行质量和菌量检测。 (3)放大培养发酵时间为36小时，培养基配方、发酵条件与质量检测方法同种子罐。 2．粉剂制作发酵液与吸附剂按1∶10混匀，粉碎，150目过筛。 枯草芽孢杆菌菌剂中使用的枯草芽孢杆菌菌株为菜丰宁B1菌株、菜丰宁B2菌株、麦丰宁B3菌株或者为这三种菌株的以任何比例的混合物。菌剂为液剂和粉剂。 上述枯草芽孢杆菌菌剂的使用方法为，每亩用菌剂100-300克，加水40-60公斤，采用拌种、灌根、蘸根、喷雾等方法防治植物病害。最为推崇的使用方法是种子处理或苗期处理。 枯草芽孢杆菌菌剂中使用的枯草芽孢杆菌菌株为菜丰宁B1菌株、菜丰宁B2菌株、麦丰宁B3菌株均为公知公用菌株，其测定鉴定方法为已知技术，见参考文献《南京农业大学学报》1994,17(增刊)，63-66,“8株植病生防芽孢杆菌菌株的分类鉴定”。 本发明所提供的枯草芽孢杆菌菌剂及其使用方法，适合工业化生产，产品使用简单，无污染、无副作用，具有生物农药对人畜安全的优点。用于植物病害的生物防治，尤其是细菌性病害的田间防治效果达到60-80％以上，对试验作物的生长阶段(如种子发芽、幼苗生长、生殖生长等)有明显的促进作用，增产10-30％以上。其中，对大白菜软腐病的防治效果为70％，超过农用链霉素，增产白菜20％；防治油菜菌核病效果为60％以上，与多菌灵相近，增产油菜籽15％；防治小麦纹枯病的效果为60％，优于井冈霉素和粉锈宁，增产小麦10％以上。产品可操作性强，易被技术干部和农民接受，易于掌握。本发明所提供的枯草芽孢杆菌菌剂大面积使用结果证明其投入产出比最低为1∶8，一般为1∶15左右。 试验证明枯草芽孢杆菌菌剂含枯草芽孢杆菌、抗菌素和促生物质，其防病增产机理在于①抑制病菌的生长繁殖，打断病菌生活史；②诱导作物对病菌产生抗性；③改变作物体围的微生物群落；④产生生长调节物质；⑤对植株有效部位定殖作用。 以“菜丰宁B1菌株”为主要成份的菌剂用于防治大白菜软腐病，防治效果为70％，增产白菜20％；以“菜丰宁B2菌株”为主要成份的菌剂用于防治油菜菌核病，效果为60％以上，增产油菜籽15％；以“麦丰宁B3菌株”为主要成份的菌剂用于防治小麦纹枯病的效果为60％，增产小麦10％以上。上述三种产品均已通过了中试，先后由南京信大公司江浦中试厂、南京市生物农药厂及淮阴电化厂生产。B1及B2发酵指数达1×1010,B3发酵指数达4×109以上，产品符合粉剂标准，含菌量均达5亿以上/g，工厂投入产出比1∶3，三种生物农药累计应用面积550万亩，产品无公害，无污染，深受社会欢迎，产生了巨大的社会经济和生态效益。 实施例1枯草芽孢杆菌菌剂含有菜丰宁B1菌株总量为5亿/克以上。制法包括1发酵1)菜丰宁B1菌株菌种活化2)种子罐培养发酵培养基配方为豆饼粉1％，麸皮1％,CaCO30.1％,MgSO40.03％,(NH4)2SO40.03％,Na2HPO40.2％。 活化后的菌种扩大培养后，接入1吨种子罐，接种菌浓度为109CFU/ml，接种体积为100毫升。种子罐培养温度为30℃，通气量为1∶1，搅拌速度为300转/分。种子罐培养时间为25小时。培养期间进行质量和菌量检测。 3)放大培养发酵时间为36小时，培养基配方、发酵条件与质量检测方法同种子罐。 2．粉剂制作发酵液与吸附剂按1∶10混匀，粉碎，150目过筛。 上述以“菜丰宁B1菌株”为主要成份的菌剂用于防治大白菜软腐病，枯草芽孢杆菌菌剂的使用方法为，每亩用菌剂100-300克，加水40-60公斤，采用拌种、灌根、喷雾等方法，防治效果为70％，增产白菜20％。实施例2枯草芽孢杆菌菌剂含有菜丰宁B2菌株量为5亿/克以上。菌剂制法包括1发酵1)菜丰宁B2菌株菌种活化；2)种子罐培养发酵培养基配方为豆饼粉3％，麸皮3％,CaCO30.1％,MgSO40.03％,(NH4)2SO40.03％,Na2HPO40.2％。 活化后的菌种扩大培养后，接入1吨种子罐，接种菌浓度为1011CFU/ml，接种体积为200毫升。种子罐培养温度为32℃，通气量为1∶1，搅拌速度为300转/分。种子罐培养时间为40小时。培养期间进行质量和菌量检测。 3)放大培养发酵时间为36小时，发酵条件与质量检测方法同种子罐。 2．粉剂制作发酵液与吸附剂按1∶10混匀，粉碎，150目过筛。 以枯草芽孢杆菌菜丰宁B2菌株菌剂液剂或粉剂用于防治油菜菌核病，每亩用菌剂100克，加水40-60公斤，采用拌种、蘸根、喷雾等方法防治植物病害。最为推崇的使用方法是种子处理或苗期处理。效果为60％以上，增产油菜籽15％实施例3枯草芽孢杆菌菌剂麦丰宁B3菌株量为5亿/克以上。菌剂制法包括1发酵1)麦丰宁B3菌株菌种活化2)种子罐培养发酵培养基配方为豆饼粉2％，麸皮2％,CaCO30.1％,MgSO40.03％,(NH4)2SO40.03％,Na2HPO40.2％。 活化后的菌种扩大培养后，接入1吨种子罐，接种菌浓度为1010CFU/ml，接种体积为100毫升。种子罐培养温度为30℃，通气量为1∶1，搅拌速度为300转/分。种子罐培养时间为30小时。培养期间进行质量和菌量检测。 3)放大培养发酵时间为36小时，培养基配方、发酵条件与质量检测方法同种子罐。 2．粉剂制作发酵液与吸附剂按1∶10混匀，粉碎，150目过筛。 上述枯草芽孢杆菌麦丰宁B3菌株菌剂为液剂或粉剂，每亩用菌剂100克，加水40-60公斤，采用拌种、喷雾等方法防治小麦纹枯病的效果为60％，增产小麦10％以上。 以上菜丰宁B1菌株、菜丰宁B2菌株、麦丰宁B3菌株三种菌剂无论是液剂还是粉剂均可以任何比例混合使用，这是普通技术人员可以做到，且效果也很好。工艺中菌种活化程序也是普通技术人员所熟悉和常用的。 权利要求 1．一种枯草芽孢杆菌菌剂，其特征在于含有菜丰宁B1菌株、菜丰宁B2菌株、麦丰宁B3菌株总量为5亿/克以上。 2．权利要求1所述枯草芽孢杆菌菌剂制法包括1)菌种活化；2)种子罐培养活化后的菌种扩大培养后，接入1吨种子罐，接种菌浓度为109-1011CFU/ml，接种体积为100-200毫升，种子罐培养温度为30℃-32℃，通气量为1∶1，搅拌速度为300转/分，种子罐培养时间为25-40小时，发酵液即为菌剂；3)放大培养发酵培养基配方为豆饼粉1-3％，麸皮1-3％,CaCO30.1％,MgSO40.03％,(NH4)2SO40.03％,Na2HPO40.2％，发酵条件同种子罐。 3．根据权利要求2所述枯草芽孢杆菌菌剂制法，其特征在于，增加粉剂制作发酵液与吸附剂按1∶10混匀，粉碎，150目过筛。 4．权利要求1所述枯草芽孢杆菌菌剂的使用方法包括每亩用菌剂100-300克，加水40-60公斤，采用拌种、灌根、蘸根、喷雾等方法防治植物病害。 5．根据权利要求4所述枯草芽孢杆菌菌剂的使用方法，最好的使用方法是种子处理或苗期处理。 全文摘要 本发明枯草芽孢杆菌菌剂、制法及其使用方法，属于微生物发酵及植物病害生物防治领域，菌剂含有菜丰宁B1菌株、菜丰宁B2菌株、麦丰宁B3菌株总量为5亿/克以上。制法菌种活化、种子罐培养、放大培养、粉剂制作。每亩用菌剂100—300克，采用拌种、灌根、蘸根、喷雾等方法防治植物病害。本发明所提供的枯草芽孢杆菌菌剂及其使用方法，适合工业化生产，产品使用简单，无污染、无副作用，具有生物农药对人畜安全的优点。用于植物病害的生物防治，尤其是细菌性病害的田间防治效果达到60—80%以上。 文档编号A01N63/00GK1237346SQ99114260 公开日1999年12月8日 申请日期1999年6月15日 优先权日1999年6月15日 发明者王金生, 吴健胜, 董汉松 申请人:南京农业大学 |
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