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【摘要】 目的对中药黄精及主要掺伪品长梗黄精进行鉴别，确保中药使用的安全有效。方法采用原植物鉴定、性状鉴定、显微鉴定和rapd手段，对随机引物进行筛选，通过1.8%琼脂糖凝胶电泳分离pcr产物。结果通过筛选23种rapd引物，得到ctggggctga，gctggctgac，tcccgaaccg 三种引物，经 pcr扩增产生足够的多态性谱带用于分析。结论 rapd技术为黄精与长梗黄精的区分提供了分子鉴别依据。 【关键词】 黄精 长梗黄精 显微鉴定 abstract：objectivefor the safe use of chinese traditional drug, polygonatum sibiricum and its fake called p. filipes, were identified by a new method. methodscharacter identification, microscopic identification and rapd were used. all of the samples were amplified by pcr system and separated by 1.8% electrophoresis. results23 arbitrary premiers were evaluated for the analysis of rapd the primers such as ctggggctga，gctggctgac，tcccgaaccg could yield enough polymorphic bands for the analysis. conclusionthe method rapd can be used for the identification of p. sibiricum and p. filipes. key words：polygonatum sibiricum； p. filipes; microscopic identification 李时珍《本草纲目》记载黄精“补诸虚，填精髓”，并称黄精为“服食要药”。其味甘、性平，具有补脾润肺，益气养阴的功能。在唐《千金翼方》中，孙思邈以自己长寿的经验所拟延年益寿方中，黄精是入选频率极高的药物。中医常用于治阴虚肺燥、干咳久咳、肾虚早衰。现代药理研究证明，黄精能增加冠状动脉流量，改善心肌营养，防止动脉粥样硬化，现代用于治疗冠心病、动脉硬化、糖尿病、肺结核、再生障碍性贫血及病后体弱等病证，有良好的康复保健效能。现代中药技术对黄精的利用不仅保留了中医古方黄精地黄丸、二精丸等，还研制了各种复方制剂如滋肾蓉精丸、消渴降糖片等，广泛地应用于中医临床。 黄精属在全世界约40种，我国有31种，分布于全国各地，尤以西南地区居多［1］。2005版《中国药典》记载中药黄精为百合科植物滇黄精polygonatum kongianum coll.et hemsl.，黄精p. sibiricum red.，多花黄精p. cyrtonema hua.的干燥根茎［2］。在使用过程中，有许多掺伪品，如长梗黄精、卷叶黄精、小玉竹，误食必然不能达到临床疗效甚至引发中毒，本文采用传统鉴定方法和rapd方法对黄精及其主要掺伪品进行区分，解决临床混用问题。 1 材料与方法 1.1 药品与器材 1.1.1 试剂琼脂糖（promega公司）；taq酶、dntp、引物、dl-2000，mgcl2，6×加样缓冲液、10×pcr缓冲液（宝生物公司）；溴化乙啶（eb）（sigma公司）；三羟甲基氨基甲烷（tris）（天津市凯通化学试剂有限公司）；其它试剂为分析纯。ctab提取液〔2%（w/v）ctab，100mm tris-hcl, ph 8.0 20 mmol/l edta， 1.4m nacl， 2%二巯基乙醇，ph 8.0〕。ctab/nacl溶液：（10% ctab ,0.7 mol/l nacl）ctab沉淀液〔1%（w/v）ctab, 50 mmol/l tris-hcl, 10 mmol/l edta, ph 8.0〕。高盐te缓冲液：（10 mmol/l tris-hcl, 10 mmol/l edta, 1m nacl, ph 8.0）。 |
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