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【原创】我的启动子分析方法

 Sj0824 2016-06-13
                                                                                                                                                                                                                      最近在做启动子区的克隆,真的是很让人恼火啊,前前后后差不多快两个月了,实验还是没有太大的进展,PCR得到的条带不是很理想,而且非特异性条带特别的多,让人欲哭无泪啊。不过最近运气不错啊,得到高人指点迷津,发现了之前的一直忽视而又没想到的问题,淘了点非常不错的酶,实验还行,心情也跟着舒畅许多!我想跟道友们分享的是一定要向会的人多请教,高人一句话,肯定胜过自己瞎琢磨。而且要仔细分析,才能不忽视重点。呵呵,啰嗦了。
对于基因启动子,可以按照本贴提供的第二种方法进行查找,如果道友们不放心的话,也可以自己用启动子分析软件进行分析。根据启动子的定义,本着不漏过错过的原则,可以选择基因翻译起始位点(ATG)上游4000bp下游1000bp共5000bp的碱基片段进行分析。综合多篇相关文献提供的启动子分析软件,可以用到FirstEF(http://rulai./tools/FirstEF/)、PromoterScan(http://www-bimas.cit./molbio/proscan/)、Berkeley Drosophila Genome Projecthttp://www./seq_tools/promoter.html)、softberry-fprom(http://linux1./berry.phtml?topic=fprom&group=programs&subgroup=promoter)及promoterInspector进行分析。其中最好的应该是promoterInspector,许多篇文章都直接采用的是这个软件的分析结果,但有点遗憾的是这个软件是收费的,试用前也要先注册,我很想用这个软件的,如果哪位道友能够提供相关帮助的话,将不胜感激啊。总得说来,我前面提到的ARTS基因用上述软件分析的启动子序列与genecopoeia公司给出的启动子序列还是吻合的,这里就不在详细介绍上述各软件的分析情况,很简单的。对于转录调控元件的分析,我也不是很懂,实验还没做到那一步,以后做到了再说

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